парэнтеральмого введения антибиотика, как и в случае большинства р-лактамовых антибиотиков, таких как пенициллины и цефалоспорины ,
Хотя фармацевтически приемлемые соли окса-р -лактамовой кислоты известны, они не были получены в виде кристаллов с достаточной стабильностью. Например, динатриевую соль Qкca-f -лaктaмoвoй кислоты получают в аморфном виле.
Цель изобретения - повышение стабильности солей окса-р-лактамовых кислот.
Эта цель достигается способом получения новой кристаллической формы D-конфигурации диаммониевой соли .-карбокси-о6- (п-оксифенил ацетамидо/ -7о метокси-3- (1--метилтетразол-5-ил)тиометил-1 оксадетиа-З.-цефем-4-карбоновой кислоты 0 Диаммониевой соли окса-|)-лактамовой кислоты формулы , который заключается в гом, что к водному раствору окса-р-лактамовой дикислоты- формулы If добавляют ацетон, к водноацетоновому раствору указанной кис- лоты при температуре от 15 до 30 С добавляют гидроокись аммония до тех пор, пока рН раствора не устанавливается между 6,0 и 7,5, затем указанный раствор разбавляют ацетоном до точки помутнения, при этом указанная окса-й Лактамовая дикислота находится в D- или L-эпимерной форме, или в смеси этих форм, и из, раствора кристаллизуют 0-эпимер указанной диаммониевой соли, практически свободный от L-эпимера, и, в случае необходимости Быделенную 0-диаммониевую соль обогащают с помощью жидкостной хроматографии при высоко давлении и, в случае необходимости получают водный раствор диаммониево соли, обогащенной 0-эпимером, или водный раствор ОЛ-эпимерной смеск дигилмониевой соли и его разбавляют при температуре от 20 до З0с смешиванием с водой органическим раствортелем, предпочтительно изопропиловым спиртом, до точки помутнения и получают кристаллизованный 0-эпимер практически свободный от 1 эпимера.
При кристаллизации из водных органических растворителей по способу предлагаемого изобретения кристалическая D-диаммониевая соль может быть получена в виде тетрагидрата. Кристаллический тетрагидрат имеет следующую рентгенограмму порошка, полученную при медно-никелевом излучении 1,54 А, где d представляет собой межплоскостные расстояния„ а 3/JJ - относительную интенсивност
UJ 10
d I/I.100 d
15 10
1
3,36
9,60 3,21
50 50 8,79
5 3,10 8,11
7,25102,9710
6,6262,8210
5,92352,71 .5
5,10102,625
4,58402,41
4,351002,35b
3,40152,301
3,67102,191
3,5412,051
По те идиоме Tpt-гчес кое титрование диаммониевой соли в 66% диметилформамиде дает исходные значения рН 7,38 и рКа 5,0(), 6,2(), 9,5 (2МН) и 12,9 (п-окси-группа)i
Кристаллическая D-диаммониевая соль представляет собой фармацевти ческк приемлемую форму, устойчивую при обычных значениях температуры и влажности о Соль можно хранить в боль ших количествах до дальнейшего использования, например, при приготов лении дозированных форм в ампулах. Диаммониевая соль кристаллизуется в 0-эпимерной форме, практически свободной от 1 эпимерной формы. 0-эпииер проявляет более высокое антибаксериальное действие по отношению к некоторым грамм-отрицательным бактериям , например в отношении Е s с he г i с h; со i , чем D,L-формы соли.
В соответствии со способом предлагаемого изобретения окса-р-лактамовую дикислоту формулы IF растворяют в воде, раствор разбавляют ацетоном в количестве 10% по объему, рН раствора доводят до 6-7,5 гидроокисью аммония, и затем продолжают разбавлять ацетоном, пока не наступает погЛ тнение раствора из которого при стоянии кристаллизуется О-диаммониевая соль в виде кристаллов, которые отделяют от маточного раствора.
Дикислота может находиться в L -эпимерной форме, или в виде любой смеси D- и L-форм.
Концентрация раствора дикислоты в воде составляет предпочтительно 10%, однако можно также использовать концентрация меж,цу 5 и 15%. Прежде чем добавлять гидроокись аммония, водный раствор днкислоты разбавляют ацетоном предпочтительно до 10% по объему, хотя можно применять большее или меньшее разбавление ацетоном.
