Способ получения производных фенотиазина или их аддитивных солей с низшими дикарбоновыми кислотами Советский патент 1988 года по МПК C07D279/28 A61K31/5415 A61P37/08 

ы

11436874

Изобретение относится к способу получен я новых производных фенотиа- зина или их аддитивных солей с низшими дикарбоновыми кислотами, которые проявляют антигистаминовую и антиаллергическую активность и могут найти применение в медицине.

Целью изобретения является получение новых биологически активных производных фенотиазина, проявляющих антигистаминовую и антиаллергическую активность без побочных эффектов.

Пример . Q-(-Димeтил10

лаждения водный раствор промывают диэтиловым зфиром, а затем подо1е- лачивают избытком гидрата окиси натрия. Далее свободные амины экстрагируют дихлорметаном, который сушат над сульфатом магния и вьшаривают с получением красного вязкого масло- подобного продукта, который состоит из смеси соединения ех-2в и его изомера : 2-ацетил- 0-(2-диметилами- но-1-метилэтил)-фенотиазина. Соединение ех-2в является доминирующим; его получают аналитически чистым.

aминoпpoпил)-фeнoтиaзин-2-илJ-yкcyc- j путем получения кислой малеатной -со

лаждения водный раствор промывают диэтиловым зфиром, а затем подо1е- лачивают избытком гидрата окиси натрия. Далее свободные амины экстрагируют дихлорметаном, который сушат над сульфатом магния и вьшаривают с получением красного вязкого масло- подобного продукта, который состоит из смеси соединения ех-2в и его изомера : 2-ацетил- 0-(2-диметилами- но-1-метилэтил)-фенотиазина. Соединение ех-2в является доминирующим; его получают аналитически чистым.

путем получения кислой малеатной -со

Изобретение относится к способу получения производных фенотиазина формулы с ,JU B-COOH TS A(N)RiR2 где А - прямой или разветвленный С -С4-алкилен; В - прямой или разветвленный С,-С -алкилен; R и R С(-С4-алкил, или их аддитивных солей с низшими дикарбоновыми кислотами, которые проявляют антигистами- новую и антиаллергическую активность. Получение целевых соединений ведут из соединения формулы где А, R и R2 указаны выше и Z - радикал -B-CN, где В указано выше, или радикал )-к(0 где X кислород или сера, гидролизом разбавленной минеральной кислотой при температуре кипения реакционной смеси с последующим выделением целевого продукта в свободном виде или в виде аддитивной соли с низшей дикарбоновой кислотой. 1 табл. § W с 4 Sf fOti 00 гч 4;

ная кислота.

2-Ацети.пфенотиазинэтиленкеталь (соединение ех-2а).

В токе азота 100 г 2-апетилфенотиазина, 50 г этиленгликоля и 2,0 г гидрата п-толуолсульфокислоты в 900 МП бензола кипятят с обратным холодильником в водяном сепараторе (ловушка Дина-Старка) в течение 18 Тонкослойный хроматографический анализ (силикагель, смесь гексана с этилацетатом в соотношении 4:1) под твержает практически полный расход исходного соединения, которое замещено соединением с большей вели- чиной Pvf (ех-4) . После охлаждения бензольный раствор промывают 1%-ным раствором гидрата окиси натрия, сушат над твердь м карбонатом калия и выпаривают. Получают 115 г темного маслоподобного продукта, который затвердевает с образованием темно- зеленого кристаллического твердого продукта при стоянии при комнатной

температуре. Данные ЯМР-спектра со- д вором соляной кислоты (40t) мл воды

ответствуют структуре. Продукт в дальней.1ием без очистки используется на следующей стадии.

2-Ацетил-10-(2-димeтилaмин6пpo- пил)-фeнoтиaзин (соединение ех-2в).

Смесь 47,5 г сырого соединения ех-2а и 20,9 г трет-бутоксида калия в 250 мл бензола перемешивают в токе азота в течение 15 мин. К этой смеси добавляют 23 г 2-диметиламино- изопропилхлорида и образовавшийся раствор выдерживают при температуре кипения с обратным холодильником в течение 75 мин. После охлаждения амины экстрагируют разбавленным водным раствором соляной кислоты, а полученный кислотный раствор вьщержива- ют в течение 2() мин.над водным паром с целью гидролиза кеталя. После охи 16 мл концентрированной соляной кислоты). Водный раствор промьшают диэтиловым эфиром,, а затем подщелачивают избыточным количеством гид ., рата окиси натрия. Полученный проду экстрагируют 400 мл хлороформа, который промывают тремя порциями по 600 мл воды. Выпаривание хлороформн го раствора позволяет получить 16,4 вязкого красного маслоподобного про дукта, тонкослойный хроматографичес кий анализ которого (силикагель, дихлорметан в смеси с метаном в соотношении 25:1) показьшает наличие многих компонентов. Образец разделя ют препаративным тонкослойным хрома тографическим анализом с высокой ра решающей способностью с использованием последовательно установленных

