ШТАММ БАКТЕРИЙ Escherichia coli ГИСК № 281, ОБЛАДАЮЩИЙ СПОСОБНОСТЬЮ ПРОДУЦИРОВАТЬ ТЕРМОЛАБИЛЬНЫЙ ЛТ-ЭНТЕРОТОКСИН Российский патент 2007 года по МПК C12N1/00 A61K39/108 

Описание патента на изобретение RU2293764C1

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения термолабильного энтеротоксина (ЛТ-энтеротоксина) и анатоксина Escherichia coli при производстве вакцин.

Техническим результатом является штамм Escherichia coli ГИСК №281, выделен от больного с урологической инфекцией в Республиканском онкологическом диспансере г.Уфы, депонирован в коллекции Государственного научно-исследовательского института стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов им. Л.А.Тарасевича и имеет регистрационный номер 281.

Штамм Escherichia coli ГИСК №281 характеризуется следующими признаками.

Культуральные признаки.

При выращивании на обычных питательных средах при температуре 37°С штамм на поверхности плотной питательной среды растет с образованием характерных полупрозрачных изолированных колоний в течение суток. При выращивании в бульоне Хоттингера (рН 7,2-7,4), при температуре 37°С в течение 24 часов вызывает равномерное помутнение и выпадением осадка.

Способы определения активности ЛТ-энтеротоксина:

Субплантарное введение мышам весом 15-16 г 0,05 мл центрифугата 20 часовой бульонной культуры вызывает отек лапки более 100 мг. Аксенова Е.В. 1980 г.

Интраназальное введение 0,05 мл 20-часовой бульонной культуры вызывает острую токсическую пневмонию у белых мышей-самцов весом 15-16 г (гибель в течение 4 часов). Войно-Ясенецкая Н.К. 1957 г.

Внутримышечное введение 300 млн микробных клеток 20-часовой бульонной культуры вызывает некроз кожи кролика диаметром 2,5 см.

В опыте петля тонкой кишки кролика при введении 80 млн м.т. 20-часовой бульонной культуры дает положительный результат (V/L=1,2).

Гретый при 56°С в течение 45 мин центрифугат 20-часовой бульонной культуры вызывает отек лапки мышей до 30 мг, не вызывая некроза кожи кролика. Гретая при 100°С 20-часовая культура не вызывает накопления жидкости в изолированной петле тонкого кишечника кролика (V/L=0,3).

Условия хранения культуры после лиофильной сушки в ампуле или выращенной при 37°С на 0,3%-ном МПА (рН 7,2-7,4), залитым стерильным вазелиновым маслом, при температуре 4°С.

Среды для размножения - бульон Хоттингера (рН 7,2), мясопептонной агар, содержащий 5% эритроцитов кролика, при температуре 37°С в течение 24 часов.

Генетические особенности: Hly+, Ent+, MS+, MR+, LTh+.

Устойчив к пенициллину, ампициллину, олеандомицину, цефтазидину, цефазолину, ристомицину, линкомицину, фузидину, клиндамицину.

Пример 1.

0,1 мл 1 млрд суспензии суточной агаровой культуры в физиологическом растворе сеют в стерильный бульон Хотингера (5 мл рН-7,2) инкубируют в термостате при 37°С в течение 20 часов, центрифугируют при 6000 об/мин в течение 7 минут. Полученную надосадочную жидкость (центрифугат) в объеме 0,05 мл вводят субплантарно в заднюю левую лапку мышей-самцов весом 15-16 г. Через 24 часа животных умерщвляют эфиром и ампутированные по голено-стопному суставу лапки взвешивают на торсионных весах, при этом центрифугат штамма Escherichia coli ГИСК №281 давал разницу между левой и правой лапками не менее 100 мг, остальные 20 штаммов, способные продуцировать ЛТ-энтеротоксин от 65 до 90 мг. Контроли - нативный стерильный бульон Хоттингера (рН 7,2) и гретый при 56°С центрифугат 20-часовой бульонной культуры 30-35 мг соответственно.

Результаты приведены в таблице.

Пример 2.

0,1 мл 1 млрд суспензии суточной агаровой культуры сеют в бульон Хоттингера (рН 7,2), инкубируют в термостате при 37°С в течение 20 ч и 80 млн м.т. суспезию в объеме 1 мл вводят в сегмент изолированной петли тонкого кишечника кролика. Через 16 часов животных умерщвляют воздушной эмболией и рассчитывают соотношение объема экссудата к длине сегмента (V/L). При этом 20-часовая бульонная культура штамма Escherichia coli ГИСК №281 оказалась способной давать накопление жидкости в большом количестве и показатель V/L составил 1,2. У остальных 20 штаммов, способных продуцировать ЛТ-энтеротоксин, показатель V/L колебался в пределах 0,9-1,2. При введении стерильного бульона Хоттингера и гретой при 100°С 20-часовой бульонной культуры отношение объема накопленной жидкости к длине сегмента составило 0,25 и 0,3 соответственно.

