Способ получения макролидных соединений Советский патент 1988 года по МПК C07D313/00 C07D309/36 C07D315/00 

Изобретение относится к способу получения макрояидных соединений общей формулы

R, где А п ОН п.- у

( ОН М

CHjRi

октагидроазоцин-1-ил, 4-фенш1Пи- перидин-1-ил, гексагидроазепин-1-ил, 1-азаспиро(4,5)дец-1-ил, 1,2,3,4-тет рагидрохинолин-1-ил, 1 ,2,3,4-тетра-.- гидроизохинолин-2-ил, 1,2,3,6-тетра- гидропиридин-1-ил, пирролидин-I-ил, азациклотридецин-1-ил, 3-азабицикло- (3,2,2)-нон-3-ил, 1,3,3-тpимeтил-6- aзaбициклo(3,2, 1)окт-6-ил, цис,- и транс-3,5-диметилпиперидин-1-ил, RI - водород, гидроксил или микаро- зилокси

2 Щ

Тсн. -о-ч -он

а

НО- 0снзО оси.

сн

SvO

или .,

обладающих антимикробной активностью.

Целью изобретения является разра- ботка способа получения новых макро- лидных соединений с повышенной антимикробной активностью.

Пример 5. 20-ДН-ДО-20-(Гексагидроазепин- 1 -ил) десмикозин 20- ДН-ДО-20 - здесь и далее обозначает 20 - дигидро-20-дезокси-; десмикозин- ACHjCHO, где R, - микарозилокси

RI - ь.

Десмикозин (10 г, 13 ммоль), растворенный в безводном метаноле 100 мл быстро добавляют к раствору цианбор- гидрида натрия (3,3 г, 52 ммоль) и гексаметиленимина (6,5 г, 7,5 мл, 65 ммоль) в безводном метаноле ( 50 мл) в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивают в атмосфере азота при комнатной температуре в течение приблизительно 3 ч, а затем выпаривают

io

15

20 25

30

35

Q

д,

0

5

при пониженном давлении. Полученный остаток растворяют в метиленхлориде ровно с таким количеством зтилацета- та, чтобы растворить остаток и этот раствор экстрагируют насыщенным раствором бикарбоната натрия. Органический слой о-тделяют, сушат над сульфатом натрия, выпаривают при пониженном давлении и получают светло-желтую пену. Эту пену очищают методом хроматографии на силикагеле, элюи- руют сначала метиленхлоридом (1 л), затем ступенчато 500-мл порциями смеси метиленхлорид/метанол в соотношениях: 98: 2; 96: 4; 94: 6; 92: 8 и 9: I ив - завершение, смесями метиленхлорид (метанол) гидроксид аммония в соотношениях: 90: 10:0,5(500 мл) и 75: :25:0,5 М (2 л). Фракции, содержащие требуемьй продукт, идентифицируют методом ТСХ, соединяют и выпаривают досуха. Получают 6,035 г (7,07 ммоль) 20-ДН-ДО-20 (гексагидроазепин-I-ил) десмикозина в виде белой пены. Другие фракции, которые содержат нечистый продукт соединяют, повторно растворяют в метиленхлориде, снова экстрагируют насьш1енным раствором бикарбоната натрия и очищают, как ранее с применением силикательной колонки с насадкой метиленхлорид/метанол (9:1) и элюированием метиленхлорид/метанол/ гидроксид аммония в следующих соотношениях: 90:10:0,5 (500 мл) и 80:20: :0,5 (1 л). Получают дополнительно 1,372 г (1,61 ммоль) продукта. Общий выход 20-ДН-ДО-20 - (гексагидроазепин- 1-ил) десмикозина 7,407 г (8,68 ммоль, 67%).

Пример 2. 20-ДН-ДС-4-(4-Фе- нш1Пиперидин-1-ил) десмикозин.

