3-(4-КАРБЭТОКСИ)-ФЕНИЛИМИНО-2-ОКСОИНДОЛИН, ПОВЫШАЮЩИЙ УСТОЙЧИВОСТЬ ОРГАНИЗМА К ПОВТОРНОЙ ЧЕРЕПНО-МОЗГОВОЙ ТРАВМЕ Советский патент 1996 года по МПК C07D209/12 C07D209/14 

Изобретение относится к новому химическому соединению, а именно 3-(4-карбэтокси)-фенилимино-2-оксоиндолину общей формулы:

которое может найти применение в медицинской промышленности. Известно использование для лечения последствий черепно-мозговой травмы γ-аминомасляной кислоты. Однако, эффект препарата весьма умеренный и положительный результат обеспечивается лишь при длительном назначении [1]
Целью изобретения является расширение имеющегося арсенала средств воздействия на живой организм.

Поставленная цель достигается описываемым соединением 3-(4карэтокси)-фенилимино-2-оксоиндолина, повышающего устойчивость организма к повторной черепно-мозговой травме.

3-(4-карбэтокси)фенилимино-2-оксоиндолин получают путем конденсации изатина этиловым эфиром п-аминобензойной кислоты.

Реакцию проводят путем нагревания эквимолекулярных количеств реагентов в уксусной кислоты, выход продукта реакции 78-79%
Найдено, С 69,67; Н 5,07; 4,85; N 9,38; 9,28;
С₁₇H₁₄N₂O₃.

Вычислено, C 69,39; H 4,80; N 9,52;
Пример. Смешивают при кипении предварительно отфильтрованные в горячем состоянии растворы 18,5 г (0.112 ммоль) этилового эфира n-аминобензойной кислоты в 50 мл уксусной кислоты и 16,5 г (0,112 моль) изатин в 115 мл ледяной уксусной кислоты и продолжают нагревание 2 часа. Полученный темно-красный раствор фильтруют в горячем состоянии. После остывания из фильтра выпадают блестящие оранжевые кристаллы продукта реакции. Осадок фильтруют, промывают 2 раза уксусной кислотой, 1 раз эфиром и сушат при 105^o. Выход продукта реакции 9,4 г (28,5% от теор.), т. пл. 229^o. При упаривании фильтрата выделяют еще 50% продукта реакции с т. пл. 226^o, т.к. общий выход составляет 78,5%После 2-кратной перекристаллизации из пропилового спирта (22 мл на 1 г) получают крупные блестящие ярко-оранжевые кристаллы т. пл. 236^o. Выход при перекристаллизации 73% При дальнейшей кристаллизации т. пл. и УФ спектр не изменяются, что подтверждает однородность вещества. Вещество представляет собой блестящие оранжевые кристаллы, имеет т. пл. 229^o, после многократной перекристаллизации из пропилового спирта 235^o, при комнатной температуре легко растворяется в диметилсульфоксиде, трудно в этиловом, пропиловом и бутиловом спиртах, при нагревании легко растворяется в спиртах, трудно в воде.

Вещество однородно по данным тонкослойной хроматографии. Для его очистки достаточна 2-кратная перекристаллизация.

Условия тонкослойной хроматографии. Адсорбент силуфол UV-254, растворитель для нанесения метиловый спирт, подвижный растворитель - этилацетат-гептан, 3:2, Rf 0,55. Вещество как в видимом, так и в УФ-свете, а также при обработке хроматограммы парами йода не содержит примесей, в том числе исходного изатина.

Строение вещества подтверждается данными элементного анализа, ИК и УФ спектрами, а также качественными реакциями.

ИК-спектр в КВг снят на приборе UR-20. В спектре содержится 2 полосы С=0 при 1720 и 1755 см^-1 (карбонилы индольного ядра и сложноэфирной группы), полосы связей С=N (1660 см^-1 и NH 3198 см^-1
УФ-спектр, l_макс, нм (lg E): 244 (4,451), 298 (3,925); 410 (3,500); λ_мин, нм (lgE): 281,5(3,852), 350(3,271). УФ- спектр измерен для 2.72 10^-5 М раствора в спирте, содержащем 9,16% диметилсульфоксида по объему, на приборе СФ-8.

