Штамм гриба реNIсILLIUм FеLLUтаNUм,57699-продуцент пектинэстеразы Советский патент 1982 года по МПК C12N15/00 C12N9/14 

Штаьш, iPeniciPCium feeCt/ anuh, 5769 вьаделен из почвы Киевской области (УССР). Культура храшгГся в коллекции чистых культур отдела физиологии и систематики микромицетов института микробиологии и вирусологии им. д. к. Заболотного АН УССР в депошфован в центральном музее промышленных микроорганизмов института ВНИИгенетика под коллек ционным номером ЦМПМ Р -152, Активность пектинэстераэы у данного штамма стабилизирована при многократных пересевах йа агаризованныо питательные среды. Штамм,РеniclC Sum fe Свисали pi 57699, характеризуется следующими физвозюго-морфологическими признаками , Морфологические признаки гриба Pen cieeutn fePEftanum Biqur f6, Исследуют jpocT гриба на 6 средах ра различного состава. Среда Чапека Колония ограниченно растущие, состо Ш1ше из плотного войлочного сплетения тонких гиф, в центральной части выпуклые, по краю радйально складчатые, с узкям растущим неровным краем (0,5см в центральной части окрашены в беловато сизый цвет, крайняя конидиеносная зона бледно-серовато-зеленая. Обратная сторона колонии сероватозеленоватого цвета. Конкдиеносцы гладкие ,,3fj, f отходят от плотного мицелия, одномутовчатые, изредка с одной боковой веточкой. CtepnrM в пучках по &-8 ланцетовидные 8-10x2,0-2, . Конидии эллиптические, около 2,5/, гладкие, в массе тускло-аеленые, соеди нены в колонии. Сусло-агар Колонии умеренно растущие, хорощр развиты, хлопьеввдновойлочные Растут концентрическими аонами, по центру плотновойлочные, по краю хлопьевидновойлочные. Края неровные. Растущая зона (13 мм) кремовато-белого цвета. Обратная сторона колонии - темнокоричневого цвета. Спороношение слаРбое. Картофельный агар Колония слабо растущая, низко плоФновойлочная с неровными краями белого цвета. Обратная сторюна телесного цвета. Спороношение f отсутствует. Кйртофельно-глюкозный агар Колония умеренно растущая, хло1П евидновойлочная с концентрическими зонами роста. В центральной части серовато-f дымнатогх цвета, выпуклая, растущий край желтовафо-розовый (3,5 мм), ровный. С возрастом приобретает сероватокоричневый оттенок. Споронощение хорошее. Идентичное среде Чапека. Среда Сабуро Колония плотно хлопьевидновойлочная, умеренно растущая. Цвет варьирует в пределах бледно-желзЕО-серовато-зеленого. Растет концентрическими зонами. Растущий край неровный (0,5 мм), белого цвета. Обратная сторона колонии светло-коричневая. Спороношение слабое. Среда Ролена Тома Самый лучший рост . Колония войлоч- . но-пущистая, с радиальными бороздами, и отдельными сегментами. Цвет колонии от светло-желто-сероватого до темносерого. Растущий край колонии неровный, широкий (до S мм), кремового цвета. Обратная сторона колонии светло-коричневого цвета. Спороношение обильное. В таблице показан линейный рост колоний в динамике. 598 Физиологические признаки гриба , Ffenicl евигп ffcpeutanom В йиг еблеахугйпш Гриб усваивает глюкозу, галактозу, мальтозу, фруктозу, сахарозу, крахмал, инулин, сорбит, макннт, янтарную и , яблочную кислоты этанол и метанол -. слабо. Слабо усваивает целлюлозу. Уо: ваивает нитратный и нитратный азот, осо бенно хорошо ам1 юнийшай. Из органических источников азота ассимулирует мочеви- ну, пептон, кукурузный экстракт, солодо вые ростки. Растет в широких пределах рН 2,5-9 Аэроб. В процессе роста подкисляет ере ду до велнч шы рН 2,,3. Температура оптимального роста 26-28 С, Маковмальное образование фермента в культур ной жидкости при росте на жидкой питательной среде с вндуктс юм и минеральнымн солями в условиях глубинного куль тивированця наблюдается после ДО ч. Гриб Pen