Десмикозин (1,5 г, 2 ммоль) растворяют в абсолютном метаноле /60 мл и обрабатывают 4-фенилпиперидином (640 мг, 4 ммоль) в присутствии молярного сита Linde 4А. Через 30 мин добавляют NaBHjCN (500 мл, 8 ммоль); и смесь перемешивают в течение 2,5 -ч при комнатной температуре. Смесь выливают в насыщенный раствор бикарбоната натрия (200 мл) и эктрагируют метиленхлоридом (3x200 мл). Соединенные экстракты сушат над сульфатом- натрия, фильтруют и вьтаривают при пониженном давлении. Остаток (3,6 г) очищают методом экспрессхроматогра- фин на силикагеле, элюируя градиентом от 1 л метиленхлорида до 1 л МРтанола/метиленхлорид (5:95), затем 1 л метанол/метиленхлорид (5:95). Фракции, содержащие требуемый про-., дукт, идентифицируют при помощи ТСХ соединяют и выпаривают досуха, получают 680 мг 20-ДН-ДО-20- 4-фенилпипе- ридин-1-ил десмикозина.

Пример 3. 20-рН-ДО-20-(Гек- сагидроазепин -1-ил)-4 -дезоксидесми -

КОЗИН.

Раствор 4-дезоксидесмикозина (565 мг, 0,75 ммоль) в метаноле (15 мл) в атмосфере аргона перемешивают с активированным молекулярным ситом Linde ЗА 2,2 г в течение 30 мин, затем до.бавляют гексаметилен- имин (0,25 мл, 2,25 ммоль). Через 1 ч к реакционной смеси добавляют ; цианборгидрид натрия (141 мг, 2,25 ммоль). Через 45 мин реакционную смесь выливают в насыщенный раствор бикарбоната натрия и экстрагируют этилацетатом. Соединенные органичес-} кие экстракты встряхивают с насыщен- ным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом натрия, фильтруют, выпаривают и получают 600 мл сырого продукта. Этот продукт очищают методом препаративной тонкослойной хро- матографии на силикагеле, элюируют смесью дихлорметан (метанол) концентрированный гидроксид аммония (90:15:, :2) и получают 150 мл (выход 24%) 20-ДН-ДО-20 - (гексагидроазепйн-1- ил)-4, -дезоксидесмикозина.

Пример 4. 20-ДН-ДО-20 - (Ок тагидроазоцин-1-ил)десмикозин.

Десмикозин (4,0 г, 5,2 ммоль) растворяют в абсолютном метаноле (30 мл) и обрабатывают гептаметилен- имином (1,2 г, 1,3 мл, 10,4 ммоль) и присутствии молекулярного сита ЗА. После окончания реакции смесь перемешивают в течение 1 ч при комнатной температуре, затем быстро пипеткой , приливают раствор боргидрнда натрия (60 мг, 1,6 ммоль) в абсолютном метаноле- (10 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение 1,5, ч при ком- натной температуре, затем добавляют еще 30 мг боргидрида натрия (одну порцию в виде твердого вещества). Реакционную смесь перемешивают еще в течение 75 мин и затем фильтруют. Фильтрат выпаривают при пониженном давлении. Остаток растворяют в этил ацетате (150 мл) и этот раствор экс- траг ируют водой (150 мл) и насыщен

о

л -

5

5

ным раствором бикарбоната натрия (100 мл). Потом этилацетатньй раст- вор экстрагируют 0,5 М буферным раствором (150 мл) NaHiP04 с рН 6,5. Буферньш экстракт зыпаривают в вакууме для удаления оставшегося этилаце- тата и затем быстро перемешивают при медленном добавлении 5 н.едкого натра, получают густой белый осадок. Белое твердое вещество удаляют фильтрованием, сушат и получают 3,55 г 20-ДН-ДО-20 - (октагидроазопин-1-ил) десмикозина.

Пример 5. 20-ДН-ДО-20 - (1- Азаспиро)4,5-(декан-1-ил)десмикозин.

