Штамм бим83 продуцент полиметилгалактуроназ Советский патент 1980 года по МПК C12K1/00 

Изобретение относится к микробиологи ческой промышленности и касается штамма гриба АзрегдЛСив аРвюсеиз БИМ83 - продуцента полиметилгалактуронаэ., Пектолитические ферменты находят широкое применение в пящевой и легкой промышленности, эффективность действия пектиназ обусловлена ферм 1тамн, входящими в г остав их комплекса. Необходимость целенаправленного применения &рментов ставит задачу получения препаратов с различным сочетанием пектииаз.что достигается подбором соответствующих продуцентов и условий их культивщювания Известны продуценты пектолитичесхих ферментов из рода Азрегц-Ш дз jjQ. Однако эти прюдуцеяты обладают нодостаточно высокой полигалактуроназной активностью, а синтез пектолитических ферментов при выращивании грибов на средах с субстратом сопровождается синтезом целлюлаз, гемицеллюлаз и других ферментов. Наиболее близким по своей технической сущности решениетл поставленной задачи 5шляется штамм ЛзрегдгЛЛив awarnori 44-2Б 2. пектопитическая активвюсть ero 0,961 ед/мп, прич эндо-ПГ 3,3 ед/мл, экзо-ПГ 13,68 ед/мл, ПЭ О,62 ед/мл. Цель изобретения - получение более активного продуцента полиметипгалактуроназ, лишешюго пеппюлаз юй и гемнцеялюлазной активности. Исходная культура Aeperg-ieCue «ft ioceus .выделенная из семян свеклы, получена из музея УкрНИИПП., Предлагаемый штамм Asperg-teCue айв Qceus - исходной культуры, полученной в Институте микробиологии АН Белорусской ССР путем отбора активных моноспоровых вариантов и длительного пассивирования гриба на специфических средах. Штамм хранится в музее чистых культур. ИНМИ АН Белорусской ССР под № Г-83. Морфологические признаки На среде Чапека мяцеяий белый, септя ровав, не дифференцирован, продуцирует склероции, сначала , затем т&лнеюшие. Конидиеяосцы, отход5пцие от опорной клетка прямые, не ветв5пциеся, не септированные бесцветные. Споровые головки желтые, станов$пдиеся от цвета охры до коричневого .с возрастом, ЗО 4О мк в диаметре. Стеригмы циливдричес кие, расположены в 2 слоя. П вячные стеригмы 10-14x3-4 мк, вторичные 8X2-3 пс, бесцветные. Конидии желтые, гладкие, округлые, 2-3 мк в диаметре. Культуральные признаки Сусло-агар. Четырехсуточная колония диаметром 5 см. Колония пушистая, воэ душный мицелий по краям колония белый. Кошщиеносная зона в центре колонии желтовато-«ремовой окраски. Форма колонии круглая. Профиль колонии слегка конуххюбразный. С офатной стороны слабая желтая пигментация. Среда Чапека. Четьфехсуточная колокия диаметром 3 см. Колония округлой формы, морщинистая. Мицелий белый, конидиеносиря зона колонии имеет желтовато-кремовую окраску. Край колонии бахромчатый. На обратной стороне колонии слабо желтой окраски. Картофеле-декстрозный агар. Четьфех суточная ко1}оккя диаметром 3,5-4 мк. Колония, пушистая, желтовато-кремовой окраски, по краям колонии воздушный б лый мицелий; Форма колонии округлая, профиль конусообразный, край колонии ровный. Биохимические признаки Asper 2Cu oftexaceoe БИМг83 гидролизует крахмал, разжижает желатину, свертывает молоко на 5-« сутки. Испоиьзует аммонийную, нитратную и белковую форм азота. Ассимилирует глюкозу, мальтозу, сахарозу, ксилозу, галактозу, арабинозу, 464 амноэу, лактозу, сорбит, маннит, глицеин, этиловый спирт. Вьфащквание предлагаемого штамма ASergieCius a t-iaceus БИМ-83 производят следующим образом Пример 1. Готовят питательную среду, содержащую, %: свекловинный жом 4, солодовые ростки О.б., (ЙНд) SO -0,7. 5О мл питательной среды в колбах Эрленмейера на 250 мл стерилизуют при 0,75 атм в течение ЗО мин. После ст илизашга питательную среду охлаждают до и засевают 3-4 мл водной споровой суспензии гриба. Гриб ЛвpergiKftue aWlaceus БИМ-83 культивируют на качалке при 18О об/мин в течение 96 ч гфи 30°С. ) Пектолитическая активность культу-i ральной жидкости, определенная интерферомет)рическим методом, 4,О ед/мл, активность эндополиметилгалактуроназы, определенная вискозиметрическим. методом, 9О ед/мл, активность экзополиметилгалактуроназы, определенная йодометрическим методом; 35 ед/мл. Пример 2. Гриб Лйрегд С.иа o(tiaceus БИМ-83 культивируют поверхностным способом в течение 10 сут при в матрицах с ЗОО мл среды аналогичного состава. Пектолитическая активность культураль ной жвдкости 9ед/мл; эндо-ПМГ 15О ед/мл; экзо-ПМГ 8О ед/мл. не синтезирует пектинтрансэлими(„ТЭ). пектинэстеразу (ПЭ) и ферменты целлюлолиткческо1х комплекса. Синтезируемый ферментный комплекс, состоящий из полигалаж-уроназ, может найти примеавнке в пищевой промышленности, а также дает возможность применения его при мацерации растительных тканей. Сравнительная характеристика пектолитических фермвпюв различных продуцентов,полученных при глубинном культивировании, дана в таблице.

