Способ определения псоралена Советский патент 1990 года по МПК G01N30/90 

I. .

Изобретение относится к аналитиче- teкoй химии, а именно к способу определения псоралена методом тонкослой-- ной хроматографии, и может быть применено для определения псоралена в химических, биологн ческих и клинических лабораториях при токсикологических исследованиях.

Целью изобретения является повышение селективности и экспрессносги определения.

Определение проводят следукзщим образом.

Раствор препарата или смеси псоралена и изопсоралена наносят на хрома- тографическую пластину Силуфол (150x150 мм) и хроматографируют восходящим методом 30-40 мин в системе растворителей гексаи-хлороформ (1:3), Зоны псоралена и изопсоралена; выявленные под УФ-светом, количественно переносят с пластины в пробирки и П-89

экстрагируют псоргшен и изопсорален этиловым спиртом. К аликвотной части каждого КЗ экстрактов прибавляют дис-i тиллированную воду, насыщенньпЧ водный раствор брома и 25%гный раствор гидроокиси аммония. Одновременно флуори- метрируют полученные растворы по отношению к стандартному раствору псоралена. Расчет содержания псоралена и изопсоралена в образце проводят по калибровочному графику. Чувствительность определения 0,01 мкг/мл.

I

Пример 1. Определение псоралена в таблетках по 0,01 г.

Навеску порошка мелкокзмельченных таблеток препарата Псорален помещают в керизгю колбу на 25 мл, содержащую 20 мл хлороформа, растворяют навеску и доводят объем раствора до метки.

0,05 МП полученного раствора наносят капилляром на хроматографическую

4;ii.- ел о

СП СО GD

3

1450596

на в искусственных смесях. Результаты приведены в табл.2.

Примеры А-12. Определение 5 псоралена проводят аналогично примерам 1-3, но варьируя состав додвижяо фазы. Результаты экспериментов приведены в табл. 3.

Способ определения псоралена разделением анализируемой пробы в тонком слое сшшкагеля в подвижкой фазе на

отличающийся

тем, что, с

20

пластину .Силуфол и хроматографируют одновреиенно со стандартом псоралена :восходящим способом в системе растворителей гексан:хлороформ (1:3). Зоны псоралена и изопсорадена, выявленные в УФ-свете с величиной Rf для псоралена 0,55 и изопсоралена 0,70 количественно переносят в пробирки. В пос- ледшш прибавляют 10 мл 96%-ного эти- ш Формула изобретения лового спирта и выдерживают 5-10 мии. К 5 МП экстракта из каждой пробирки добавляют по 5 МП дистиллированной воды; 0,1 мл насыщенного водного раствора брог « 15 основе и-гв,сана, детектирояаием ра,- - 1Т™Г;с еГ„ ГГ/ Г,Т°:аГ„ «-з„„кр«,о„вк.о. .УФ-све,..

проводят одновременную флуориметрию полученных растворов. Результаты десяти параллельньЕХ определений приведены в таб/. .1,

Пример 2. Определе1ше псоралена в 051%-ном спиртовом растворе.

Ojl мл 0,1%-ного раствора препарата Псорален в 70%-ном этиловом 25 спирте наносят на расстоянии 2,5 см от края на хроматографическую пластину Силуфол (150x150 мм) фирмы Cavalier (Чехословакия). Пробу наносят на воздухе калиброванной пипеткой объемом 0,1 мл.

Пластику высушивают на воздухе при 20-25 С в течение 5 мин и помещают в стеклянную камеру для разделения с притертой крышкой, предвари- тельно насыщенную парами системы растворителей хлороформ-гексан, взятых в соотношении 3:t, в течение 30 мин при комнатной температуре и относительной атмосферной влажности 60%. Хроматографируют восходящим методом в 30-40 мин с достижением высоты поднятия фронта подвижной фазы 10 см. Для подготовления подвижной фазы используют растворите- . ли класса Ч или ХЧ.

Зоны псоралена (Rf 0,55) и изо- псорале1ш (Rf 0,70) выявляют в УФ- свете после высушивания пластины на открытом воздухе в течение 2-3 мин. Результаты аналогичны результатам в примере 1,

Пример 3, В условиях примеров проводят определение псоралецелью повышения селективности и экс- прессности определения, в качестве подвижной фазы используют смесь гек- сана и хлорофЬрма при объемном соотношении компонентов 1:3.

Таблица Г Результаты определения псоралена и изопсоралена в таблетках по 0,01 г

30

3540

50

на в искусственных смесях. Результаты приведены в табл.2.

Примеры А-12. Определение псоралена проводят аналогично примерам 1-3, но варьируя состав додвижяо фазы. Результаты экспериментов приведены в табл. 3.

Формула изобретения

Способ определения псоралена разделением анализируемой пробы в тонком слое сшшкагеля в подвижкой фазе на

Формула изобретения

основе и-гв,сана, детектирояаием ра,- «-з„„кр«,о„вк.о. .УФ-све,..

отличающийся

тем, что, с

0

15 основе и-гв,сана, детектирояаием ра,- «-з„„кр«,о„вк.о. .УФ-све,..

25

целью повышения селективности и экс- прессности определения, в качестве подвижной фазы используют смесь гек- сана и хлорофЬрма при объемном соотношении компонентов 1:3.

Таблица Г Результаты определения псоралена и изопсоралена в таблетках по 0,01 г

-14505966

Таблица 2

Результаты анализа искусственных смесей псоралена и нзопсоралена с известным содержанием изомеров

;---------.---.--.---.™--,..-..--.-----Х ---.-

Задано, гНайдено,г

псораленаизопсораленапсоралеЯанзопсоралена

0,005000,00500 0,00493 0,00486

0,004000,006000,00410 0,00592

0,003000,007000,00310 0,00708

0,008000,00200 ,0,00789 0,00210

0,002000,008000,00200 о,00793 .

. i Т а б л и ц а 3 Зависимость хроматог рафического разделения пс оралена и изопсоралена от состава подвижной фазы

При- Состав подвижной дК ь«ер фазы гексан-хло- псоралена и роформ, об.% изопсоралена

4 1:1О

51г2 0,05

6.0,5j2О

71:3 0,15

8 1:4О

91:5О

102:1О

115:1 о

124:5 . О

Изобретение относится к аналитической химии, в частности к способу определения псоралена (ПЛ). Цель - повышение селективности и экспрессности определения. Определение ПЛ ведут разделением анализируемой пробы в тонком слое силикагеля в подвижной фазе (ПФ) и детектированием разделенных зон компонентов в УФ - свете. В качестве ПФ используют смесь гексана и хлороформа при объемном соотношении компонентов 1:3. 3 табл.