50

55

ли в смеси зтилацетата с метанолом и двух перекристаллизации из того же растворителя. Т, пл. 187-19 С, Данные ЯМР-спектра и анализа на CHN

согласовываются с указанной структурой. Изомер получают чистым из маточных растворов хроматографической обработкой свободного амина в колонке на силикагеле, злюируя смесь зтилацетата с этанолом в соотношении 20:1.

(2-диметиламинопропил)-фено- тиазин-2-илЗ-уксусная кислота (соединение В),

Смесь 15,4 г соединения ех-2в,

3,2 г серы и 10 мл морфолина выдерживают при кипячении с обратным холодильником в токе азота в течение 5 ч, Затем теплую реакционную смесь вьшивают в 300 мл этилацетата в смеси с 100 мл диэтилового эфира, после чего смесь перемешивают и фильтруют. Небольшое количество нерастворившегося материала выбрасывают в отход. Амины экстрагируют разбавленным раствором соляной кислоты (40t) мл воды

и 16 мл концентрированной соляной кислоты). Водный раствор промьшают диэтиловым эфиром,, а затем подщелачивают избыточным количеством гид- рата окиси натрия. Полученный продукт экстрагируют 400 мл хлороформа, который промывают тремя порциями по 600 мл воды. Выпаривание хлороформного раствора позволяет получить 16,4 г вязкого красного маслоподобного продукта, тонкослойный хроматографичес- кий анализ которого (силикагель, дихлорметан в смеси с метаном в соотношении 25:1) показьшает наличие многих компонентов. Образец разделяют препаративным тонкослойным хрома- тографическим анализом с высокой разрешающей способностью с использованием последовательно установленных

3

колонок с двуокисью кремния, элюиру смесью дихлорметана с метанолом в соотношении 97:3, После выпаривания основных фракций в общей сложности получают 9,2 г вязких оранжевых мас лоподобных продуктов, данные ЯМР- спектра и тонкослойных хроматографи ческих анализов показывают, что они представляют собой несовершенно разделенные смеси ожидаемых тиоморфоли да и (очевидно) продукта его частичного гидролиза оксиморфолида. Поскольку оба продукта представляют собой удовлетвори тельные промежуточны продукты для гидролиза с получением целевой кислоты (соединения В), их в дальнейшем очищают и совместно растворяют в 4 г соляной кислоты 225 мл) и кипятят с обратным холодильником в течение 6 ч, после чего удаляют все следы исходных материалов с помощью тонкослойного хрома- тографического анализа.

Реакционную смесь выпаривают с получением вязкого зеленого остатка, который растворяют в 70 мл воды и раствор промывают этилацетатом. За- тем раствор подщелачивают добавлени незначительного избытка (с лакмусом) твердого гидрата окиси натрия и про- мьшают дихлорметаном, В результате частичного выпаривания водного раствора происходит вьшадение в осадок натриевой соли соединения В. Процес выпадения осадка интенсифицируют разбавлением равным объемом насыщенного раствора хлористого натрия. .Образовавшийся твердый материал от- фильтровьшают и перекристаллизовыва- гот из смеси воды с насьш енным раствором хлористого натрия в соотношении 4:1, В результате фильтрования и вакуумной сушки продукта при температуре 70°С в течение ночи получают 4,3 г сухого порошка, который характеризуется соответствующими данными анализа на CHN и анализа Карла Фишер для соединения В, натриевой соли, включая 5,5 мол. воды.

Из него также получают кислую ма- леатную соль с т. пл. 115-120 с, данные ЯМР-спектра и элементного анализа соответствуют указанной структуре.

Пример 2. (2-Диметил- аминопропил)-фенотиазин-2-ил -пропи- оновая кислота.

0

5

О-(2-Диметиламинопропил)-фено- тиазин-2-пл -пропионитрил (соедине- ние ех-За).