c-JWom feeeo-tanoip,57699,св боден от целлюлотических и ксилолитвчески ферментов, не обладает активностью -га- лактозидазы, не содержит кислой протеина При зфанании и пассщхтанин на суоло-агаре высокий уровень ферментати& ной активности штамма не снижается и cos5)aняieтcя в течение 3-х лет. При культивщюванни на жидкой пвт тельной среде определенного состава штамм Penicieeonifeadtanoqi,57699, сивтезирует пектйнэстеразу. Пример. ПосеввЕГой материал вь ративают при в колбах емкостью 750 мл на круговой качалке 220 об/мин в течение 4О ч на среде, содержащей, %: аммоний сернокислый 0,7; калий фосфорнокислый однозамешенный О,1; магннй сернокислый 0,05} пектинсодержащнй и дуктсф; свекловичный 3KDM 4,Of а такзке воду дистиллированную 10О мл. Посевной материал, составлаюяшй 1О% от общего объема среды, добавляют в среду, содержащую та яю компсгаенты и в тех же количествах, что н лрн щш- готовлении посевного материала, и зас&янную среду культивщ)уют при в течение 66 ч в колбах емкостью 75О мл на качалках 22О об/МЕш или в производственных ферментерах. Из культуральной жидкости гриба, oiw деленной от биомассы и неиспользоваоного субстрата, получают фермевстн й препарат пектннэстеразы осажаеякем 2,5 объемами на объем культурального фвпьграта, охлажденного до 4 С ацетона. Осадок отделяют центрифугированием при ЗОООоб /мин в течение 10 мин и лиофилизвруют. 22 Активность ферментного препарата пектинэстеразы гриба определяют по гоо тированной методике в стандартных условиях (Препараты ферментные. Методы определения певтолитйческой активности. ГОСТ 20263-74, Госстандарт СССР, 1975} Е выражают в микроэквивалентах/ прогидролизованных сложноэфирных связей молекуле пектина за 1 мин при . Величина активности фермент1гого пр iпарата пек -инэстеразы гриба Penic-iCetum feCOotanom, 57699, равняется 172,518О,Ое(/г. Штамм Pen«t4eGiotn {eBPuiciipum 57699. характеризуется признаком преимуществ венного содержЕжия фермента пектинэоJT)ai%i и низким содержанием других ферментов пектолитического комплекс эндо- и экзополигалактуроназы. Так, активность эндополигалактурова зы, определяемая в ферментном указанного гриба по гостирсшанной методике, равняется, 18,,О еш, экзополнгалактуроназы - 82,,5 ед обшая пектолитич.еская активность 48,4-50,2 ед/ь, В то же время продуцент комплекса пе толитических ферментов производстве ного значения Aepercjtggos foei-Tdus вырабатывает в значительных коОтчествах 8ндополигала1егуроназу (2Об,О-80О,0 ед/г), акзаполигалактурон зу (400,О-50О,О ед/г),а в фермент ных препаратах -б пектофоетинид Г 1О х и пектофоетиднн П 1О х, активность яе тинэстеразы в комплексе составляет всего 7,,0 ед/г, т.е. в 26-5 раз ниже, чем у шталша Penictee om f eMot«4H ni, 57699.1 Штамм гриба PenicHC-fum CeSeu-fcctnum, 57699, проверен на патогенность в xi деле антибиотиков института мвофобжк логяв и вщ)усологии АН УССР. Таким образом, штамм (« fe 0lilc nurp,57699, по сравнению с вэвестным обладает повышенной способвоотью к биосинтезу фермента пектиэстеразы и представляет собой новую культурУ со стойквыи фвзиолого-кюрфологвческямв свойствами. Штамм Penicmium Ceeeotbnui j ,57699, является перспективным для промышлеввоств в может использован в качестве продуцеята ферментного прешфата пектофаллутанина. Формул а и братеввя 1 111тамм гриба PenicVeefum $вИГ«Л« йу«, 57699, (коллекция Центрального музея

7 -9S50228

лромьшшеяяых мивросуганиамов ияитнпу Двторское свядетельство СССР

та ВНИИгенетика, коллекционный но-№ 488850, кл, С 12 N 1/14 1©73. мер ЦМПМ{ -152) - лродогцент пекти эстврааы.2, Авторское свидетельство СССР

Источнюся внформация,5 293846, кл. С 12 N 9/14, 1970

11рввятые во прв экспертяэе(прстотвл).