Способ количественного определения спазмолитина Советский патент 1980 года по МПК G01N21/24 

(54) СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ СПАЗМОЛИТИНА

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам количест венного определения третичных аминов, и может быть использовано в заводские химико-аналитических лабораториях, биохимических лабораторях клиник, контроль но-аналитических лабораториях аптекоуправлений, судебно-химических лабораториях. Известен способ количественного опре деления спазмолитина, основанный на реакции комплексообразования - с роданидом железа, фотометрированием окрашенного комплекса Cl. Недостатком способа является ни&кая избирательность, так как родашщы образуют окрашенные комплексы со многими органическими соединениями, содержащим азот. Наиболее близким к изобретению по технической сушности и достигаемому ре зуяьтату является способ количественного определения спазмолитина, заключаюшийся в обработке анализируемой пробы аствором хлоранйла в толуоле при нагревании до 100°С, с последующим JoTOметрированием полученного окрашенного раствора L23. Однако способ сложен (необходимо строгое соблюдение температурного режима) и длителен (1 ч). Целью изобретения является упрощение способа и сокращение времени определения. Поставленная цель достигается способом количественного определения спазмолитика, заключающимся в обработке анализируемой пробы раствором хлоранкпа в О,О049-0,ОО5 н. едком натре при рН среды 1,5-2,9, с последующей обработкбй полученного раствора хлороформом, отделением и фотометрированием хлороформного слоя. Отличительным признаком способа является использование в качестве растворителя О,О049-О,О05 н. едкого натра, проведение обработки при рН среды 1, последующая обработка полученко V3714 го окрашенного раствора хлороформом, отделение и фбтомётрирЬвйнйв хлорюформногослоя. Для количественного определения трё« тичнь1Х амииов анализируемую пробу рас творяют в дистиллированной воде. К части полученного раствора добавляют 8 мл насыщенного раствора хлоранила в 0,005н. едком натре, 5 мл цитратнрго буфервдго раствора рН 2,0. рН полученного окрашенного раствора измеряют с помощью потенциометра рН-34ЕО. Полученный раствор имеет рН 1,5-2,9, .Что соответствует оптимальным условиям 6бра;аювания OKpauieHHorx молекулярного продукта. Окрашенный молекулярный продукт иавлекагкуг хлороформом, Оптичёсйуй пЛбгйость . окрйшённого в фиолетовый цвет хпороформного слоя измеряют на фотоэлектрокодо- риметре ФЭК 56М в кювете йа 20 мм при (светофильтр N б), В ка чествё раствора сравнеиий йсшльаую хлорофо рмный экстракт смеси всех реактивов, в количествах, указанных вьше. Построение калибровочного графика для. спазмолитина, В делительные воронки помешают 1,5О; 1,75/2,00; 2,26; 2,50; 2,75; 3,ОО мл с йндартного раствора спазмолитина (концентрация спазмолитина.в стандартном растворе 1 мг/мл), добавляют дистилйрованной ВОДЫ до 5,0мл по 8 млкасьпаёнйбго раствора хЛо1эаш1Ла 8 О,ОО5 н, едком натре, по 5 мл цитрат ного буферного раствора с рН 2,0, обра- батывают 2X10 мл хлороформа. Хлороформные слои собирают в мерную колбу , на 25 мл и доводят хлороформом до мет«ки. Измеряют оптическую шютность хлороформнь1х слоев на ФЕК 56 М в кювете на 20 мм при жёлто-веленом светофильтре, Светопоглошение окрашенных растворов подчиняется закону Бугера-Ламберта-Бе-ра в пределах концентраций от 1,5О до 3,ОО мг/мл. Методом наименьших квадратов строят уравнение калибровочного , . ;.-- - фика, . Пример, Точную навеску (около ОД г) спазмолитика растворяют в воде в мерной колбе на ЮО мл и доводят водой до метки. 2,О мл полученного раствора помещают в Делительную воронку, доба1вляют 3мл дистиллированнрй воды, 8 мл насьшенного раствора Хлоранила в 0,005 я, едком натре, 5 мл цитратного буферного раствора с рН 2,0, Образовавшийся молекулярный . Продукт извлекают хлороформом (5Х10мл), переносят в мерную колбу на 25 мл и доводят хлороформом До метки. Оптическую плотность на фЬтоэлектроколбр метре ФЭК в кювете на 20 мм .при Д 540 мм (светофильтр № б). Концентрацию спазмолитина определяют по уравнению калибровочного графика ,3042Х + 0,О384, где X - концентрация спазмЬлити- на/мг/мл; J) - оптическая плотность, построенная ьлетрдом наименьших квадратов. . . Результаты количественного определе- ния спазмолитина и статистической обработки десяти определений представлен. в таблице..

Как видж) из таблицы, от1к сктельнаяемой пробы раствором хлоранила в раоошябка стособа при отделении спазмолит -творвтеле и фотометрированием окрашен в. 0,73%,ного раствора, отличающийся

Чувствительность реакции 75 мкг.тем, ч-го, с целью упрощения способа

Время проведения анйлиаа 15-2О мин. sи сокращения времени определения, в к Предлагаемый способ прост в выш л-честве растворйтвйя используют 0,ОО40нении, не требует соблюдения темпера-О,ОО5 н, едкий натр и о аботку ведут

турного режима, позволяет выделять рН среды 1,5-2,9 с ш)cлeдyioa ©й

ко окрашенный продукт реакции, юбавить-.обработкой полученйого раствора хлорося от избытка реактива и других KOMIKW (|юрмом, отделением и фотометрированнем

нентов реакции, а в случае исследованияхпорсн{9Ормного слоя, биологических объектов от продуктов Йес1

рукции белка. Избирателыгость способа ха-Источники информации,

рактеризуется возможностью определениягфийятые во,внимание при экспертизе

третичных аминов в присутствии 5,

Hbtx и вторичных амсшов, не реагирую- /1- Коретгмав И. М. Фотометричесщих с хлоранштом в указанных услоЁнях..f &ввКУ13, Методы определения орФормула и 3 о б р е те я и ягаанческих соединеянй, М., 1970,

Способ количественного определения 323. спаамолитина путем обработки анолизвр 29 2, Там же, с, ЗО4 (прототип).

- - -V