Способ количественного определения гидразида изоникотиновой кислоты Советский патент 1981 года по МПК G01N21/78 

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам количественного определения тидразид ИЗОНИКОТИНОВОЙ кислоты (ГИНК). Известен способ количественного определения ГИНК, путем обработки анализируемой пробы п-диметиламинобензальдегидом в кислой среде с последующим фотометрированием полученного раствора l . Недостатком способа является низкая избирательность. Определению мешают метазид, фтивазид, ларусан, салюзид и т.д. Наиболее близким к предлагаемому по технической сущности и достигаемому результату является способ количественного определения ГИНК путем обработки анализируемой пробы хлоридом 2., 3,5-трифенилтетразолия при рН среды 2,5-2,75 с посЛедунвдей обработ кой сульфатом железа в присутствии бромной во,цы и добавления этилового спирта и фотометрирования полученно при этом раствора 2. Недостатками способа являются не высокая точность - ошибка определен 0,83%, низкая чувствительность 1,0 м длительность, время определения 4550 мин, сложность проведения анализ (требуется 8 операций) и плохая избирательность (определению мешает присутствие раз личных Сахаров и крахмала) .; Цель изобретения - повышение точности, чувствительности, избирательности и сокращения времени определения и упрощение способа. Поставленная цель достигается тем, что согласно способу количественного определения ГИНК в качестве соли тетразоля используют 0,0990 ,010%-ный водный раствор нитротетразолиевого синего и проводят обработку при рН среды 11,0-12,1 с последующей обработкой полученного раствора хлороформом и фотометрированием хлорофор- менного слоя. Реакция между ГИНК и нитротетразолиевым синим протекает в молярном соотношении 1:1, спектральные характеристики продукта реакции, полученные с помощью спектрофотометра СФ-16, свидетельствуют о том, что максимум светопоглощения окрашенного раствора находится при длине волны Х 530 нм. Количественное определение ГИНК проводят фотометрическим способом по предварительно построенному калибровечному графику. Оптическую плотность раствора измеряют на фотоэлект роколориметре ФЭК 56-М в кювете с толщиной рабочего слоя 20 мм, светофильтр № б ( Д. 540±10 нм) , В качест ве раствора сравнения применяют хлореформ (слепой опыт). Построение калибрбвочного графика для ГИНК. В делительные воронки помещали 0,1 0,2; 0,3; 0,4; 0,5; 0,6; 0,7 МП стандартного раствора (концентрация ГИНК в стандартном растворе 0,5 мг/мл в каждую воронку добавлякгт соответст венно 0,9; 0,8; 0,7; 0,6; 0,5; 0,4; 0,3 мм дистиллированной воды, по 1м 0,1%-ного водного раствора нитротетразолиевого синего, 0,4-0,5 мл 0,1 и раствора едкого натра для создания рН 11,0-12,10. Крашенные продукты извлекают дважды хлороформом по 20 мл. Хлороформенные извлечения пе реносят в мерные колбы емкостью 50 мл и доводят объем экстракта до метки хлороформом. В качестве раствора сравнения используют хлороформ (еле пой опыт). Оптическую плотность окр шенных растворов измеряют с помощью фотоэлектроколориметра ФЭК 56-М в кювете с толщиной рабочего слоя 20 мм светофильтр 1 6 (Х 540±10 нм) . По результат.ам измерения оптической плотности строят кгшибровочный график . Количественное определение ГИНК при рН 11,0. Пример 1. Определение ГИНК в нижней области графика. Содержание ГИНК 0,05 мг в пробе. Точную навеску, около 0,05 г изр ниазида, переносят в мерную колбу .емкостью 100 мл, растворяют в дистиллированной воде и доводят объем раствора водой до метки. 0,1 мл приготовленного раствора (содержани ГИНК в пробе 0,05 мг) переносят в делительную воронку, куда добавляют последовательно: 0,9 мл дистиллированной воды, 1. мл 0,099%-ного водного раствора нитротетразолиевого синего, 0,4 мл 0,1 н.