Способ получения метилсульфатов N,N,N-триметиламмониевых производных полиеновых макролидов Советский патент 1982 года по МПК C07C211/62 A61K31/7036 A61K31/7048 C07G11/00 

Изобретение относится к способу получения новых аналогов природных антибиотиков - метилсульфатов М,Ы,Ы-триметиламмониевых производных полиеновых макролидов общей формулы

Тк-К(ЙНз)Л

(1)

где R - остаток нистатина, полифунгина, амфотерицина Б, кандицидина, пимарицина, 1 трихомицина, леворина, римоцидина, канамицина и ауреофацина;

X - метоксикарбонильная группа, . или R - остаток перимицина;

X - атом водорода. Известно, что антибиотики из группы полиеновых макролидов, например нистатин, ПоЯифунгин, ам-фотерицин Б и др., обладают выраженным антибактериальным действием ij.

Известен способ алкилирования третичных аминов и этерификации карбоновых кислот с помощью диметил;сульфата в присутствии карбонатов

щелочных металлов в инертном органи ческом растворителе ,2j,

Цель изобретения - расширение средств воздействия на живой организм.

Указанная цель достигается способом получения новых метилсульфатов Ы,М,М-триметиламмониевых производ10ных полиеновых макролидов вышеуказанной общей формулы 1, заключающимся в том, что исходный поли новый макролид, соответствукяйий вышеуказaнны 1 значениям радикалов R и X,

15 обрабатывают диметилсульфатом в присутствии бикарбоната натрия в органическом растворителе, таком как диметилформамид, диметилацетамид, диметилсульфоксид и алифати20ческие спирты с длиной цепи C.j. высаживают целевой продукт диэтиловым эфиром, растворяют в бутаноле, промывщот водой, упаривают при пониженном давлении и высгикивают

25 диэтиловым эфиром.