Желательно использовать концентрированяую гидроокись аммония, поскольку более разбавленные растворы основания приводят к большим объемам кристаллизационного раствора и требует добавления большого количества ацетона, наиболее предпочтительно 28% водный раствор. Для доведения рН водного раствора дикислоты можно добавлять раствор гидроокиси аммония в ацетоне, предпочтительно с концент.рацией 1-1,5 и,
Неооходимое значение рН можно полу 1ить также пропусканием аммиака в водный раствор дикнслоты при охл дении, Предпочтительно доводить рН до значения 6,5. После добавления гид окиси аммония для поддержания рН, продолжают раствор разбавлять ацетоном до тех пор, пока раствор не станет мутным. Кристаллическая диаммониевая соль кристаллизуется из раствора в виде D-эпимера, практически свободного от L-эпимера, Кри таллы собирают фильтрованием .или центрифугированием или другим подходящим способом отделения, отмыва от маточного раствора и высушивают Выходы D-диаммониевой соли, получа щейся по этому способу, составляют обычно не менее 85%. Способ проводят обычно при темп ратуре между 15 и и предпочти тельно при 25°С, При этих значениях рН и темпера ры окса-р-лактамовая дикислота и диаммониевая соль дикислоты, образующаяся в растворе, подвергаются быстрой рацемизации по хиральному центру ci-карбокси-п-оксифенилацети ной части цепи. Если даже исходная дикислота имеет L-конфигурацию, он или диаммониевая соль в растворе п вергается быстрой рацемизации до равновесной смеси D- и L-эпимеров. Равновесие нарушается выпадением в осадок кристаллов D-диаммониевой с ли по схеме 0-эпимер - ,, L-эпимер кристаллическая D - диамгЛониевая соль Соответственно поскольку кристал лическая D-диаммониевая соль является наименее растворимым эпимером быстрая рацемизация, происходящая в растворе в соответствии с уравнением,, дает дополнительное количество кристаллической О-диаммониевой соли Описанная выше быстрая рацемизация предпочтительна при температуре способа от 15 до и лучше всего осуществляется при 25с. Когда температура понижается, скорость рацемизации уменьшается, что приводит к более медленной кристаллизации и более низким выходам 0-диамглониевой соли. Хотя снижение температуры понижает растворимость О-диаммониев ой соли, однако ее меньше поставляется раствором из-за понижения скорости рацемизации. В условиях предлагаемо го способа получают большие выходы кристаллической D-диаммониевой соли поскольку происходит быстрая рацеми зация, в то время как D-эпимер диаммониевой соли практически нераств рим. При температурах, превьпигшяцих температуры, указанные в способе, скорость рацемизации возрастает. однако увеличивается растворимость 0-эпимера, что приводит к более низким выходам вЕДделяемой кристаллической соли. В способе О-эпимер окса-й-лактамовой диаммониевой соли получают в виде, практически свободном от L-эпимера. Термин практически свободный от L-эпимера в том виде, как он употребляется здесь, означает, что продукт содержит по крайней мере 95% D-эпимера. Процент D-эпимера в кристаллическом диаммониевом солевом продукте опредеТшется жидкостной хроматографией при высоком давлении (ЖХВД)., .Одна из систем ЖХВД, позволяющих определить процентное содержание О- и L-эпимеров следующая: колонка водный Бонопак С-18 (Bonopak С-18), скорость потока 3 мл/мин, растворитель: 0,1 ацетат аммония (100 ч,) в метиловом спирте (б ч.) , растворитель образца: рН 7,4 фосфатный буфер, концентрация образца: 1 мг/мл, объем образца: 15 микролитров. D , L-OKca-li-лактамовая дикислота, используемая для приготовления соли, может быть разделена ЖХВД на обогащенные D- и L-эпимеры для использования в предлагаемом способе. Предпочтительно использовать 0,1-дикислоту. В другом аспекте настоящего изобретения получают кристаллическуюВдиаммониевую соль повышенной эпимерной чистоты из некристаллической диаммониевой соли, в которой присутствует в основном L-эпимерная форма. Этот аспект изобретения заключается в применении способа кристаллизации О-диаммониевой соли, который включает растворение диаммониевой соли в воде, добавление смешивающегося с водой органического растворителя до точки помутнения, такого как этиловый спирт, н-пропиловый спирт, ацетонитрил. При стоянии в точке помутнения из раствора кристаллизуется D-диаммониевая соль практически свободная от L-диаммониевой соли. Кристаллизацию проводят при температуре между 20 и 35°С. Отличительной чертой кристаллизации является то, что D-эпимер диаммониевой соли избирательно кристаллизуется из водного раствора. Некристаллическая иаммониевая соль, используемая в ристаллизации, может представлять обой смеси D- и L-эпимеров в разичных соотношениях. Например, диоль можно обогащать р-эпимерной ормой используя ЖХВД, или она может редставлять собой смесь приблизиельно 50:50% двух эпимеров. Концентрация водного раствора неристаллической эпимерной смеси диммониевой соли не является сущест-
венным фактором, однако, если применять слишком малые объемные количества органического растворителя, то выходы обычно снижаются. Удобной является концентрация между 0,1 и 0,5 г/мл воды,
D-Диаммониевая соль кристаллизуется из водного раствора в виде тетрагидрата. Анализ продукта с помощью ЖХВД демонстрирует, что продукт, полученный по способу кристаллизации, содержит по крайней мере 95% 0-эпимерного соединения.