раствора едкого натра, в результате мгновенно образуется фиолетовое окрашивание. Окрашенный продукт извлекают дважды хлороформом по 20 мл. Хлороформенные извлечения переносят в мерную колбу емкостью 50 мл и доводят объе экст 1акта до метки хлороформом, В качестве раствора для сравнения используют хлороформ (слепой опыт). Оптическую плотность окрашенного раствора измеряют с помощью фотоэле троколориметра ФЭК 56-м, кювета 20 м при Х 540±10 нм. Результаты количественного определения и статической обработки 10 определений ГИНК в нижней области графика представлены в табл.1, Пример 2. Определение ГИНК в оптимальной области графика. Со- , держание ГИНК 0,20 мг в пробе. Точную навеску, около 0,05 г изониазида, переносят в мерную колбу емкостью 100 мл, растворяют в дистиллированной воде и доводят объем раствора водой до метки, 0,4 мл приготовленного раствора (содержание ГИНК в пробе 0,20 мг) переносят в делительную воронку, куда добавляют последовательно: 0,6 мл дистиллированной воды, 1 мл 0,1%-ного водного раствора нитротетразолиевого синего, 0,4 МП 0,1 и.раствора едкого натра. В результате образуется мгновенно фиолетовое окрашивание. Окрашенный продукт извлекают дважды хлороформом по 20 МП. ХлороформеннЕле извлечения переносят в мерную колбу емкостью 50 мл и доводят объем экстракта до метки хлороформом. В качестве раствора сравнения используют хлороформ Слепой опыт). Оптическую плотность окрашенного раствора измеряют с помощью фотоэлектроколориметра ФЭК 56-М кювета 20 мм при Л 540+10 нм. Результаты количественного определения и статической обработки 10 определений ГИНК в оптимальной области графика представлены в табл. 2. Примерз. Определение ГИНК в верхней области графика. Содержание ГИНК 0,35 мг в пробе. Точную навеску,около 0,05 г изониазида, переносят в мерную KOJT6y емкостью 100 мл, растворяют в дистиллированной воде и доводят объем раствора водой до метки. 0,7 мл приготовленного раствора (содержание ГИНК в пробе 0,35 мг) переносят в делительную воронку, куда добавляют последовательно: 0,3 Мл воды дистиллированной, 1 мл 0,1%-ного водного раствора нитротетразолиевого синего, 0,4 мл 0,1 н.раствора едкого натра. В результате мгновенно образуется фиолетовое окрашивание. Окрашенный продукт извлекают дважды хлороформом по 20 мл. Хлороформенные извлечения переносят в мерную колбу емкостью 50 мл и доводят Объем экстракта до метки хлороформом (слепой опыт). Оптическую плотность окрашенного раствора измеряют с помощью фотоэлектроколориметра ФЭК 56-м, кювета 20 мм при X 540+10 нм. Результаты количественного определения и статической обработки 10 определений ГИНК в верхней области графика представлены в табл. 3. Количественное определение -ГИНК при рН 12,1. Пример 4. Определение ГИНК в нижней области графика. Содержание ГИНК 0,05 мг в пробе. Точную навеску,около 0,05 г изониазида, переносят в мерную колбу емкостью 100 мл, растворяют в дистиллированной воде и доводят объем раст вора водой до метки. 0,1 мл приготов ленного раствора (содержание ГИНК в пробе 0,05 мг) переносят в делител ную BOpoHicy, куда добавляют последов .тельно: 0,9 мл дистиллированной воды 1 мл 0,1%-ного водного раствора нитротетразолиевого синего, 0,5 мл ОД н.раствора едкого натра. В реэул тате мгновенно образуется фиолетовое окрашивание. Окрашенный продукт извлекают два.жды хлороформом по 20 мл. Хлороформенные 1звлечения переносят в мерную колбу емкостью 50 мл и доводят объем экстракта до метки хлороформом. В качестве раствора сравнения используют хлороформ (слепой опыт). Оптичаскую плотность окрашенного раствора измеряют с помощью фотоэлектроколориметра ФЭК 56-М, кювета 20 мм при X 540±10 им. Результаты количественного определения и статической обработки 10 определений ГИНК в-нижней области графика представлены в табл. 4. Пример 5. Определение ГИНК в оптимальной области графика,-Содер жание ГИНК 0,20 мг в пробе. Точную навеску, около 0,05 г изониазида, переносят в мерную колбу ем костью 100 мл, растворяют в дистилли рованной воде и доводят объем раство ра водой до метки .0,4 мл приготовленного раствора (содержание ГИНК в пробе 0,20 мг) переносят в делительную воронку, куда добавляют последовательно: 0,6 мл дистиллированной воды, 1 мл 0,1%-ного водного раствора нитротетразолиевого синего, 0,5 мл 0,1н раствора