Сравнительные показатели ЛТ-энтеропродуцирующей активности Escherichia.Номер штаммаВидОтек лапок (мг)Изолированная петля тонкого кишечника (V/L)281E.coli ГИСК №2811101,2624-\-740,9331-\-760,9144-\-801,0702-\-851,01065-\-750,824-\-700,7133-\-780,9Контроль300,25-0,3Примечание: в таблице приведены средние данные из пяти отеков.

Похожие патенты RU2293764C1

название год авторы номер документа
ШТАММ БАКТЕРИЙ Escherichia coli ГИСК №280, ОБЛАДАЮЩИЙ СПОСОБНОСТЬЮ ПРОДУЦИРОВАТЬ ТЕРМОЛАБИЛЬНЫЙ ЛТ-ЭНТЕРОТОКСИН 2006
  • Билалов Фаниль Салимович
  • Габидуллин Зайнулла Гайнуллович
  • Алсынбаев Махамат Махаматуллович
  • Туйгунов Марсель Маратович
  • Булгаков Айдар Казбекович
  • Гибазов Нуршат Нургарифанович
  • Мамбетова Эльмира Факиловна
  • Гашимова Динара Тимербаевна
  • Туйгунова Вера Георгиевна
  • Габидуллин Юлай Зайнуллович
  • Ахтариева Айгуль Атласовна
RU2293765C1
ШТАММ БАКТЕРИЙ SERRATIA MARCESCENS ГИСК № 268 - ПРОДУЦЕНТ ТЕРМОЛАБИЛЬНОГО ЭНТЕРОТОКСИНА 2003
  • Саляхов Р.З.
  • Габидуллин З.Г.
  • Алсынбаев М.М.
  • Кулагин В.Ф.
  • Зайнуллин Р.Р.
  • Булгаков А.К.
  • Давлетшина Г.К.
  • Туйгунов М.М.
  • Ахтариева А.А.
  • Габидуллин Ю.З.
RU2249038C1
ШТАММ БАКТЕРИЙ SERRATIA ODORIFERA ГИСК N275 - ПРОДУЦЕНТ ТЕРМОЛАБИЛЬНОГО ЭНТЕРОТОКСИНА 2003
  • Саляхов Р.З.
  • Габидуллин З.Г.
  • Алсынбаев М.М.
  • Давлетшина Г.К.
  • Туйгунов М.М.
  • Ахтариева А.А.
  • Суфияров Р.С.
  • Габидуллин Ю.З.
RU2247150C1
ШТАММ БАКТЕРИЙ ENTEROBACTER AGGLOMERANS ГИСК N 257, ОБЛАДАЮЩИЙ КОМПЛЕКСОМ ФАКТОРОВ ПАТОГЕННОСТИ 2000
  • Ахтариева А.А.
  • Габидуллин З.Г.
  • Алсынбаев М.М.
  • Кулагин В.Ф.
  • Кунягина О.В.
  • Ленгесова В.В.
  • Гарифуллин А.А.
  • Мавзютов А.Р.
  • Гафаров М.М.
  • Суфияров Р.С.
  • Гашимова Д.Т.
RU2162485C1
ШТАММ БАКТЕРИЙ ENTEROBACTER GEG ROVIAE ГИСК N259, ОБЛАДАЮЩИЙ КОМПЛЕКСОМ ФАКТОРОВ ПАТОГЕННОСТИ 1999
  • Ахтариева А.А.
  • Алсынбаев М.М.
  • Габидуллин З.Г.
  • Хананова Р.К.
  • Булгаков А.К.
  • Кулагин В.Ф.
  • Суфиярова Р.З.
  • Габидуллин Ю.З.
  • Гафаров М.М.
  • Очилова Р.А.
RU2161197C1
ШТАММ БАКТЕРИЙ ENTEROBACTER CLOACAE ГИСК № 258, ОБЛАДАЮЩИЙ КОМПЛЕКСОМ ФАКТОРОВ ПАТОГЕННОСТИ 2000
  • Ахтариева А.А.
  • Габидуллин З.Г.
  • Алсынбаев М.М.
  • Кулагин В.Ф.
  • Ленгесова В.В.
  • Хананова Р.К.
  • Булгаков А.К.
  • Гарифуллин А.А.
  • Габидуллин Ю.З.
  • Суфиярова Р.З.
  • Бакиров А.Б.
RU2164942C1
ШТАММ БАКТЕРИЙ CITROBACTER DIVERSUS, ОБЛАДАЮЩИЙ КОМПЛЕКСОМ ФАКТОРОВ ПАТОГЕННОСТИ 1995
  • Габидуллин З.Г.
  • Гашимова Д.Т.
  • Мавзютов А.Р.
  • Булгаков А.К.
  • Тайгунов М.М.
RU2105807C1
ШТАММ БАКТЕРИЙ KLEBSIELLA PNEUMONIAE, ОБЛАДАЮЩИЙ КОМПЛЕКСОМ ФАКТОРОВ ПАТОГЕННОСТИ 1995
  • Габидуллин З.Г.
  • Гашимова Д.Т.
  • Мавзютов А.Р.
  • Булгаков А.К.
  • Суфиярова Р.З.
RU2105809C1
ШТАММ БАКТЕРИЙ MORGANELLA MORGANII - ПРОДУЦЕНТ ТЕРМОЛАБИЛЬНОГО ЭНТЕРОТОКСИНА 1996
  • Гашимова Д.Т.
  • Габидуллин З.Г.
  • Мавзютов А.Р.
  • Булгаков А.К.
  • Ишкильдин И.Б.
  • Дорофеев В.Д.
RU2113474C1
ШТАММ БАКТЕРИЙ RETTGERELLA RETTGERI, ОБЛАДАЮЩИЙ КОМПЛЕКСОМ ФАКТОРОВ ПАТОГЕННОСТИ 1995
  • Габидуллин З.Г.
  • Гашимова Д.Т.
  • Мавзютов А.Р.
  • Булгаков А.К.
  • Суфияров Р.С.
  • Сибагатуллина А.Н.
RU2105808C1

