Питательная среда для выращивания посевного материала асSINомYсеS RecIFeNSIS VaR еLYтIсUS 2435 Советский патент 1982 года по МПК C12N1/20 C12N9/00 

(54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫРАЩИВАНИЯ ПОСЕВНОГО МАТЕРИАЛА ACTINOMYCES RECIFENSIS VAR LYTICUS

Изобретение относится к микробио логической промышленности, а именно к получению литических ферментов широкого спектра действия, которые могут быть использованы для разрушения клеток различных микроорганизмов с целью получения биологически активных веществ внутриклеточной локализации усвояемого белка, изготовления на основе микробных лизатов питательных сред. Препараты литических ферментов могут быть использованы в научно-исследовательской работе для деградации клеток и выделения их структурных компонентов, а также в медицинской практике.

Известно использование среды Чапека в качестве питательной среды для выращивания посевного материала Actinomyces гееifens is var lyticus продуцента литических ферментов широкого спектра действия, содержащей источник углерода, источник азота, минеральные соли, агар и воду, причем

источником углерода является глюкоза, источником азота - нитрат натрия, а в набор минеральных солей вй;одят калий хлористый, магний сернокислый, калий фосфорнокислый двузамещенный, железо сернокислое и кальций углекислый при следующем соотношении компонентов, г/л:

Калий хлористый0,5

Магний сернокислый 0,5

10 Калий фосфорнокислый двузамещенный1

Железо сернокислое 0,01 Натрий азотнокислый 2 Кальций углекислый 3

15 Глюкоза20

Агар20

ВодаОстальное

20 Посевной материал выращивается в течение 2-3 сут и используется для засева ферментационной среды в количестве 8-10 в виде вегетативного ми целия Г 1 33981Однако питательная среда для приготовления посевного материала имеет ряд недостатков, заключающихся в том, что штамм Act. recifensis var lyticus при выращивании на этой среде накапливает малое количество биомассы, качество посевного материала низкое, в связи с чем при засеве ферментационной среды он вносится в коли4ectBe 8-10 .об. I, Целью изобретения является увеличение накопления биомассы, снижение количества посевного материала, вводимого в ферментационную среду, и улуч шение качества. Поставленная цель достигается тем, что питательная среда для выращивания посевного материала Actinomyces recifensis var lyticus продуцента литических ферментов, содержащая источник углерода, источник азота, минеральные соли - двузамещенный фосфорнокислый калий и углекислый кальций и воду, содержит в качестве источника углерода крахмал, в качестве источников азота - соевую муку и аммоний азотнокислый, а также дополнительно содержит хлористый кальций при следующем соотношении компонентов, вес. : Соевая мукаО,,5 Крахмал3,0-5,0 Аммоний азотнокислый 0,,08 Калий фосфорнокислый 0,01-0,02 двузамещенный 0,1-0,15 Кальций хлористый

2Ц 72 0,32 0,35 1,55

4,0

3, 2,1 Кальций углекислыйО,2-0,А ВодаОстальное Пример. Готовят посевную среду следующего состава, вес. соевая мука 0,48; ,075; крахмал k,0i K,j,,01;. CaCl2. 0,1; СаСО 0,2, ос тальное вода, рН 8,0. Среду стерилизуют и после охлаждения засевают споровым материалом зрелой культуры Act. recifensis var lyticus . Выращивание посевного материала ведут в колбах Эрленмейера емкостью 500 мл, содержащих по 100 мл среды, на качалке (220 об/мин) при 28 С. I Через А8 ч количество мицелиальной массы в посевной среде составляет 3,25 против 0,95 г/л на базовой среде (табл. 1). Двухсуточный посевной материал в количестве 5 об. % вносят в ферментационную среду. В процессе ферментации в культуральной жидкости, освобожденной от мицелия, определяют бактериолитическую активность (тесткультура Staphylococcus aureus 1+2a) и дрожжелитическую активность (тесткультура Candida qui1 iermondii). Данные, иллюстрирующие уровень накопления биомассы и закономерности синтеза лизоэнзимов штаммов Act. recifensis var lyticus в зависимости от питательных сред, предлагаемой и базовой, использованных для выращивания посевного материала, приведены в табл. 1 и 2. Таблица 1

Таблица2