Способ определения индивидуальной чувствительности организма к иммуномодулятору Советский патент 1992 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунологическим методам исследования и может использоваться в широкой клинической практике для индивидуального подбора иммунокорригирую- щих препаратов.

Цель изобретения - ускорение анализа и повышение точности способа.

Способ осуществляется следующим образом.

Кровь больного в объеме 0,1 мл инкубируют при 37° С 1 ч с 0,1 мл раствора имму- номодулятора в рекомендуемом разведении (опыт), либо с 0,1 мл физиологического раствора (контроль). После инкубации пробы центрифугируют 5 мин при 1500 об/мин и из осадка на обезжиренных предметных стеклах готовят мазки. Препараты высушивают. Акридиновый оранжевый в разведении 1:500000 наносят на высушенный мазок, накрывают-покровным стеклом, инкубируют 5 мин при комнатной температуре. Затем препарат просматривают на

микроспектрофлуориметре, определяя в каждом лимфоците интенсивность флуоресценции зонда при 640 и 530 нм. Всего просматривают 50 лимфоцитов. Вычисляют коэффициент синтетической активности как отношение свечения комплекса акридинового оранжевого с РНК (640 нм) к комплексу с ДНК (530 нм). При повышении показателя по сравнению с контролем на 20% и более определяют индивидуальную чувствительность к иммуномодулятору конкретного больного.

Способ поясняют следующими примерами.

П р им ер 1. Диагноз: Ишемическая болезнь сердца, постинфарктный кардиосклероз, хроническая коронарная недостаточность I ст. Иммунологическая недостаточность:

Бластгрансформация лимфоцитов после их инкубации в присутствии фитогемагглюти- нина (ФГА) 46%, содержание Т-розеткооб- разующих клеток (Т-РОК) в крови 32%.

СО

с

1 ю о о

го

При назначении иммуномодуляторов проводили их индивидуальный подбор предлагаемым способом. Исследовали следующие препараты: левамизол, тималин, спленин и рабоксин. Через 1,5 ч после взятия крови на исследование предлагаемым способом было установлено возрастание синтетической активности лимфоцитов больного на спленин на 20% и рибоксин на 36%. Проведение курса иммуномодулирую- щей терапии этими препаратами привело к положительному эффекту- состояние больного улучшилось, бласттрансформация лимфоцитов крови на ФГА повысилась до 58%, а содержание Т-РОК до 51 %.

П р и м е р 2. Б-ой, 0-рь А.И., 61 год. Диагноз: Ишемическая болезнь сердца, постинфарктный кардиосклероз, хроническая недостаточность кровообращения II ст. Иммунологическая недостаточность, Бласттрансформация лимфоцитов на ФГА- 36%, содержание Т-РОК в крови -34%,

Была проведена индивидуальная оценка действий иммуномодуляторов предлагаемым способом. Установлено, что спленин практически не изменял синтетическую активность лимфоцитов (8%), а милдронат повышал ее на 36%. Проведение курса

лечения милдронатом привело к положительному эффекту. БТЛ возросла до 51%, содержание Т-РОК до 49%,

Таким образом/применение предлагаемого способа ускоряет подбор иммуномоду- лятора у конкретного больного, сокращая время проведения исследования с 72-96 ч до 1,5 ч, т.е. сокращение анализа составило в 48-60 раз.

Повышение точности по сравнению с известным увеличивалась на 31,2-37,3%. Ф о р м у л а и з о б р е т е н и я Способ определения индивидуальной чувствительности организма к иммуномодулятору, включающий забор крови в две пробы, инкубацию опытной пробы в присутствии иммуномодулятора, отличающийся тем, что, с целью повышения точности способа и сокращения времени

анализа, после инкубации из опытной и контрольной проб готовят мазки, обрабатывают их акридиновым оранжевым, измеряют свечение в мазках, вычисляют синтетическую активность и при увеличении активно:

сти на 20% и выше в опытной пробе по сравнению с контрольной определяют индивидуальную чувствительность организма к иммуномодулятору.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для определения индивидуальной чувствительности организма к иммуномодуляторам. Цель изобретения - сокращение времени анализа и г повышение точности способа. У больного производят забор крови, которую инкубируют в присутствии иммуномодулятора, готовят на стекле мазки, один из которых инкубируют с акридиновым оранжевым, определяют во всех мазках синтетическую активность клеток крови и при увеличении ее на 20% и выше по сравнению с контролем определяют индивидуальную чувствительность организма к иммуномодулятору. По сравнению с прототипом сокращается время анализа в 48-60 раз, а точность увеличивается на 31,2-37,3%.