tep. Qwamortie О,5228,112,80,769

ASD owarnor

44-26 (известный) 0,9613,313,68 0,62О

Asp. o t iaceu&

3,5-4,О 6О-9О 20-35 следы БИМ-83

О

О Формула изобретения Штамм KapergieO-us aWaceusEHM-SS продуцент полиметилгалактуроназ, хранится в музее чистых культур культур ИНМИ АН Белорусской ССР под № Г-83. Морфологические признаки На среде Чапека мицелий белый, сетггирован, не Д1ф{)ереншфован, продуцирует склерощш, сначала белые, затем темнеющие. Кбшщиеносцы, .отходящие от опорной клетки, прямые, не ветвящиеся, не септированные, бесцветные. Споровые головки желтые, становящиеся от цвета охры до коричневого с возрастом, ЗО-40 мк в диаметре. Стеригмы цилиндрические, располож«аЕШые в 2 слоя. Пфвичные стеригмы 1 0-14X3-4 мк, вторичные 8Х2-Змк бесцветные. Конидии желтые, гладкие, округлые, 2-3 мк в диаметре. Культуральные признаки Сус1Ю.-агар. Четырехсуточная колония диаметром 5 см. Колония пушистая, воздушный мицелий по краям колонии белый. Конидненосная зона в центре колонии желтовато-кретловой окраски. Форма кодании круглая. Профиль колонии слеттса конусообразный. С обратной стороны слабая желтая пигментация. Среда Чапека. Четырехсуточная мода- ния диаметром 3 см. Колония округлой формы, морщинистая. Мицелий белый 72 46С конвдиеноская зона колонии имеет жолтовато-кремовую окраску. Край колонии бахромчатый. На обратной стороне колония слабо желтой окраски. Картофепе-тдекстрозный агар. Четырехсуточная колония диаметром 3,5-4 см. Колония пушистая, желтовато-кремовой окраски, по краям колонии воздушный мицелий. Форма колонии округлая. профиль конусообразный, край колояви ровный, Биохимические признаки: Гидролизуэт крахмал, разжижает жела-гтину, свертывает молоко на 5-е сутки. . Использует аммонийную, нитратную и беЛ1ювую формы азота. Ассимишфует глкжозу, мальтозу, .сахарозу, ксипозу, галактозу, арабшюзу, рамнозу, лактозу, сорбит, глицерин, этиловый спирт. Обладает высокой активЕЁостью полиметилгалактуроназ, не синтезирует пектинэстеразу пектинтраисэлиминазу и ферменьт целлюяолитнческого комплекса, Источники информации, принятые во внимание при экспертнае j Авторское свидетельство СССР jb 293846, кл. С 12 D 13/10, 1969 (аналог). 2. АвторсЮе свидетельство СССР № 396362, кя. С 12 К З/ОО, 1971 (прототип).