Реферат патента 2007 года ШТАММ БАКТЕРИЙ Escherichia coli ГИСК № 281, ОБЛАДАЮЩИЙ СПОСОБНОСТЬЮ ПРОДУЦИРОВАТЬ ТЕРМОЛАБИЛЬНЫЙ ЛТ-ЭНТЕРОТОКСИН

Изобретение относится к биотехнологии. Штамм бактерий Esherichia coli №281 депонирован в коллекции Государственного научно-исследовательского института стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов им. Л.А.Тарасевича. Штамм обладает высокой способностью продуцировать термолабильный ЛТ-энтеротоксин и может быть использован для получения термолабильного энтеротоксина (ЛТ-энтеротоксина) и анатоксина Esherichia coli при производстве вакцин. 1 табл.

Формула изобретения RU 2 293 764 C1

Штамм бактерий Esherichia coli ГИСК №281, обладающий способностью продуцировать термолабильный ЛТ-энтеротоксин.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2007 года RU2293764C1

Штамм бактерий ЕSснеRIснIа coLI - продуцент термолабильного энтеротоксина 1989
  • Мартыненко Людмила Дмитриевна
  • Езепчук Юрий Васильевич
  • Алешукина Анна Валентиновна
  • Воронов Сергей Евгеньевич
SU1742322A1
ШТАММ БАКТЕРИЙ ESCHERICHIA COLI № РПМБ, ПРЕДНАЗНАЧЕННЫЙ ДЛЯ ЗАЩИТЫ ПУШНЫХ ЗВЕРЕЙ ОТ ТОКСИКОЗОВ, ВЫЗВАННЫХ ЭНТЕРОТОКСИНАМИ КИШЕЧНЫХ БАКТЕРИЙ 2003
  • Козловский Ю.Е.
  • Емельяненко П.А.
  • Плугина И.В.
  • Балакирев Н.А.
  • Тинаева Е.А.
  • Молчанова Н.В.
RU2250780C1
ШТАММ БАКТЕРИЙ ESCHERICHIA COLI КМ 148 - ПРОДУЦЕНТ ПРОТЕКТИВНЫХ АНТИГЕНОВ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ИММУНОПРОФИЛАКТИКИ КОЛИБАКТЕРИОЗА И ХОЛЕРЫ 2002
  • Смирнова Н.И.
  • Чеховская Г.В.
  • Ливанова Л.Ф.
  • Кобкова И.М.
RU2232189C1
US 2005136076 A, 23.06.2005
Путевое электрическое контактное устройство 1936
  • Логин М.И.
SU58476A1
CA 1188986 A, 18.06.1985
JP 60123428 A, 02.07.1985.

RU 2 293 764 C1

Авторы

Билалов Фаниль Салимович

Габидуллин Зайнулла Гайнуллович

Алсынбаев Махамат Махаматуллович

Туйгунов Марсель Маратович

Булгаков Айдар Казбекович

Гибазов Нуршат Нургарифанович

Мамбетова Эльмира Факиловна

Гашимова Динара Тимербаевна

Туйгунова Вера Георгиевна

Габидуллин Юлай Зайнуллович

Ахтариева Айгуль Атласовна

Даты

2007-02-20Публикация

2006-01-26Подача