Десмикозин (5,0 г, 6,5 ммоль) растворяют в абсолютном метаноле (50мл) и обрабатывают 1-азаспиро(4,-5)дека-, ном 31,36 г, 9,8 ммоль в присутствии молекулярного сита ЗА. Через 15 мин добавляют (620 мл,9,8ммоль) и смесь перемешивают в течение 17 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь фильтруют и фильтрат выпаривают при пониженном давлении. Остаток растворяют в этилацетате (300 мл) и экстрагируют водой (300 мл и 100 мл). Затем продукт экстрагируют из этилацетатного раствора с буфером 0,5 М NaH2P04 с рН 6,5 (300 и 100 мл). Фосфатные буферные экстракты соединяют и выпаривают в вакууме для удаления оставшегося этил- ацеп ата. Затем фосфатный буферный раствор быстро перемепшвают при медленном добавлении 5 н. едкого натра и получают густой белый осадок. Белое твердое вещество отделяют фильтрованием, промывают водой, сушат и получают 20-ДН-ДО-20 - (1-азаспиро) 4,5-(декан-1-ил)десмикозин (3,52 г).

Пример 6. 20-ДН-ДО-20-(1,2, 3,4-Тетрагидрохинолин-1-ил}десмико- .

ЗИН.

Десмикозин (11,6 г, 15 ммоль) растворяют в сухом метаноле (100 мл) и добавляют 1,2,3,4-тетрагидрохинолин (3,8 мл, 30 ммоль). Смесь перемешивают при комнатной температуре в тече-. ние -30 мин, а затем добавляют цианборгидрид натрия (1,25 г, 20 ммоль). Смесь перемешивают в течение ночи, после чего выпаривают при пониженном давлении. Остаток распределяют между .этилацетатом и водой (по 100 мл каждого) . Органический слой экстрагируют последовательно водным фосфатным буфером с рН 6,5- (100 мл) и водным фос513

фатным буфером с рН.4,5 (100 мл). Этилацетатный слой сушат над сульфатом натрия, фильтруют и вьщаривают, остаток ( г) отделяют методом хромато- графин на еиликагеле. Колонку элюи- руют при линейном градиенте дихлорме- тана (4 л) и 5% метанола плюс 0,5% концентрированного гидроксида аммония в дихлорпетане (4 л). Фракции, содержащие требуемый продукт, идентифицируют методом тех, собирают, вьшари- вают досуха и получают 3,4 г указанного в заглавии соединения.

Пример. 20-ДН-ДО-26 - (1, 2,3,4 - Тетрагидроизохинолин-2-нл) десмикозин.

Десмикозин (11,6 г, 15 ммоль) растворяют, в сухом метаноле (100 мл) и добавляют 1,2,3,4 - тетрагидроизохи- нолин (3,8 мл, 30 ммоль).. После neper мешивания смеси в течение 30 мин при комнатной температуре добавляют ци- аноборгидрид натрия (1,25 г, 20ммоль) Смесь перемешивают в течение ночи, а затем вьшаривают при пониженном давлении. Остаток распределяют между этилацетатом и водой (по 150 мл каждого). Потом органический слой экстрагируют последовательно фосфатным буфером, с рН 6,5 (100 мл) и фосфатным буфером с рН 4,5 (100 мя). Экстракт фосфатного буфера с рН 4,5 выпаривают при пониженном давлении для удаления этилацетата, после чего рН доводят до 10 путем добавления 5 н.

356

гидроксида натрия. Выпавший осадок собирают, сушат йа воздухе и получают 5,6 г указанного в заглавии соединения.

