Изобретение относится к области органической химии, а именно к применению индивидуальных соединений класса карбоновых кислот, в которых амино- и карбоксильная группы присоединены к одной и той же ациклической углеродной цепи, в качестве средств, обладающих противомикробной и противогрибковой активностями, которые могут быть использованы в качестве исходных продуктов для синтеза новых гетероциклических систем и в фармакологии.
Заявленное соединение 2-(2-карбамоилгидразоно)-4-оксо-4-фенилбутановая кислота и способ его синтеза известны из уровня техники. Заявленное соединение является продуктом взаимодействия 2,4-диоксо-4-фенилбутановой кислоты с семикарбазидом (E. Cattelain, P.Chabrier. Bull. Soc. Chim. Fr., 1098 (1947)), образующимся по следующей схеме:
Противомикробная и противогрибковая активности 2-(2-карбамоилгидразоно)-4-оксо-4-фенилбутановая кислоты ранее не были исследованы.
Задачей изобретения является изыскание новых соединений, обладающих противомикробной и противогрибковой активностью, и расширение арсенала средств воздействия на живой организм.
Поставленная задача решается тем, что соединение 2-(2-карбамотиоилгидразоно)-4-оксо-4-(4-толил)бутановая кислота проявляет высокую противомикробную активность в концентрации 500-1000 мкг/мл в отношении культур S. aureus, Е. coli и противогрибковой активностью в отношении культуры С.albicans в концентрации 500-1000 мкг/мл.
Синтезируют заявляемое соединение путем взаимодействия 2,4-диоксо-4-(4-толил)бутановой кислоты с тиосемикарбазидом в среде растворителя с последующим выделением целевого продукта по следующей схеме:
Процесс ведут при температуре 80-81°С, а в качестве растворителя используют бензол.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1. 2-(2-Карбамотиоилгидразоно)-4-оксо-4-(4-толил)бутановая кислота (4).
К раствору 0.024 моль 2,4-диоксо-4-(4-толил)бутановой кислоты (3) в 50 мл бензола добавляли 0.024 моль тиосемикарбазида, кипятили 5 часов, охлаждали, перекристаллизовывали из бутилацетата. Выход 86%, т.пл. 251-253°С. Соединение (4) C12H13N3O3S.
Найдено, %: С 51.52; Н 4.83; N 15.07
Вычислено, %: С 51.60; Н 4.69; N 15.04.
Соединение (4) - светло-оранжевое высокоплавкое кристаллическое вещество, растворимое в ДМСО, ДМФА, ацетоне, этилацетате, ацетонитриле, спиртах, труднорастворимое в хлороформе, толуоле и ароматических углеводородах, нерастворимое в алканах и воде. Устойчиво при хранении в обычных условиях.
В ИК спектре соединения (4), записанном в виде пасты в вазелиновом масле, присутствуют полосы валентных колебаний группы ОН в виде узкого пика при 3410 см-1, группы NH2 в виде двух пиков при 3303 и 3273 см-1, группы NH в виде узкого пика при 3194 см-1, карбонила карбоксильной группы при 1663 см-1 и ароильной карбонильной группы при 1607 см-1.
В спектре ЯМР 1Н соединения (4), записанном в растворе в ДМСО-d6, кроме сигналов четырех протонов ароматического кольца, присутствует синглет трех протонов метильной группы при 2.40 м.д., синглет двух протонов метиленовой группы при 4.53 м.д., синглеты двух протонов группы NH2 при 8.62 м.д. и при 8.74 м.д., синглет протона группы NH при 11.22 м.д, уширенный синглет протона карбоксильной группы СООН при 12.20 м.д.
Пример 2. Фармакологическое исследование соединения (4) на наличие противомикробной активности.
Для исследований использовали общепринятый метод двукратных серийных разведений в жидкой питательной среде микрометодом [Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ - М.: И-во Медицина, 2005]. Готовили исходные разведения микроорганизмов в физиологическом растворе из суточной агаровой культуры по оптическому стандарту мутности (ОСМ) на 5 ME с использованием денситометра. После ряда разведений конечная концентрация клеток в опыте составляла 2,5×105 клеток/мл.
Противомикробные свойства химического вещества изучали на 3-х коллекционных условно-патогенных штаммах микроорганизмов: Staphylococcus aureus (АТСС 25923), Escherichia coli (АТСС 25922), Candida albicans (РКПГУ 1353/1277), полученных в ФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Минздравсоцразвития России. Факт ингибирования (торможения роста) микробных клеток в разведениях препаратов отмечали после 20-ти часового термостатирования при 37°С. Окончательные результаты фиксировали через 7 суток после высева на скошенный агар РПА. Максимально испытанная концентрация соединений соответствовала 1000,0 мкг/мл. Противомикробную (ингибирующую, бактерицидную) активность оценивали по минимально действующей концентрации.
Анализ полученных данных показал:
• соединение 4 обладает ингибирующим действием в отношении культуры S. aureus в концентрации 500 мкг/мл, гибель наступает от концентрации в 1000 мкг/мл, а также ингибирующим действием в отношении культуры Е. coli в концентрации 1000,0 мкг/мл и С.albicans в концентрации 500,0 мкг/мл, гибель наступает от концентрации в 1000 мкг/мл; 
Предлагаемое вещество 2-(2-карбамотиоилгидразоно)-4-оксо-4-(4-толил)бутановая кислота (4) обладает фармакологической активностью, а именно противомикробной активностью в отношении культур S. aureus, Е. coli и противогрибковой активностью в отношении культуры С.albicans, и может найти применение в фармакологии в качестве потенциального лекарственного средства.
Изобретение относится к области химии и фармацевтики и раскрывает применение 2-(2-карбамотиоилгидразоно)-4-оксо-4-(4-толил)бутановой кислоты формулы в качестве средства, обладающего противомикробной активностью в отношении культур S. aureus, E. coli и противогрибковой активностью в отношении культуры C. albicans. 1 табл., 2 пр.
Применение 2-(2-карбамотиоилгидразоно)-4-оксо-4-(4-толил)бутановой кислоты формулы
в качестве средства, обладающего противомикробной активностью в отношении культур S. aureus, E. coli и противогрибковой активностью в отношении культуры C. albicans.
