СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ РИБОФЛАВИНА В ВОДНОМ РАСТВОРЕ Российский патент 2010 года по МПК G01N31/00 G01N33/00 B01D11/00 

Изобретение относится к аналитической химии, в частности к химии органических соединений, и может быть использовано при разработке способов извлечения и определения витаминов.

Техническая задача изобретения заключается в практически полном извлечении рибофлавина (витамин В₂) из водного раствора и его определении в водном концентрате УФ-спектрофотометрическим методом.

Для решения технической задачи изобретения разработан способ определения рибофлавина в водном растворе, характеризующийся тем, что готовят водно-солевой раствор рибофлавина, для чего навеску рибофлавина массой 1 мг помещают в мерную колбу вместимостью 100 см³, приливают 50 см³ дистиллированной воды и при перемешивании растворяют, к полученному раствору добавляют 40 г сульфата аммония, при перемешивании доводят до метки насыщенным раствором сульфата аммония, рибофлавин экстрагируют ацетоном квалификации х.ч., для этого к полученному раствору рибофлавина добавляют ацетон при соотношении объемов водно-солевого раствора рибофлавина и ацетона 5:1, экстрагируют до установления межфазного равновесия в течение 5-7 мин, после расслаивания системы водную фазу отделяют от органической и анализируют методом УФ-спектрофотометрии, строят градуировочный график зависимости оптической плотности водно-солевого раствора от концентрации рибофлавина, на УФ-спектрофотометре при длине волны 445 нм измеряют оптическую плотность водно-солевого раствора, по градуировочнсиму графику определяют концентрацию рибофлавина в водном растворе, затем из водно-солевого раствора повторно экстрагируют рибофлавин в тех же условиях, водную фазу отделяют и определяют содержание рибофлавина методом УФ-спектрофотометрии.

Технический результат заключается в практически полном (до 95,4%) двукратном извлечении рибофлавина из водного раствора и его последующем УФ-спектрофотометрическом определении в водном концентрате.

Предлагаемый способ определения рибофлавина в водном растворе осуществляют по следующей методике.

Готовят водно-солевой раствор рибофлавина, для чего навеску рибофлавина массой 1 мг помещают в мерную колбу вместимостью 100 см³, приливают 50 см³ дистиллированной воды и при перемешивании растворяют, к полученному раствору добавляют 40 г сульфата аммония, при перемешивании доводят до метки насыщенным раствором сульфата аммония, рибофлавин экстрагируют ацетоном квалификации х.ч., для этого к полученному раствору с рН 5,3±0,3 и концентрацией рибофлавина 0,01 мг/см³ добавляют ацетон при соотношении объемов водно-солевого раствора рибофлавина и ацетона 5:1, экстрагируют до установления межфазного равновесия в течение 5-7 мин, после расслаивания системы водную фазу отделяют от органической и анализируют методом УФ-спектрофотометрии, строят градуировочный график зависимости оптической плотности водно-солевого раствора от концентрации рибофлавина, на УФ-спектрофотометре при длине волны 445 нм измеряют оптическую плотность водно-солевого раствора, по градуировочному графику определяют концентрацию рибофлавина в водном растворе, коэффициент распределения (D_I) и степень извлечения рибофлавина после первой экстракции (R_I, %) рассчитывают по формулам:

где с₀ и с_в - концентрации рибофлавина в органической и водной фазах; f - соотношение объемов равновесных водной и органической фаз.

В органическую фазу переходит 79% рибофлавина от его исходного содержания в анализируемом растворе, затем из водно-солевого раствора повторно экстрагируют рибофлавин в тех же условиях, водную фазу отделяют и определяют содержание рибофлавина методом УФ-спектрофотометрии, степень извлечения рибофлавина после двукратной экстракции (R_общ, %) рассчитывают по формуле:

где R_II - степень извлечения рибофлавина после второй экстракции, рассчитанная по приведенной формуле.

В органическую фазу переходит 95,4% рибофлавина от его исходного содержания в анализируемом растворе.

Осуществление способа иллюстрируется следующим примером.