п. р и м е р 1. 20 г полифунгина с EV 800 (при 304 нм) растворяют в 20 мл смеси диметилформамидметанол (1:1) добавляют 2 г бикарбоната натрия и по каплям вводят 2 глп диметилсульфата. Раствор перемешивают при комнатной температуре в те чение 10 ч. Затем при пониженном давлении из реакционной сгмеси отгоняют метанол, добавляют диэтиловый эфир, полученный осадок отделяют и смешивают с 50 мл бутанола. Раствор целевого продукта в бутаноле отделяют на центрифуге от нерастворившегося бикарбоната натрия, дважды промывают 20 мл воды, упаривают с добавлением воды при пониженном давлении до объема примерно 15 мл и обрабатывают диэтило.вым эфиром. Выделившийся осадок отделяют, промывают последовательно диэтиловым эфиром и гексаном и высушивают .в вакууме. .Получают 1,6 г метилсульфата метилового сложного эфира Ы,М,Н-триметиламмониевого производного полифунгина с Е; 700 (пр 304 им), что составляет 80% теорети ского выхода. Пример 2. 20 г нистатина с Е 860 (при 304 нм) растворяю в 50 мл метанола, добавляют 2 г бикарбоната натрия и вводят по каплям i2 мл да1метилсульфата. Полученный ра твор перемешивают при 25°С в течени 4 ч и далее обрабатывают, как описа но в примере 1. Получают 1,5 г метилсульфата метилового сложного эфира Ы,К,Ы-триме тиламмониевого производного нистати на с Elll 760 (при 304 нм), что составляет 75% теорети,ческого выход Пример 3. 1,0 г амфотерици Б с Е 1420 (при 382 нм) раство ряаот в 20 мл смеси диметилформамидметанол (10:1), добавляют 1 г бикар боната натрия и по каплям вводят 1 диметилсульфата, Раствор перемешивают при 15 С в течение 1 сут и далее обрабатывают, как описано в примере 1. Получают 0,9 г метилсулъфата мет лового сложного эфира Ы,М,М-тримети аммониевого производного амфотерицина Б с 900 (при 382 нм), ч составляет 90% теоретического выхр- да. Полученный осадок очищают методом противотбчного разделения в системе хлороформ:метанол:вода (2:2tl Получают 0,3 г метилсульфата метило вого; сложного эфира Ы,М,Й-1риметиламмониёвого производного амфотерицина Б С , 1400 (при 282 нм). Пример 4. 1г канамицина с EICM 820 при 383 нм) растворяют 20 мл смеси диметилацетамид-метанол (10:1), добавляют 1 г бикарбоната н .трия и по.каплям вводят 1 мл димети сульфата. . Раствор перемешивают при 20 С в 15 ч и далее обрабатывают, как описано в примере 1. Получают 0,8 г метилсульфата метилового сложного эфира Ы,Ы,Ы-триметиламмониевого производного канамицина с Ej 550 (при 383 нм) , что составляет 80% теоретического выхода. Полученный продукт очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле, предварительно насыщенном водой, в системе хлороформ:метанол:вода (20:10:1) . Получают О,2 г производного канамц . ЯЦП fi-n-,T;r Т7Я ux«t 850 (при 378 нм). мицина С Е Пример 5.1г трихомицина с E-fcM 450 (при 378 нм) растворяют в 20 мл смеси диметилацетамид-метанол (10:1) добавляют 1 г бикарбоната натрия и по каплям вводят 1 мл диметилсульфата. Раствор перемещивают при в течение 15 ч и далее обрабатывают, как описано в примере 1. Получают 0,6 г метилсульфата метилового сложного эфира М,М,М-триметиламгданиевого производного трихомицина с (при 378 нм) . Пример 6.1г пимаридина -С Е 960 (при 304 нм) растворяют в 2 мл метанола, добавляют 1 г бикарбоната натрия и по каплям вводят 1 МП диметилсульфата. Раствор перемешивают при в течение 15 ч и далее обрабатывают, как описано в примере 1. Получают 0,85 г метилсульфата метилового сложного эфира Н,Н,Н-триметиламмониевого производного пимарицина с 700 (при 304 нм), что составляет 80% теоретического выхода. Пример 7. 1г леворина с Е-(см 800 (при 378 нм) растворяют в 20 мл смеси диметилформамид-метанол (10:1), добавляют 1 г бикарбоната натрия и по каплям вводят 1 мл диметилсульфата. Раствор перемешивают при в течение 15 ч и далее обрабатывают, как описано в примере 1. Получают 0., 7 г метилсульфата метилового сложного эфира Ы,К,Н-триметиламмониевого производного леворина с Щ 600 (при 304 нм), что составляет 70% теоретического выхода, .j Пример 8. 1г римоцидина с EICM 600 (при 304 нм) растворяют в 20 мл смеси диметилформамид-метанол (10:1), добавляют 1 г бикарбоната натрия и по каплям вводят 1 мл диметилсульфата. Раствор перемешивают при 2СРС в течение 15 ч и далее обрабатывают, как описано в примере 1. Получают 0,8 г метилсульфата метилового сложного эфира Ы,Ы,М-триметиламмошевого производного римоцидина icM - 560 (при 304 нм), что составляет 80% теоретического выхода. П р имер 9. 0,1г перимицина с 650 (при 380 нм) растворяют в 2 мл смеси диметилацетамид-метанол (10:1), добавляют 0,1 г бикарбоната натрия и по каплям вводят О,1 мл диметилсульфата. Раствор перемешивают при 20 С в течение 10 ч, а затем обрабатывают, как описано в примере 1. Получают 0,05 г метилсульфата К,М,М-триметиламмониевого производно го перимицина. с 600 (при 380 нм), что составляет 50% теоретического выхода. Пример -10. -1 г ауреофацина с 800 (при 378 нм) растворяют в 20 мл смеси диметилформамид метанол (10:1), добавляют 1 г бикарбоната натрия и по каплям вводят 1 мл диметилсульфата. Раствор перемешивают при 20 С в течение 20 ч, после обрабатывают, как описано в примере 1. Получают 0,7 г метилсульфата метилового сложного эфира М,М,Н-триме.тиламмониевого производного ауреофацина с Е 760 (при 378 нм), что составляет 65% теоретического выхода. Пример И. ОД г кандицидина с ЕУс2, 400 (при 378 нм) растворяют в 5 мл смеси диметилформамидметанол (10:1) добавляют 0,1 г бикарбоната натрия и по каплям вводят 0,1 мл диметилсульфатаi Раствор перемешивают щт в ,течение 15 ч, после чего обрабатывают, как описано в примере. Получают 0,04 г метилсульфата метилового сложного эфира N,N,N-триметиламмониевого производного кандицидина с 560 (при 378 нм), что составляет 45% теоретического выхода. Пример 12. 1г микогептина с « 700 (при 378 нм) растворяют в 20 МП смеси диметилацетамид-метанол (10:1) добавляют 1 г бикарбоната натрия и по каплям вводят 1 мл диметилсульфата . Раствор перемешивают при 20 С в течение 15 ч, а затем обрабатывают, как описано в примере 1 Получают 0,8 г метилсульфата мети лового сложного эфира N,N,N-тpимeтил аммониевого пргоизводного микогептина с 680 (при 378 нм), что составляет 85% теоретического выхода. Структура полученных производных доказана спектроскопическими методами. Для примера описывается идентификация производного кандицидина, полученного в результате алкилирования даметилсульфатом согласно способу и далее называемого DMS-кандици--. дином. В условиях кислого гидролиза к&ндицидина выделяется остаток микозамина. Вещество, полученное в результате расщепления 0-гликозильной связи действием разбавленных растворов кислот на DMS-кандицидин, боло идентифицировано как М,Ы,Ы-триметилмикозамин. Структура последнего была определена на основании анализа масс-спектра, проведенного технической десорбции полем (основной-ион, одновременно являющийся массовым ионом при м/е 206), а также спектра протонного магнитного резонанса (сигнал при S 3,68, характерный для метильных групп, связанных с атомом азота, с интенсивностью, в три раза превышающей сигнал при S 1,68, характерный для трех протонов метильной группы в позиции 6 аминосахара). Доказательством присутствия сложноэфирной связи в молекуле производного антибиотика является наличие интенсивной полосы поглощения в инфракрасном спектре при ) 1730 см при одновременном отсутствии полосы карбоксильного иона, характерной для исходного антибиотика при -|) 1590 см. Спектры поглощения в диапазоне видимого и ультрафиолетового света кандицидина и его производного лишь незначительно отличаются интенсивностью, а положение максимумов поглощения и осцилляционная структура идентичны. Это свидетельствует о неизменной структуре полиенового хромофора в ОМБ-производном, В спектре ядерного магни.тного резонанса персилильного DMS-канднцидина обнаружено наличие полос S 3,65 и S 3,03, характерных для водородов метоксильной и N-замещенной метильных групп. В водных растворах основани;. из кандихшдина выделяется р-аминоацетофенрн, а из DMS-кандицидина - N-диметил-, N-метил- и незамещенный р-аминоацетофенон в молярных соотношениях 3:5:2. Результаты испытаний описываекых соединений на противогрибковую и гемолитическую активности представлены в таблице.

