Способ определения реакции больного аллергическим заболеванием на неспецифические раздражители Советский патент 1988 года по МПК A61B10/00 

со

00

о со ю

Изобретение относится к медицине, а именно к аллергологии.

Цель изобретения - повышение точности определения.

Способ осуществляют следующим образом.

Утром натощак у больного из вены отбирают 3 мл крови в гепаринизи- ропанную пробирку. Из крови выделяют лимфоциты на градиенте плотности фиколл-верографин 1,07/. Лимфоциты промывают 2 раза физраствором и 2 раза раствором Хенкса путем центрифугирования при 1500 об/мин в течение 15 мин. После последнего центрифугирования Jшмфoциты разбавляют средо1 1 199 до концентрации 1 10 клеток в 1 мл. По 0,2 мл взвеси лимфоцитов разносят в три центрифужные пробирки, В первую пробирку добавляют 0,05 мл физраствора (ФР), во вторую пробирку - 0,05 мл 0,001%-но- го раствора ацетилхолина (АХ) на физрастворе, в третью пробирку - 0,03 мл 0,0001%-ного раствора гнет- амина (ГЛ) на физрастворе. Инкубируют все три пробирки в термостате при 37 С в течение 30 мин. После окончания срока инкубапли добавляют во все пробирки по 2 мкл 1 М раствора 1-метоксибензантрона и измеряют интенсивность свечения лимфоцитов во всех пробах с помощью проточного

цитофлуориметра. Возбуждение лю Qlнec- ценции проводят лучами с 400- 460 ни, регистрируют люминесценцию не менее 10000 клеток в области спектра 490-650 нм. Подсчитывают

среднеарифметическую интенсивность люминесценции лимфоцитов в пробе, инкубированной с ФР, В пробах, инкубированных с ФР, АХ и ГА, считают количество лимфоцитов, имеющих интенсивность люминесценции 0,501,90 от средней интенсивности люминесценции лимфоцитов, инкубированных с ФР, При увеличении числа лимфоцитов с такой интенсивностью свечения

в пробах с АХ и/или ГА по сравнению с пробой с ФР на 10% и более диагностируют повышенную чувствительность больного к неспецифическим раздражителям.

Сравнительная точность определения реакции больных аллергнческиьш заболеваниями на неспецифические раздражители с помощью известных и предлагаемого способов представлена в таблице.

Изобретение относится к медицине, точнее к аллергологии, предназначено для определения реакции больного аллергическим заболеванием на неспецифические раздражители. Цель изобретения - повьппение точности определения путем измерения интенсивности люминесценции лимфоцитов под влиянием мембранного зонда 3-метоксибензантрона после инкубации лимфоцитов с растворами ацетилхоли- на (АХ), гистаьшна (ГА) и физраствора (ФР). Сопоставляют число лимфоцитов, имеющих интенсивность люминесценции 0,50-1,90 от средней интенсивности люминесценции лимфоцитов в ФР, в пробах, «нкубированных с АХ, ГА и ФР, и при увеличении числа лим- фо1Ц1тов в пробах с АХ и ГА по сравнению с ФР на 10% и более диагностируют повышенную чувствительность больного к АХ или ГА. 1 табл. с « (Л

32 (66,7%) 23 (47,9%)

46 (95,8%)

О

6 (23%)

О

О О

Из таблицы пидно, что точность определения реакции больных аллергическими заболеваниями на неспецифические раздражители предлаг аемым способом повышается в 1,5-2 раза по сравнению с известными способами о

Формула изобретения

Способ определения реакции больного аллергическим заболеванием на неспецифические раздражители путем вьщеления из крови форменного элемента, инкубации его в отдельных про- бак физиологическим раствором и веществами, влияющими на функции форменного злемента, с последующим введением в пробы люминесцентного

красителя и определения интенсивности люминесценции, отличающийся тем, что; с целью повышения точности определения, в качестве форменного элемента используют лимфоциты, инкубируют их в пробах с ацетилхолином (АХ) и гистамином (ГЛ), в качестве люминесцентного красителя используют 3-метоксибензантрон, определяют число лимфоцитов с интенсивностью люминесценции 0,5-1,9 от средней интенсивности люминесценции в пробе с физраствором и при увеличении числа лимфодатов в пробах с АХ или ГА по сравнению с контролем на 10% и более диагностируют реакцию больного на неспецифические раздражители