Сополимер 4-(изотиоцианатометил)винилбензола 1,4-дивинилбензола и винилбензола в качестве полимерного реагента для ковалентного связывания белка и способ его получения Советский патент 1992 года по МПК C08F212/14 C08F212/14 C08F212/08 C08F212/36 

Изобретение относится к синтезу полимерных реагентов для связывания белка, в частности сополимера 4-(изо- тиоцианатометил) винилбензола с 1-,4г дивинилбензолом и в нилбензолом, который может применяться в медицине и различных отраслях народного хозяйства.

Целью изобретения является повы- шение активности реагента для ковалентного связывания белка.

Во всех примерах, иллюстрирующих изобретение,использована следующая схема синтеза сополимера:

ЧСЕгСНЫСН,-СН)г

О

D

-сн-сн,(I)

КЗСЖЮ

пропанол-2 или ацетонитрцл

6 6

C1LNCS - СН-СН,

2 Ш

хлорбензол

)iGMHW

ацетон

О

-(ац-сЮг

CH7SCN -СН СН2

ал)

Пример 1, Смесь 0,76 г сополимера и 1,55 г соединения II кипятят в 20 мл пропанола-2 в течение 20 ч (82°С) . Осадок фильтруют, промывают водой (200 мл), сушат при остаточном давлении 0,2 мм рт.ст, и температуре 309С, Найдено: N6,93% что соответствует , , . ИК-спектр сополимера IV показывает характеристическую полосу поглощения N С S-связи в области

210574

2160 .которая отсутствует в спектре исходного сополимера I, Пример 2.

с а) Смесь 0,76 г сополимера I и 1,55 г соединения II кипятят в ацетоне в течение 8 ч (56 С). Осадок фильтруют, промывают водой (200 мл), сушат при остаточном давлении

Ю 0,2 мм.рт.ст. и температуре 30 С. Получают 0,82 г сополимера III, Найдено: N 6,90%, что соответствует х 80, у 2, z 18, ИК-спектры сополимера III показывают интенсив55 ную полосу в области 2040 см(, характерной для 5-С М-связи, которая отсутствует в ИК-спектре исходного сополимера I.

б) 0,8 г сополимера III кипятят в

20 20 мл хлорбензола в течение 7 ч. Осадок фильтруют, промывают бензолом (20 мл), ацетоном (20 мл), водой (200 мл), сушат при остаточном давлении 0,2 мм. рт. ст, и температуре

25 30°С, Получают 0,78 г сополимера IV, Найдено: N 6,89%, что приблизительно соответствует х 83, у 2, , ИК-спектр сополимера IV показывает интенсивную полосу поглощения в

30 области 2160 см, характерной для -N С 5-связи4 и исчезновение полосы поглощения в области см , характерной для ИК-спектра сополимера III.

2$ Пример 3. Смесь 0,7бг сополимера I и 1,55 г соединения II кипятят в 20 мл ацетонитрила в течение .15 ч (8l°C), Осадок, фильтруют, промывают водой (200 мл), сушат при

до остаточном давлении 0,2 мм рт.ст. и температуре 30°С. Получают 0,82 г сополимера IV, Найдено: N 6,95%, что соответствует , z 15. ИК-спектр показывает полосу

45 поглощения в области 2160 , характерную для -N С S-связи отсутствующего в ИК-спектре исходного сополимера I,

Ковалентное связывание полимер50 ных реагентов с белком осуществляют в холодильнике () и при комнатной температуре (20-22°С) в боратном буферном растворе, имеющем значение рН 8,Л5, в течение 36-72 ч, Количе55 ство связанного альбумина исследовано спектрофотометрическим методом на приборе ., основанным на измерении оптической плотности растворов при длине волны 280 нм, и фотоколори

Изобретение относится к синтезу полимерных реагентов для связывания белка, которые могут применяться в медицине и различных отраслях народного хозяйства. В качестве полимерного реагента для ковалентного связывания белка предлагается применять сополимер 4-(изотиодианатоме- тил) винилбенэола, 1,4-дивинилбензо- ла и винилбензола, содержащий указанные звенья в количестве соответственно 80-83,2, 15-18 мол.%. Способ получения данного сополимера включает обработку хлорметилизованно- го сополимера винилбензола и 1,4-ди- винилбензола роданистым калием при молярном соотношении реагентов 1:2 при 5б-82°С в присутствии изопропа- нола или ацетонитрила в течение 15- 20 ч. Применение указанного сополимера позволяет повысить количество ковалентно связанного белка с 93 .до 120 мг/кг, 2 с.п. ф-лы, 2 табл. (/)

CH,SdN

-ttfc-fCHi-tefc-- ОЛ

-Сн-с н2

где х 80-83 мол.%, у 2 молД, z 15-18 молД, в качестве полимерного реагента для ковалентного связывания белка.

Ч%-(%--(СН2CH2S№-(

6

-сн-снг

где х 80-83 молД, у 2 мол.%,

;г 15-18 молД, заключающийся в том, что хлорметилированный сополимер винилбензола и 1,-дивинилбензо2. Способ получения сополимера k-(изотиоцианатометил)винилбензола, 30 1,4-дивинилбензола и винилбензола : формулы

50

ла обрабатывают роданистым калием при молярном соотношении сополиме- роданистого калия 1:2 при 56 - &2 С в присутствии изопроланола или ацетонитрила в течение 15-20 мин.

Таблица 1

Ковалентное связывание альбумина на сополимере 4-(изотиоцианатометил) винилбензола с 1,-дивинилбензолом и винилбензолом

Таблица 2

Химическая фиксация энзимов на п-изотиоцианатоперокси- гидроксйпропил-Сефадексе

ХимотрипсинСефадекс 6200

Трипсин-Сефалеке 6200

Амилаза-Сефадекс 6200

93 62

23