Способ определения цис и трансизомеров метилстильбенов при их совместном присутствии в смеси Советский патент 1984 года по МПК G01N31/08 

00

01

: Изобретение относится к способсил анализа метилстильбенов, а именно 1-фенил-2(4-метилфенил) этилена f4-метилстильбена) (1) и 1,2-бис-(4-метилфенил этилена 4, -диметилстильбена(П), и может быть использовано для контроля частоты изомеров и в целях разделения метилпроизводных стильбенов в цис- и трансформе. Проблема анализа, разделения и очистки изомеров такого типа важна и для получения более активных форм ряда лекарственных соединений. Известен способ определения нена сыщенных соединений, основанный на окислении их перманганатом калия в неводной среде ij . Однако данный способ приводит к необратимой деструкции ненасыщенных соединений, так как при этом происходит окисление их до органических кислот и других продуктов окисления, и не позволяет различать цис- и трансизомеры. Наиболее близким к изобретению по технической сущности является способ определения ненасыщенных соединений в виде молекулярных компле сов с тетрацианхинодиметаном, заключающийся в растворении анешизируемого ненасыщенного соединения в трихлорзтилене, добавлении комплексообразукщего реагента, в качестве которого используют тетрацианхинодиметан в ацетонитриле, разбавлении трихлорэтиленом с последующим измерением оптической плотности полученного окрашенного,раствора 2 . Однако в известном способе циси трансизомеры оказываются неразлич ными. Целью изобретения является повышение селективности способа и возмо ность количественного определения и дивидуальных цис- и трансизомеров метилстилбенов. Поставленная цель достигается те что согласно способу, заключающемус в том, что анализируемую пробу растворяют в гексане с последующим тон кослойным хроматографированием в системе петролейный эфир-бензол, об работкой полученной хроматограммы 0,025-0,05 М раствором хлоранила в бензоле, раздельным экстрагирование полученных окрашенных комплексов ге саном и упариванием экстрактов. Предлагаемый способ основан на образовании комплексов переноса заряда олефина с хлоранилом, отличающихся между собой по окраске. Разли чие значений Ri для цис- и трансизомеров метилстильбена повышает селек тивность способа и дает возможност количественно определять эти изомер Пример 1. Приготавливакгг р твор в гексане смеси цис- и трансиз мера 4-метилстильбена в гексане с содержанием 45 мг в мл Со,24 М) . Готовят смесь растворителей: петролейный эфир-бензол (19:1 по объему). В хроматографическую камеру наливают 4 мл этой смеси. На пластину с силикагелем Силуфол в размером 5x14,5 см на расстоянии 1 см от нижнего края отмечают стартовую линию и на нее наносят микропипёткой или микрошприцем 0,24 М раствор смеси цис- и трансметилстильбенов. Пластину помещают в камеру с растворителем. После поднятия растворителя на 10 см пластину вынимают, быстро отмечают границу фронта растворителя и оставляют на воздухе для испарения растворителя. Через 1-2 мин пластину обрабатывают раствором хлоранила в бензоле(О,25 М раствор : 0,3 г хлоранила растворяют в 50 мл бензола, распыляя его пульверизатором под давлением сжатого воздуха. Разделенные изомеры практически мгновенно окрашиваются: трансметилстильбен в синий цвет (к 0,40),цисметилстильбен в фиолетовый цвет (к 0,52). Проявленные полосы комллексов изомеров удаляют раздельно с пластины путем соскребания на фильтры, промывают 3-4 раза гексаном порциями по 5 мл.. Растворы упаривают, получают 17 мг транс- и 26 мг цисизомеров. Выделенные соединения вновь хроматографируют в описанных условиях.При повторном хроматографировании обнаружили в приемнике с цисизомером наличие вещества с Rf 0,52, окрашиваю егося в фиолетовый цвет, в приемнике с трансизомером - наличие вещества с R 0,40, окрашивающегося в синий цвет. Пример 2. Приготавливают раствор в гексане смеси цис- и транс4,4-диметилстильбена (1:1, содержащий 0,1 мг вещества в 1 мл. В хроматографическую камеру наливают 4 мл гексана. На пластину с силикагелем Силуфол IJV 254 размером 5x14,5 см на расстоянии 1 см от нижнего края отмечают стартовую линию и наносят микропипеткой или микрошприцем раствор смеси 0,001 мл, т.е. на стартовую точку наносят 0,0001 мг смеси изомеров. Пластину помещают в камеру с растворителем. После поднятия растворителя на 10 см пластину вынимают, быстро отмечают границу фронта и оставляют для высыхания. Через 1-2 мин пластину обрабатывают раствором хлоранила в бензоле (о,05 М : 0,6 г хлоранила растворяют в 50 мл бензола), распыляя его пульверизатором под давлением сжатого воздуха. Практически мгновенно проявляются разделенные изомеры в,виде окрашенных пятен: транс-4,4-диметил,стильбен голубого цвета В| 0,42) , цис-4, 4гДиметилстильбен зеленого Цвета (к 0,52). Проявление пятна изомеров удаляют с пластины раздельно путем соскабливания на фильтры, промывают 3-4 раза гексаном по 5 мл, раствору упаривают, .получают 0,049 мг транс- и 0,049 мг цисизомеров. Для проверки индивидуальности полученных веществ в остатках после упаривания проводят ftoвторное хроматографирование. Оно показывает наличие индивидуальных соединений, имекщих .(для

трансизомера) и 0,52 (Ц1я цисизомера). С переносом заряда в избытке растворителя разрушается и хроматографируются только чиахые изомеры, которые вновь проявляются при опрыскивании раствором хлоранила, давая окрашенные комплексы.

Метрологические характеристики способа приведены в таблице.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет как качественно, так .к количественно, определять цис- и трансизомеры алкилстильбена. Предел обнаружения (1-1,6).

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЦИС- И ТРАНСИЗОМЕРОВ МЕТИЛСТИЛЬБЕНОВ ПРИ ИХ СОВМЕСТНОМ ПРИСУТСТВИИ В СМЕСИ С использованием обработки раствора анализируемой пробы комплексообразующим реагентом, отлич ающ и и с я тем, что, с целью повышения селективности и возможности кодрчественного.определения индивидуальных ЦИС- и трансизомеров метилстильбенов, анализируемую пробу растворяют в гексане с последующим тонкослойным хроматографированием в системе петролейный эфир-бензол, обработкой полученной хроматограммы 0,025-0,05 М раствором хлоранила Q в бензоле, раздельным экстрагиро- S ванием полученных окрашенных комплек сов гексаном и упариванием экстрактов.

2,34.10 2,50.10 Примечание,

2,29-10 0,15.10-2 (2,29i:o,19). 2,44-10 2 0,27. (2,4410,33)-10 х-среднее значение содержания анализируемого вещества из 5 определений, S - стандартное, отклонение п - число определений (5), PC - надежность (0,95); t, k - коэффициент нормированных отклонений (Стьюдента) (2, xi Epf, - доверительный интервал определяемой величины; к - число степеней свободы.