Актиноцил-бис-( @ -диметиламинопропил)-амин, обладающий противоопухолевой активностью Советский патент 1992 года по МПК C07D265/38 A61K31/538 A61P35/00 

(СНз)гНСН2СН2СНгКН

СО

который получают окислением феррицинидом калия в фосфатно-щелочном буере (рН 7,2) или РЬО в спиртовом.

растворе 2-амино-3 окси- -метилбензоил- (0 -диметиламинопропил) амина , Последний получают каталитическим гидрированием 2-нитро-З-бензилокси- етилбензойл(V-диметиламинопропил)амина либо 2-нитро-З-окси- -метилбензоил-(-диметиламинопропил)-амина. Пример, Хлоргидрат 2-нитро-; З-бензилокси-4-метилбензоил(У-димётиламинопропил)амина.

К раствору 5,6 г хлорангидрида 2-нитро-З-бензилокси-т-метилбензой ной кислоты в 100 мл бензола при температуре 25-30 С и перемешивании добавляют по каплям раствор 1,77 г |(-диметиламинрпропиламина в 20 мл

бензола. Выдерживают реакционную мает

су при перемешивании и комнатной температуре 1ч, а затем 7 ч при 5060 С. При этом образуется обильный осадок По окончании выдержки реак- .

-ционную массу упаривают досуха. Сухой остаток обрабатывают 50 мл бензола, нагретого до 70С, охлаждают, осадок отфильтровывают, промывают не.большим количеством бензола, сушат.

Выход. 4,2 г (56,3%). Т.пл. 1б6-1б8°С ;

,(изопропиловый спирт-бензол, 1:10). Хроматографически однороден на пластинах силуфол UV-.5 в системе 1-бутанол-уксусная кислота-вода (4:1:1). . Найдено,%: С 58,2; .Н 6,5; С1 8,8. : Вычислено,: С 58,6; И 6,4;С1 8,7 2-Нитро-3-бензйлокси-4-метилбензоил-(У-димётиламинопропил)-амин. . 3,5 г хлоргидрата 2-нитро-З-бензилокси-Ч-метилЬёнзоил- ()-диметиламинопропил)-амина растворяют в 20 мл воды, добавляют насыщенный раствор бикарбоната натрия и экстрагируют этилацетатом (3 раза по 20мл). Этилацетатные вытяжки объединяют, промывают водой, сушат сульфатом Mai- ния и упаривают в вакууме. Получают 2,8 г маслообразного продукта, хроННС%СНгСН.К(СНз)2

О Шг

матографически однородного на пластинах.силуфол UV-254 в системах: 1-бутанол-уксусная кислота-вода (4:1:1),

хлороформ-метанол-этилацетат (6:1:3). Анализируют в виде рейнеката, который получают смешением раствора 2нитро-З-бензилокси-4-метилбензоил(-диметиламинопропил)-амина в О,1 н.

соляной кислоте и водного раствора рейнеката аммония. Выделившийся рейнекат 2-нитро-З Ьензилокси4-метилбензоил-(З-диметиламинопропил)-амина отфильтровывают, промывают водой и сушат-в эксикаторе над . . - : - .. . Найдено,: С 41,6; Н 4,6; Сг9,0, .N 17,9о . . .... ;..

С2оН25-%04 C Il7CrN60 }SS};

- Вычислено,%: С 41,6; К-4,7;

Сг 9,3; N 18,Зо ...

2-Нитро-3 окси-4-метилбензоил(у-диметиламинопропил).-амин..

. 0,5 г 2-нитро-3 окси-4-метилбеНзойной кислоты растворяют в 10 мл

абсолютного эфира, добавляют 20 мл безводного бензола и к полученному раствору при комнатной температуре и перемешивании добавляют раствор 0,52 г дициклогексилкарбодиимида в

5 мл бензола Реакционную массу выдерживают 0,5 ч отфильтровывают дициклогёксилмочевину, и к фильтрату добавляют по каплям приперемешивании раствор 0,1° г у -диметиламинопропиламина в 5 мл бензола. Выдерживают при перемешивании 0,5 ч, отфильтровывают осадок, промывают его небольшим количеством бензола и эфира, сушат, обрабатывают 30-мл воды,

водный раствор профильтровывают.

