Способ количественного определения трихомонацида Советский патент 1992 года по МПК G01N21/64 A61B10/00 

Изобретение относится к области аналитической химии и может найти применение в технике определения трихомонацида.

Известен способ количественного определения трихомонацида, заключающийся в измерении собственного поглощения в ультрафиолетовой области спектра при 357 нм.

Этот способ малоэффективен, так как многие органические соединения поглощают в ультрафиолетовой области, при этом известный способ обладает малой чувствительностью, которая составляет всего 2 мкг/мл.

Наиболее близким к данному изобретению по технической сущности и достигаемому результату является способ качественного определения трихомонацида, осуществляемый путем воздействия на пробу неорганическим реагентом. Данный способ малочувствительный - чувствительность составляет всего 50 мкг/мл.

Целью изобретения является повышение чувствительности.

Поставленная цель достигается тем, что при способе количественного определения трихомонацида путем обра-о ботки пробы неорганическим реагентом с последующим измерением интенсивCD ON О СЛ 00 О ности флуоресценции раствора, пробу обрабатывают хлоридом цинка в .диоксане.

Спектр возбуждения полученного при этом раствора лежит в области от 300 до 440 нм с максимумом 376 нм, а спектр излучения флуоресценции - от

420 до 580 нм с максимумом 502 нм.

Прямолинейная зависимость между концентрацией трихомонацида и интенсивностью флуоресценции раствора лежит от 0,04 до 1,5 мкг/мл. Опытные данные изложены в таблицах 1,2,3,4.

В лекарственной форме сопутствующие ингредиенты (наполнители) не влияют на интенсивность флуоресценции.

При содержании 1 мкг/мл кро1ви или мочи трихомонацид открывается полностью (100%), то есть компоненты крови и мочи не влияют на интенсивность флуоресценции. Чувствительность спо соба - 0,04 мкг/мл.

Способ осуществляется следующим образом.

Пример. Определение трихомонацида в таблетках по 0,05 г 0,030,04 г (точная навеска) мелкоизмельчен гых таблеток переносят в мерную колбу на 100 мл, прибавляют 70-80 мл диоксана и энергично.встряхивают 33 мин. Затем доливают диоксаном до метки (раствор А). 10 мл раствора А переносят в мерную колбу на 100 мл и добавляют диоксаном до метки (раЗависимость интенсивности флуоресценции трихомонацида от концентрации хлорида цинка (с 0,5 мкг/мл)

створ R).i К 1 мл раствора Б прибавляют диоксаном до метки (раствор Б). К 1 мл раствора Б прибавляют 1 мл

1%-ного раствора хлорида цинка в диоксане, 8 мл диоксана и флуориметрируют относительно стандартного раствора трихомонацида в дибксане с содержанием 10 мкг/мл, для чего к

1 мл стандартного раствора прибавляют 1 мл 1%-ного раствора хлорида цинка в диоксане, 8 мл диоксана и флуориметрируют по отношению к исследуемым растворам (табл. 4). Использование способа определения трихомонацида позволило повысить чувствительность, доведя ее до величины порядка 0,04 мкг/мл.

Таблица 1

Влияние времени на устойчивость флуоресценции трихомонацида с хлори дом цинка в диоксане

1 5 10 15. 20 25

Т а б Л1И ц а 2

72 72 72 72 72 72

30 40 50 60

Зависимость интенсивности флуоресценции комплекса от концентрации трихомонацида при взаимодействии с 1%ным раствором хлорида цинка в диоксане

Флуориметрическое определение трихомонацида в таблетках по 0,05 г

860580

Продолжение табл,2

70 69 65 60

Таблица 3

Таблица4

0,91 .0,91 0,92 .

860580

Продолжение табл.Д

,0503 -10

0,0502 0,0493 0,0482