Способ определения спазмолитина Советский патент 1987 года по МПК G01N21/78 

Изобретение относится к аналитической химии, а. именно к способам экстракционно-фотометрического определения производных дифенилуксусной кислоты, в частности спазмолитина- i- диэтиламиноэтилового эфира .1,1-ди- фенилуксусной кислоты гидрохлорида, и может.быть использовано ОТК и центральными заводскими лабораториями химико-фармацевтических заводов, лабораториями клиник, контрольно-аналитическими лабораториями областных аптечных управлений, судебно-химичес кими лабораториями.

Целью изобретения является повышение чувствительности и точности определения,

Способ осуществляют следующим образом.

Для количественного определения анализируемую пробу спазмолитина растворяют в дистиллированной воде, В делительную воронку вносят фталат- ный буфер с рН 4,4, часть приготовленного раствора спазмолитина и водный раствор бромфенолового синего. Содержимое воронки перемешивают и повторно извлекают двумя порциями хлороформа. Окрашенные в желтый цвет хлороформные извлечения отделяют, переносят в мерную колбу и после этого прибавляют туда диметилформа- мид в количестве, равном половине объема мерной колбы. При этом желтая окраска раствора переходит в синюю. Затем доводят объем раствора до метки хлороформом и перемешивают Оптическую плотность окрашенного в синий цвет раствора измеряют на фо- тоэлектроколориметре КФК-2 при оран- жеЗэом светофильтре 590 нм в кювете с толщиной рабочего слоя 10 мм, В качестве раствора сравнения используют хлороформный экстракт, содержащий все реактивы в тех же количествах.

Содержание спазмолитина рассчитывают по калибровочному графику или его уравнению.

Приготовление раствора бромфеноло вого синего,

0,1 г брамфёнолового синего растворяют в горячей воде и после охлаждения доводят до метки водой в колбе объемом 250 мл о

Построение калибровочного графика.

В 6 делительных воронок вносят по 10 МП фталатного буфера с рН 4,4, 0,25, 0,50, 0,75, 1,00 и 1,25 мп стандартного раствора спазмолитина (стандартный раствор содержит 0,2 мг спазмолитина основания), добавляя дистиллированную воду до общего объема раствора 11,5 мп, В каждую ворон0 ку прибавляют по 3 мл раствора бром- фенолового синего, по 12 мл хлороформа и содержимое перемешивают. Хлороформный слой отделяют и помещают в мерные колбы объемом 50 мл. Содержи-

5 мое воронок повторно извлекают 12 мл хлороформа и хлороформные извлечения переносят в соответствующие мерные колбы, В каждую колбу добавляют 25мл диметилформамида, после чего содер0 жимое доводят до метки хлороформом И перемешивают. Оптическую плотность oKpaojeHHbix в синий цвет растворов измеряют на фотоэлектроколори- метре КФК-2 при светофильтре 590 нм

5 в кювете с толщиной рабочего слоя 10 мл на фоне экстракта в контрольном опыте. По результатам измерений строили график зависимости оптической плотности от концентрации раст0 воров.

Подчинение закону Ламбёрта-Бугера- Бера наблюдается в интервале концентраций от 0,63 до 5,00 мкг/мло Методом наименьших квадратов

g рассчитывают уравнение калибровочного графика, которое имеет вид

О 0,828 С + 0,002,

где D - оптическая плотность; „ С - концентрация окрашенного

раствора, мкг/мл. Пример, Около 0,03 г спазмолитина гидрохлорида (точная навеска) растворяют в дистиллированной воде, дойодят до метки тем же растворителем в мерной колбе объемом 50 мл и . перемешивают (раствор А) , 20 мл раствора А переносят в другую мерную колбу объе мом 50 мл и доводят водой до метки (раствор Б) В делительную воронку помещают 10 мл фталатного буфера с рН 4,4, 0,7 мп раствора В, 0,8 мл дистиллированной воды, 3 мп водного раствора бромфенолового синего и 12 мл хлороформа. Далее поступают точно так же, как при построении калибровочного Графика

Расчет количественного содержания спазмолитина основания проводят по

5

0

5

уравнению калибровочного графика. Для пересчета на спазмолитин гидрохлорид найденную величину умножают на коэффициент 1,116„

В табл,1 представлена зависимость интенсивности окраски определяемого и контрольного растворов от значения рН среды.

В табл.2 представлена зависимость оптической плотности определяемого раствора от длины волны светофильтра,

В табл.3 приведены результаты количественного определения спазмолити- на предлагаемым способом и метрологические характеристики способа.

В табЛоА приведена сравнительная характеристика предлагаемого и известного способов.

Таким образом, чувствительность предлагаемого способа выше извест2,0 2,0 2,0 2,0

й

кого более чем в 4 раза, точность более чем в 2 раза.

Формула изобретения

Способ определения спазмолитика путем растворения анализируемой пробы, обработки полученного раствора бромфеноловым синим, экстракции окрашенного соединения хлороформом с последующим фотометрированием экстракта, отличающийся, тем, что, с цепью повьшения чувствитепьности, и точности определения, растворение проводят в воде, бромфеноло- вый синий используют в виде водного раствора и обработку им проводят в среде фталатного буфера с рН 4,4,

к экстракту перед фотометрированием добавляют диметилформамид и фотомет- рирование осуществляют при длине волны 590 нм.

Таблица 1

Таблица 2

0,000 0,000 0,002 0,005

0,235 0,225 0,225 0,210 0,228 0,233

0,225 0,228 0,230 0,232

0,02852 0,02732 0,02732 0,02551 0,02768 0,02828

0,02732 0,02768 0,02792 0,02816

Критерии оценки

Предлагаемый способ

Определяемый минимум мкг/мл

Относительная ошибка определения, %

Доверительный интервал, %

Таблица 3

X 99,89 G 0,94 СГ 0,30

,,. 0.67

А 0,67

X 99,,67

Таблица 4

Известный способ

2,58

1,43

101,33 1,43

Светофильтр, нм Селективность

Редактор А.Долннич

Составитель Л.Русанова Техред М.Моргентал

Заказ 5558/41Тираж 776Подписное

ВНИИПИ Государ9твенного комитета СССР

по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д,4/5

Производственно-полиграфическое лредариятие, г.Ужгород, ул.Проектная,4

1352330

8 Продолжение табл.

590

413

В контрольном опыте В контрольном опыте индикатор практичес- индикатор частично ки не извлекается из извлекается из раст- растворавора

Корректор С.Шекмар

Изобретение относится к аналитической химии, в частности к определению спазмолитина (СЛ). Цель - по- вьшение чувствительности и точности определения. Определение СЛ ведут растворением анализируемой пробы в Ч воде, обработкой полученного раствора бромфениловым синим. Последний используют в виде водного раствора и обработку им проводят в среде фталат- ного буфера с рН 4,4, Окрашенное соединение экстрагируют хлороформом, добавляют диметилформамид с последующим фотометрированием экстракта при длине волны 590 нм. Чувствительность способа более чем в 4 раза, точность более чем в 2 раза вьше известного способа, 4 табл. i (Л