Примере. 20-ДН-ДО-20 - (l, 2,3,6 - Тетрагидропиридин-1-ил)десмикозин,

Десмикозин (11,6 г, 15 ммоль) растворяют в безводном метаноле (I00 мл) и добавляют 1,2,3,6 - тетра- гидропиридин (2,8 мл, 30 ммоль), Пос: ле перемешивания в смеси в течение 30 мин при комнатной температуре добавляют цианборгидрид натрия (1,25 f 20 ммоль). Смесь перемешивают в течение ночи, затем выпаривают при пониженном давлении. Остаток растворяют . в этилацетате (150 мл). Этот раствор экстрагируют водой (150 мл), потом водным фосфатным буфером с рН 6,5 (2x100 мл). Буферные растворы вьша- ривают отдельно при пониженном давлении для удаления этилацетата, затем доводят рН до 10 путем добавления 5 н.гидроксида натрия. Образовавшиеся осадки собирают фильтрованием, сушат на воздухе и получают 5,4 г (первый экстракт) и 3,2 г (второй экстракт) указанного в заглавии соединения.

Другие соединения получены аналогичным образом. Значения заместителей R - R и физико-химические свойства полученньйс соединений представлены в табл.1.

111375

Испытания антимикробной активности. Антимикробную активность исследовали in vivo по отношению к экспериментально вызванным инфекциям у - подопытных животных. Значения ЭД (доза в мг/кг, обеспечива.ют,ая защиту 50%-.животных) для мьшей, зараженных Stuptococcua Pyogenes С203 приведены в табл.2. Для сравнения даны данные Q для известного препарата - деамико- зина.

Таблица 2

3512

инфекции Pasteurella у цьтлят, зараженных подкожным введением 0,1 мл 10 - разбавленной триптоз-бульон- ной культуры бактерии. В этом случае без введения препарата количество смертей составило 100% (Ю смертей на 10 обработанных цьшлят) в течение 24 ч. В опытах препараты вводили подкожно в дозе 30 мг/кг через 1 и 4 ч после заражения, либо в виде водного раствора (2 г/галлон ) за 4-20 ч до разражения и в течение 3 дней после. Результаты испытаний приведены в

Изобретение касается замещенных лактонов, в частности получения соединений общей формулы , где R - октагндроазоцин-1-ил; 4 -фенилпи- перидин-1-ил; гексагидрразепин-1-ил; 1 -азаспиро (4,5) дец-1 1,2,3,4-тет- рагйдрохинолин-1-ил; 1,2,3,4-тетра- гидроизохинолин-2-ил; 1 ,2,3,4-тетра- гидропиридин-1-ил; пирролидин-1-ил; азациклотридецин-1-ил; 3-азабицикло .

Проверку антимикробной активности по отношению к отрицательным бакте- риям провели in vivo по отношению к

55 17 - 94,5 мг/кг. Как видно из данных табл. 2 и 3, эффективность соединений 1-19 в оптимальных условиях значительно вьше, чем у известного пре1313751

парата (соединения 15, 17 и 18 в табл.2 при подкожном введении, все соединения в табл.2 при оральном введении, соединения 5, 7, И, 12, 13, . 14, 16 в табл.3). Таким образом, предлагаемые соединения обеспечивают повьшение антимикробной активности.

Формула изобретения д

Способ получения макролидных соединений общей формулы

ACHjCHjR,

где -А -

п он 0--V-C

.

CHjft

R - октагидроазоцин-1-ил, 4-фенил- пиперидин-1-ил, гексагидроазепин-1- ил, 1-азаспиро(4,5)дец-1-йл, 1,2,3,4- тетрагидрохинолин-1-ил, 1,2,3,4-тет- рагидроизохинолйн-2-ил, 1,2,3,6-тет- рагидропиридин-1-ил, пирролидин-1- ил, азациклотридецин-1-ил, 3-азаби- цикло(3,2,2)-нон-3-ил, 1,3,3-триме351А

тил-6-азабицикло(3,2,1)окт-6-ил, цис- И транс-3,5-диметилпиперидин-1-ил,

R - водород, гидроксил или мика- розилокси .

г

-оЧ VoH

.

или

20

о тлич ающийс я тем, что осуществляют восстановление альдегида формулы

ACHjCH

О,

где А имеет указанные значения, боргидридом натрия или цианборгидри- дом натрия в присутствии амина общей формулы

RH,

где R имеет указанные значения, в среде С,-С4. - алканоила при комнатной температуре.