с В токе азота 4,0 г толилметил- изоцианата в 15 мл ДМСО и 4 мл ТГФ перемешивают в ледяной бане, а затем добавляют в смесь 5,8 г трет-буток- сида калия. По истечении 5 мин добав0 ляют 0,68 г метанола. Затем по каплям в течение 3 мин добавляют раствор 3,4 г ех-2в в 3 мл ДМСО и 1 мл ТГФ. Далее раствору дают нагреться до комнатной температуры и его пере5 мешивают в течение 20 ч. Реакционную смесь выливают в диэтиловый эфир и промывают водой. Амины экстрагируют разбавлепной соляной кислотой, промывают диэтиловых зфиром, а затем подщелачивают избыточньи-5 количе- ством гидрата окиси натрия. Затем свободные амины экстрагируют диэ- тиловым эфиром, сушат над сульфатом магния и выпаривают, в результате чего получают 2,5 г маслоподобного продукта, тонкослойный хроматографи- ческий анализ которого (двуокись кремния, смесь дихлорметана с метанолом в соотношении 24:1) показывает наличие множества компо-нентов. Целевой компонент, соединение ех-За, выделяют в чистом виде препаративным тонкослойньм хроматографическим анализом с высокой разрешающей способностью, элюируя смесью дихлорметана с метанолом в соотношении 97:3, Соединение е-х-За представляло собой маслоподобный продукт, идентифици- рованньм ИК и ЯМР спектрами, данные которых соглас,уются с указанной структурой,

2- t 0-(2-Диметиламинопропил)-фено- тиазин-2-илЗ-пропионовая кислота (соединение С).

Соединение ех-За (1,7 г) растворяют в 50 мл 4 н. соляной кислоты и вьщерживают при температуре кипения с обратным холодильником в течение 20 ч. Раствор выпаривают при пониженном давлении с получением вязкого маслоподобного продукта, который затем повторно растворяют в 30 мл воды, промьшают диэтиловым эфиром, а затем доводят величину рН до щелочной (лакмус) осторожным добавлением гидрата окиси натрия. Образовавшийся раствор промьгоают диэтиловым эфиром, а затем вьшаривают до половины первоначального объема. Гидрохлоридную

0

5

0

5

0

5

51

соль соединения С высаживают в осадок добавлением избытка концентрированной соляной кислоты. Этот масло- подобный продукт повторно растворяют в воде и высаживают в осадок (вновь в виде маслоподобного продукта) добавлением избытка соляной кислоты, а затем растворяют в диэтило

вом эфире, что вызывает затвердевание ю виях испытаний контрольные живот- маслоподобного продукта. Эту соль пе- ные подвергаются депрессии в среднем рекристаллизовьгоают из смеси метано- уже через 33 с. Величины , обесла с этилацетато, в результате чего получают бесцветные кристаллы с т.пл, 156-162 С (с разложением), данные элементного анализа которого (CHN) соответствуют указанной формуле.

Пример 3. Антигистаминовое действие.

А. Антигистаминовая активность ин-витро. Из неповрежденной подвздон- ной области морской свинки (порода Хартли, самец весом 250-400 г) удалили продольную мышцу и поместили ее в ванну для органов с натяжением 300 мг. По истечении 1 ч равновесного состояния определили кумулятивные кривые концентрации реакции на гиста- мин. После промывки тк4ни подвергли

печивающие защиту от действия гиста- мина, рассчитьюали с помоо ью пробит15 анализа, В данном испытании ЕТ)о показывает, что при данной конкретной дозировке для 50% животных обеспечивалась полная защита от действия гистамина в процессе испытания

20 (спустя ч после введения дозировки) . Полную защиту определяли по полному отсутствию симптомов реакции на гистамин в течение 6 мин выдержки в аэрозольной камере (прибли25 зительно десятикратный период в срав нении с периодом начала депрессии у контрольных животных).

Результаты испытаний на антигис- таминовое действие: соединение EDjj,,

Результаты испытаний на антигис таминовое действие: соединение EDjj

инкубированию в течение I ч совместно зо мг/кг через рот; трипролидин 5,77;

с испытываемым соединением, а затем определили повторные кривые концентрации - реакции на гистамин. Смещения вправо относительно кривой кон- центрации реакции агониста, полученной с помощью антагонистов, использовали для построения графиков Шилда, Уменьшение значения log(ch-l) на log (B)j где ch - эквивактивная реакция в присутствии и отсутствии

антагониста, а (В) - молярная концентрация антагониста, позволило рассчит ать величину рА, т.е. отрицательный логарифм концентрации антагониста, который смещает кривую 2Х контрольной реакции на концентрацию гистамина вправо.