Качественные реакции.

Пробу вещества кипятят 0,5 ч с 8-%ным раствором серной кислоты (при этом оно подвергается гидролизу по связи С=N). После охлаждения раствор фильтруют, осадок сушат и несколько крупинок твердого вещества вносят в концентрированную серную кислоту и добавляют 1 каплю 0,05%-ного раствора тиофена в бензоле. Образуется ярко-синее окрашивание свидетельствующее о присутствии изатина. К фильтрату, полученному после гидролиза, добавляют несколько крупинок нитрида натрия и полученный раствор по каплям добавляют к содово-щелочным растворам. β-нафтола и Н-кислоты. В первом случае образуется ярко-красное, а во-втором фиолетовое окрашивание, что свидетельствует об образовании при гидролизе эфира п-аминобензойной кислоты. Приведенные реакции подтверждают строение синтезированного нового химического соединения.

Оценка биологической активности 3-(4-карбэтокси)-фенилимино-2оксоиндолина(препарат-329).

Дозированная черепно-мозговая травма моделировалась с помощью свободно падающего тела (цилиндрические свинцовые грузики весом до 25 г для мышей и 0,5 кг для кролика), перемещающиеся внутри трубы.

Травмы наносились под легким эфирным наркозом в два этапа. В первый день дозированная травма наносилась один раз, а через 2 суток дважды с интервалом в 30 минут. Энергия свободно падающего тела, равной 0,18 дж, было достаточно для того, чтобы вызвать у мышей черепно-мозговую травму тяжелой степени (в контрольных группах после повторной травмы гибель животных составляла 80-85% ).

При изучении физической выносливости животных наносилась однократная черепно-мозговая травма легкой степени.

Изучение специфической активности препарата N 329 велось в сравнении с g-аминомасляной кислоты (ГАМК), которая по литературным данным оказывает положительное действие при лечении больных с черепно-мозговой травмой (см. табл. 1 и 2).

Опыты выполненные на 20 кроликах показали, что после двухкратной внутривенной инъекции препарата N 329 и дозе 25 мг/кг выживаемость животных на фоне травмы составила 70% против 30% в контроле.

Определение спектра фармакологического действия.

При выполнении этой серии экспериментов преследовалась цель выявить влияние препарата N 329 на различные стороны организма. Установлено, что при подкожном и внутримышечном введении препарата наркотизированным кошкам не наблюдалось изменения дыхания и артериального давления.

Препарат не изменял быстроты наступления и длительности барбамилового и гексеналового сна у мышей.

Под влиянием препарата N 329 (по кожу 50 мг/кг) наблюдалось увеличение жизни мышей на высоте 11 км, а также в герметически замкнутом пространстве.

Препарат повышал переносимость мышами перегревания при температуре 70 и 45^oС.

Определение токсичности.

Токсичность вещества определялась при подкожном и энтеральном введении. ЛД₅₀ вещества для мышей при подкожном введении составила 1150,0± 0,17 мг/кг; При энтеральном введении ЛД₅₀ определить не удалось ввиду низкой токсичности препарата N 329. Мыши без летального исхода переносили 2000 и более мг/кг вещества; кролики 500 мг/кг.

При подкожном введении вещества в дозе 25 мг/кг в течение 15 дней изменений со стороны мочи, крови, а также при морфологическом исследовании внутренних органов не обнаружено.

Следовательно, заявляемый в качестве изобретения 3(4-карбэтокси)фенилимино-2-оксоиндолин (препарат N 329) проявляет высокую эффективность при черепно-мозговой травме, низкую токсичность, хорошую переносимость при длительном введении и большую терапевтическую широту.

3-(4-Карбэтокси)фениламино-2-окссиндолин общей формулы

повышающий устойчивость организма к повторной черепно-мозговой травме.

3-(4-Карбэтокси)фенилимино-2-оксоиндолин общей формулы

повышающий устойчивость организма к повторной черепно-мозговой травме.