Пример. Готовят водно-солевой раствор рибофлавина, для чего навеску рибофлавина массой 1 мг помещают в мерную колбу вместимостью 100 см³, приливают 50 см³ дистиллированной воды и при перемешивании растворяют, к полученному раствору добавляют 40 г сульфата аммония, при перемешивании доводят до метки насыщенным раствором сульфата аммония, рибофлавин экстрагируют ацетоном квалификации х.ч., для этого к полученному раствору с рН 5,3±03 и концентрацией рибофлавина 0,01 мг/см³ добавляют ацетон при соотношении объемов водно-солевого раствора рибофлавина и ацетона 5:1, экстрагируют до установления межфазного равновесия в течение 5 мин, после расслаивания системы (2 мин) водную фазу отделяют от органической и анализируют методом УФ-спектрофотометрии, строят градуировочный график зависимости оптической плотности водно-солевого раствора от концентрации рибофлавина, на УФ-спектрофотометре Shimadzu UV mini - 1240 в кварцевой кювете (1=1 см) при длине волны 445 нм измеряют оптическую плотность водно-солевого раствора, по градуировочному графику определяют концентрацию рибофлавина в водном растворе, коэффициент распределения (D_I) и степень извлечения рибофлавина после первой экстракции (R_I, %) рассчитывают по формулам:

где С₀ и с_в - концентрации рибофлавина в органической и водной фазах; f - соотношение объемов равновесных водной и органической фаз.

В органическую фазу переходит 79% рибофлавина от его исходного содержания в анализируемом растворе, затем из водно-солевого раствора повторно экстрагируют рибофлавин в тех же условиях, водную фазу отделяют и определяют содержание рибофлавина методом УФ-спектрофотометрии, степень извлечения рибофлавина после двукратной экстракции (R_общ, %) рассчитывают по формуле:

где R_II - степень извлечения рибофлавина после второй экстракции, рассчитанная по приведенной формуле.

В органическую фазу переходит 95,4% рибофлавина от его исходного содержания в анализируемом растворе, способ выполним.

Как видно из примера, достигается практически полное (до 95,4%) двукратное извлечение рибофлавина ацетоном при соотношении объемов водно-солевого раствора и ацетона 5:1 и использовании в качестве высаливателя сульфата аммония.

Если использовать водно-солевые растворы рибофлавина, приготовленные с другим высаливателем или с предложенным высаливателем другой концентрации, применять другие экстрагенты и соотношения объемов фаз водно-солевого раствора рибофлавина и ацетона, например 10:1, то степень извлечения не достигнет 95,4%.

Предложенный способ определения рибофлавина в водном растворе позволяет практически полностью извлекать рибофлавин (до 95,4%), определять рибофлавин в водном концентрате УФ-спектрофотометрическим методом и может быть применен при разработке способов извлечения и определения витаминов.

Аналоги не обнаружены.

Изобретение относится к аналитической химии органических соединений применительно к извлечению и определению витаминов. Способ характеризуется тем, что готовят водно-солевой раствор рибофлавина, для чего навеску рибофлавина массой 1 мг помещают в мерную колбу вместимостью 100 см³, приливают 50 см³ дистиллированной воды и при перемешивании растворяют, к полученному раствору добавляют 40 г сульфата аммония, при перемешивании доводят до метки насыщенным раствором сульфата аммония, рибофлавин экстрагируют ацетоном квалификации х.ч., для этого к полученному раствору рибофлавина добавляют ацетон при соотношении объемов водно-солевого раствора рибофлавина и ацетона 5:1, экстрагируют до установления межфазного равновесия в течение 5-7 мин, после расслаивания системы водную фазу отделяют от органической и анализируют методом УФ-спектрометрии, строят градуировочный график зависимости оптической плотности водно-солевого раствора от концентрации рибофлавина, на УФ-спектрофотометре при длине волны 445 нм измеряют оптическую плотность водно-солевого раствора, по градуировочному графику определяют концентрацию рибофлавина в водном растворе, затем из водно-солевого раствора повторно экстрагируют рибофлавин в тех же условиях, водную фазу отделяют и определяют содержание рибофлавина методом УФ-спектрометрии. Достигается повышение надежности анализа.

Способ определения рибофлавина в водном растворе, характеризующийся тем, что готовят водно-солевой раствор рибофлавина, для чего навеску рибофлавина массой 1 мг помещают в мерную колбу вместимостью 100 см³, приливают 50 см³ дистиллированной воды и при перемешивании растворяют, к полученному раствору добавляют 40 г сульфата аммония, при перемешивании доводят до метки насыщенным раствором сульфата аммония, рибофлавин экстрагируют ацетоном квалификации х.ч., для этого к полученному раствору рибофлавина добавляют ацетон при соотношении объемов водно-солевого раствора рибофлавина и ацетона 5:1, экстрагируют до установления межфазного равновесия в течение 5-7 мин, после расслаивания системы водную фазу отделяют от органической и анализируют методом УФ-спектрометрии, строят градуировочный график зависимости оптической плотности водно-солевого раствора от концентрации рибофлавина, на УФ-спектрофотометре при длине волны 445 нм измеряют оптическую плотность водно-солевого раствора, по градуировочному графику определяют концентрацию рибофлавина в водном растворе, затем из водно-солевого раствора повторно экстрагируют рибофлавин в тех же условиях, водную фазу отделяют и определяют содержание рибофлавина методом УФ-спектрометрии.