Результаты испытаний: соединение прометазин 8,9; С 8,1,

Б. Антигистаминовая активность ин-виво. Морских свинок (порода Харт ли, самцы весом 300-350 г) не кормили в течение 20 ч, а затем через рот или внутрибрюшинно вводили дозировки испытываемьрс соединений. Спустя 1 ч после введения дозировки на индивидуальной основе морских свинок помещали в прозрачную пластмассовую камеру, которую с помощью

В 0,30 (4ч спустя после введени дозировки),

Процедура анафилактоидного испы тания.

35 Крысам, которым не давали корма (разновидность Уистара, вес 280- 300 г) внутрибрюшинно или через ро вводили дозировки испытьшаемых сое динений за два часа до воздействия

40 на них с помощью провоцирующего пр парата 48/80. За 1 ч до вызова реа ции в организм подопытных животных вводили внутрибрющинно по 5 мг/кг пропанола. Оказьшаюп1ий анафилактои

45 ное действие агент, соединение 48/ вводили внутривенно в дозировке 2 мг/кг и затем за животными наблю дали с целью обнаружения симптомы нарушения дыхания.

50 Данные анализировали с помощью пробит-определений, причем реакцию оценивали количественно путем опре деления дозировки испытьшаемого со динения, которая обеспечивала защи

55 50% животных от гибели на данном п межутке времени.

Описанный план проведения экспе римента не дает положительных резу татов для селективных антигистамиаэрозольного распьшителя насьшшли и постоянно загазовьюали 0,25% гис- тамина. За морскими свинками вели наблюдение на предмет обнаружения признаков гистаминовой анафилаксии (например, кашля, чихания, резких движений в брюшин юй области, циано- зов и потери направления), В услопечивающие защиту от действия гиста- мина, рассчитьюали с помоо ью пробитанализа, В данном испытании ЕТ)о показывает, что при данной конкретной дозировке для 50% животных обеспечивалась полная защита от действия гистамина в процессе испытания

(спустя ч после введения дозировки) . Полную защиту определяли по полному отсутствию симптомов реакции на гистамин в течение 6 мин выдержки в аэрозольной камере (приблизительно десятикратный период в срав нении с периодом начала депрессии у контрольных животных).

Результаты испытаний на антигис- таминовое действие: соединение EDjj,,

мг/кг через рот; трипролидин 5,77;

0,30 (4ч спустя после введения озировки),

Процедура анафилактоидного испытания.

Крысам, которым не давали корма (разновидность Уистара, вес 280- 300 г) внутрибрюшинно или через рот вводили дозировки испытьшаемых соединений за два часа до воздействия

на них с помощью провоцирующего препарата 48/80. За 1 ч до вызова реакции в организм подопытных животных вводили внутрибрющинно по 5 мг/кг пропанола. Оказьшаюп1ий анафилактоидное действие агент, соединение 48/80, вводили внутривенно в дозировке 2 мг/кг и затем за животными наблюдали с целью обнаружения симптомы нарушения дыхания.

Данные анализировали с помощью пробит-определений, причем реакцию оценивали количественно путем определения дозировки испытьшаемого сое- динения, которая обеспечивала защиту

50% животных от гибели на данном промежутке времени.

Описанный план проведения эксперимента не дает положительных результатов для селективных антигистами7 .1

нов. Кроме того, крысы не реагировали на внутривенное введение гнета- мина симптомами анафилаксии. Агенты, которые блокируют действие соединения 48/80, обычно классифицируют как ингибиторы анафилактических медиаторов или ингибиторы выделения анафилактических медиаторов.

Результаты ингибирования анафилак тоидной реакции, вызванной действием соединения 48/80, представлены в таблице.

Соединение

.1

ED

-50

Дозировка соединения (внутрибрю- шинно), обеспечивающая 50%-ную защиту от гибели, вызьшаемой действием соединения 48/80 (соединение вводили за 2 ч до начала испытания). EDyo при введении через рот.

Для соединения В приблизительная дозировка EDjg при испытании на крысах составляла 210 мг/кг (внутрибрю- шинно) и превышала 500 мг/кг при I введении через рот. Формула изобретения

Способ получения производных фено- тиазина общей формулы

в-соон

где А - прямой или разветвленный

С,-С -алкилен;

В - прямой или разветвленный С(-С |-алкилен; Р, и Н - .-алкил, или их аддитивных солей с низшими дикарбоновыми кислотами, отличающийся тем, что соединение общей формулы

s

25

где А,

имеют указанные значения;Z - радикал - В - CN,

где В имеет указанное значение, или Z - радикал

35

,Оо, -хн

где X - кислород или сера, подвергают гидролизу разбавленной минеральной кислотой при температуре кипения реакционной смеси с последующим выделением целевого продук-. та в свободном виде или в аддитивной соли с низшей дикарбоновой кислотой.