Пример 1. к раствору 5 г 1-окса-р-лактамовой дикислоты (40:6 ОД-смесь) в 15 мл 90:10 ацетон: вод {по объему) добавляют при комнатной температуре при интенсивном перемешивании 1,4 н. раствор гидроокиси г1ммония в ацетоне до тех пор, пока рН раствора не достигнет 6,5. К раствору добавляют ацетон до тех пор, пока раствор не станет мутным, и затем в раствор вносят затравку 0-дис1ммониевой соли и оставляют кристаллизоваться. Кристаллическую D-диаммониевую соль отделяют фильтрацией, промывают водным изопропиловым спиртом (1:9, вода:изопропанол, объемное отношение) и сушат. Высушенные кристаллы весят 4,5 г. Кр юталлическая соль содержит 97% 0-эпимера по данным ЖХВД.
Пример 2. Перекристаллизация 0-диаммониевой соли.
Некристаллическую окса-р-лактамовая диаммониевую соль весом 100 кг.
находящуюся в основном в D-конфигурации,обогащенную D-эпимером с помощью ЖХВД с использованием О,1 Нс ацетатно-аммониевого буфера в качестве элюента, растворяют в 0,5 мл воды. Раствор медленно разбавляют изопропиловызм спиртом до точки помутнения и оставляют при комнатной температуре if течение нескольких часов. Периодически добавляют небольшие дополнительные порции изопропилового спирта, чтобы убедиться в полноте кристаллизации. Кристаллы промывают водой:изопропанолом (1:9 в объемном отношении) и сушат в вакууме в течение нескольких часов. 5 Кристаллическая диаммониевая соль по данным ЖХВД на 98% представляет собой О-эпимер.
Указанную выше методику повторяют для ее четырех порций некристаллических диаммониевых солей, имекяцих содержание 0-эпимера соответственно 98, 85, 82 и 76%, и получают аналогичные результаты.
Формула изобретения
Способ получения кристаллической формы D-конфигурации диаммониевой соли 7р-/о1-карбокси-((п-оксифенил)-ацетамидо/-7Д-метокси-3-(1-метилтетразол-5-ил)тиометил-1-оксадетиа-З-цефем-4-карбоновой кислоты формулы Г
о О сн С-1ш4
соош
ОШз О-и -и
„L. Y ГV I
ЫуД-СН -$Л.
п - 4-V
О соом, «
отлич ающийся тем, что к водному раствору ; -/с1-карбокси-г« -(п-оксифенил)ацетамидо/-7о6-метокси-3-(1-метилтетразол-5-ил)тиометил-1-оксадетиа-3-1 фем-4-карбоновойкислоты формулы 5
CH-c-HH-V-Y и I
W /-4у -СНа-8- Д
оснз о
н-
li
н СООНСНз
добавляют ацетон, к водно-ацетоновому раствору кислоты формулы (11) при температуре от 15 до 30°С добавляют гидроокись аммония до установления рН раствора от 6,0 до 7,5, образующийся раствор разбавляют ацетоном .до точки помутнения, из раствора кристаллизуют целевой продукт и, в случае необходимости, его обсггидают с жидкостной хроматографии при высоком давлении и/или, в случае необходимости, получают водный раствор Обогащенного целевого продукта или водный раствор О,L-эпимерной
смеси диеи мониевой соди и его разбавляют при температуре от 20 до 30 смешиваемым с нодой органическим растворителем до точки помутнения и из раствора кристаллизуют целевой продукт.
2,Способ по п,1, отличающ и и с я тем, что используют 28%-ный
водный раствор гидроокиси аммония.
3.Способ по п.1, отличающий с я тем, что используют раствор гидроокиси аммония в ацетоне с
.концентрацией от 1-1,5 н.
4.(iKViJti no nn. 1-3, отличающийся тем, что устанавливают рИ растнора при 6,5.
5.Способ по пп. 1-4, отличающийся тем, что используют водный раствор кислоты формулы 5
с концентрацией от 5 до 15% (вес/объем).
6.Способ по п.1, отличающий с я тем, что используют вод- ный раствор D,L-эпимерной смеси диаммониевой соли с концентрацией от 0,1 до 0,5 г/мл.
7. Способ ПОП.1, отличающийся тем, что в качестве смешивающегося с водой органического растворителя используют изопропиловый спирт.
Источники информации, принятые во внимание при экспертизе
1. Патент США 4138486, кл. 424/248, 52, опублик. 06.02.79.