едкого натра. В результате образуется мгновенно фиолетовое окра шивание. Окрашенный продукт извлека- ют дважды хлороформом по 20 мл. Хлор форменные извлечения переносят в мерную колбу емкостью 50 мл и доводя объем экстракта до метки хлороформом. В качестве раствора сравнения используют хлороформ 1 слепой опыт). Оптическую плотность окрашенного раствора измеряют с помощью фотоэлектроколориметра ФЭК 56-м, кювета 20 мм при Х 540tlO нм. Результаты количественного определения и статической обработки 10 определений гинк в оптимальной области графика представлены в табл.5. Примере. Определение ГИНК в верхней области графика. Содержание ГИНК 0,35 мг в пробе. Точную навеску, около 0,05 г изониазида, переносят в мерную колбу емкостью 100 мл, растворяют в дистил лированной воде и доводят объем раст вора водой до метки, 0,7 ил приготов ленного раствора (содержание ГИНК в пробе 0,35 мг) переносят в делител ную воронку, куда добавляют последовательно: 0,3 мл дистиллированной воды, 1 мл 0,099%-ного водного раствора нитротетразолиевого синего, 0,5 МП 0,1 н.раствора едкого натра. В результате мгновенно образуется фиолетовое окраишвание. Окрашенный продукт извлекают двгикды хло1 офС1рмом по 20 мл. 5Слороформенные извлечения переносят в мерную колбу емкостью 50 мл и доводят объем экстракта до метки хлороформом (слепой опыт).Оптическую плотность окрашенного раствора измеряют с помощью фотоэлектроколориметра ФЭК 56-М, кювета 20 мм при Д. 540±10 нм. Результаты количественного определения и статической обработки 10 определений ГИНК в верхней области графика представлены в табл. 6. П р и м е р 7. Количественное определение ГИНК в таблетках с содержанием действующего вещества 0,3 г. Точную навеску, около 0,05 г порошка растертых таблеток, взбалтывают с 30 мл дистиллированной воды, раствор фильтруют в мерную колбу емкостью) 100 мл, промывая осадок на фильтре 20-30 мл воды. Полученный объем раствора доводят водой до метки, 0,4 мл приготовленного раствора переносят в делительную воронку, добавляют 0,6 мл дистиллированной воды,1 мл 0,1%-ного водного раствора нитротетразолиевого синего и 0,4-0,5 мл 0,1 н. раствора едкого натра для создания рН среды 11,0-12,1. Образовавшийся окрашенный в фиолетовый цвет раствор извлекают дважды хлороформом по 20 мл, собирая экстракт в мерную колбу емкостью 50 мл. Объем экстракта доводят до метки хлороформом. Оптическую плотность окрашенного раствора измеряют с помощью фотоэлектроколЬрииетра ФЭК 56-м в кювете с толщиной рабочего слоя 20 мм, при Д. 540± ±10 нм. В качестве раствора сравнения используют хлороформ (слепой опыт). Результаты количественного определения и статической обработки 10 определений ГИНК в таблетках представч лены в табл. 7. Как видно из данных, приведенных в таблицах 1-6, относительная ошибка метода количественного определения ГИНК в оптимальной области не превышает ±0,67%, а в случае таблеток (табл. 7) +; 1,69, что полностью удовлетворяет требованиям фармацевтического анализа. Сравнительная характеристика методов количественного определения гидразида изоникотиновой кислоты по следующим парс1метрам1 точность, чувствительность, время выполнения внутригрупповая специфичность представлена в табл. 8. Предлагаемый способ точен, прост в выполнении, высокочувствителен

(чувствительность рсзакции составляет ) и специфичен. Подобную реакцию не дает ни один из препаратов, производных изоникотиновой кислоты (метазид, фтивазид, ларусан,салюзид, салюзид растворимый и др.), а также исходные продукты синтеза ГИНК.

В связи с этим метод экстракционной фотометрии может использоваться

и для определения примеси ГИНК в противотуберкулезных препаратах производных изоникотиновой кислоты при контроле качества препарата в заводских условиях и контрольно-аналитических лабораториях. Количество аналитических операций сокращают с 8 до 5, что упрощает анализ и сокращает время его проведения на 20-25 мин, полностью исключает расходы этилового спирта.

Т а б л и

Ц а

Таблица

Таблица, 3

Продолжение табл. 5

Таблица 8