Нродолжбние таблицы

Примечай и е: DMS - метилсульфат метилового сложного эфира N,N,N-триметиламмониевого производного соответствующего полиенового макролида или метилсульфат К,Ы,М-триметиламмониевого производного перимицина;

I ICj-o-концентрация вещества, вызывшощая 50%-ное торможе.ние роста клеток Saccaromyces cerevisiae в жидкой . питательной среде и определенная спектрофотометрически при Д- 660 нм после 24 ч инкубации при ,

ЕНро- концентрация вещества, вызывающая в стандартных условиях 50%ное выделение гемоглобина и определенная спектрофотометрически при Л 550 нм.

Формула изобретения

Способ получения метилсульфатов .N,N,N-триметиламмониевых производных полиеновых макролидов общей формулы

11-}|(Н5)

Г11-}|((5Н5)з1

I X

где R - остаток нистатина, полифунгина, амфотерицина Б, кандицидина, пимарицина, трихомицина, леворина, римоцидина, канамицина и ауреофацина;

X - метоксикарбонил; R - остаток перимицина; X - водород,

отличающийся тем, что исходный полиеновый макролид/ соответ ствуюищй указанным значениям радикалов R. и X обрабатывают диметилсульФатом в присутствии бикарбоната натрия в органическом растворителе, таком как диметилформамид, диметил5 ацетамид, диметилсульфоксид и алифатические спирты с длиной цепи Qg,, высаживают целевой продукт диэтиловым эфиром, растворяют в бутаноле, промывают водой, упаривают при пониженном давлении и высаживают диэтиловым эфиром.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1.Машковский М.Д.Лекарственные 5 средства. М,, Медицина, 1972, ч.И,

с.296-319.

2,Физер Л. и Физер М. Реагенты для органического синтеза. М., Мир, 1970, Т.1, с.316-318.