упаривают до объема 1-2 мл и наносят на колонку, содержащую., г целлюлозы ЛЭАЗ„ Хроматографируют в воде, собирая фракцию, отвечающую по 35 тех на пластинах Силуфол UV-254 в системе метанол-этилацетат-триэтиламин (5:5:0 2-нитро-3-окси-4-метилбензоил- (/-пиметиламиноппопип) -амину 5 Элюат упаривают досуха, Кристаллизуют из смеси спирт-бензол и из бензола. Получают 0,15 г .-нитро-3-окси- -метилбензоил-СУ-диметиламинопропил)-амина, т.пл, 182,5-1 чС, Найдено, С55,5; Нб,9о Вычислено,: С 55,5; 6,8, Актиноцил-бис- (Х-диметиламинопропил)-амин, . а) 2,Р. г 2-нитро-З-бензилокси- метилбензоил-(Х-диметиламинопропил)амина гидрируют в 100 мл метанола пр атмосферном давлении в присутствии палладиевой черни до 2-амино-З-окси-4-метилбензоил-(У-диметиламинопропил)-амина. Контроль методом ТСХ на пластинах силуфол иу-25 в системах: 1-бутанол-уксуснап кислота-вода ) и хлороформ-метаноЛ этилацетат.(6:1:3). По окончании гидрирования реакционную массу профильтровывают ;от катализатора и при перемешивании добавляют к суспензии 3,5 г. двуокиси свинца в 30 мл метанола. Перемешивают при комнатной температу ре 7м, оставляют на 12 ч, упаривают досуха, экстрагируют хлороформом, .хлороформный экстракт упаривают в ва кууме досуха, остаток кристаллизуют КЗ бензола. Выход 1, г хроматогра-; ; .; фически однородного силуфол UV-25, .система - хлороформ-метанол-этилаце-тат ( гЗ);}. актиноцил-бис-(-диме. тиламинопропил)-амина. Т.пл. 136- 137°с. ; ;:. :: .;:;:-;.//... ) Профильтрованный от катализа . тора раствор, полученный при гидри. ррвании 0,55 г 2-нитро-З-бензилоксиt-метилбензоил-(З-диметиламиноПропил . .амина, смешивают со 100 мл фосфатно;. щелочного буфера (рН 7,2) добавляют к раствору 1,51 г феррицианида калия в 15 мл того же буфера. Перемешивают. 3 ч при комнатной температуре в реакционную массу вносят насыщенный раствор бикарбоната натрия и экстрагируют хлороформом. Хлоро. формный экстракт промывают водой, сушат сульфатом натрия, упаривают досуха. Остаток кристаллизуют м.з бензола. Получают 0,3 г вещества с т.пл. 135-137°С. Не дает депрессий температуры плавления в пробе смешения с образцом, полученным по методу а). Хроматографическая подвижность образцов, полученных по методам а) и б) одинакова. 3 в) Актииоцил-бис-(-диметиламинопропил)-амин получают аналогично меТОДУ б), исходя из 2-НИТРО-3-ОКСИ-4метилбензоил-(-диметиламинопропил)амина, гидрирование которого до 2амино-3-окси- -метилбензоил-(у-ди- . метиламинс)Пропил)-аМина Ведут при атмосферном давлении в ;этаноле в присутствии никеля Р|5нея. Прбдукт, полученный по методу в), идентичен соединению, полученному по методам ;а) и б). . :.: . : : Найдено,%: С 62,8; Н 4,3; N 16,9.. С26«36%(4 - : --: :. Вычислено,, С 62,9; Н 4,3; N 16,9, -л .: .-.:....... УФ-спектр (натрийфосфатный буфер, РН 6),, им (Е) (2,Р,10.), /,45(2,-10)..; :. ..; ,, .:...- Спектрофотометрическое -титрование актиноцил-бис-(у-диметиламинопропил)-амина дезоксирибонуклеиновой кислотой (ДНК) в натрийфосфатном. буфере (|мП,т) показало, что полученное соединение комплексообразует с ДНК (К б-Ю, В 0,6).. V . /; . V --: . Изучение .противоопухолевой ак- . тивности проводилось in vitro в системе первичных односуточных стационарных суспензионных культур опухолевых клеток мышей (табл..) и в.системе первичнь1Х культур опухолевых клеток человека (табл.2) , а также in vitro в опытах на мышах (табл.З). Из приведенных в табл.1 и 2 дан-ных следует, что актиноцил-бис-(диметиламинопропил)-амин проявляет противоопухолевую активность в сие- темах первичных суспензионнь1х культур опухолевых клеток мышей и первичных опухолевый клеток человека in vitro. Данные, приведенные в; табл.З., свидетельствуют о том, что актиноцил-бис-(У-диметиламинопропил)амин проявляет противоопухолевую активность, равную активности актино-мицина 1, при изучении in. vitro на. солидной опухоли .(аденокарциономе АК 755). Он вызывает торможение роста этой опухоли.на 7П, тогда как акиномицин D тормозит рост этой опухоли на 63%. При этом,в отличие от ктиномицина D,актиноцил-бис-(-диетиламинопропил)-амин не эффективен ри лейкозах, а при солидной опухоли ает эффект пролонгирования.; Максимально переносимая доза акиноцил-бис- (у-диметиламинопропил) - 7амина в 25ПО раз больше дозы актиномицина D, что свидетельствует о его меньшей токсичности. / . - .

Лоза, мкг/мл, подавляющая синтез суммы; нуклеиновых кислот на . 677293;8 Таким образом, актиноцил-бис-( -«/ диметиламинопропил)-амин - препарат. менее токсичный и более избирательно действующий, чем актиномицйн D, Т 3 б л и ц а 1

Актиноцил-бис-(Г-диметиламиНо- пропил)-амин формулыИзобретение относится к новому соединению-аналогу природного антибиотика актиномицина D,К настоя1цему времени описано большое число актиноцил-бис-амино- кислот и их эфиров. Среди этих соединений к настоящему времени не обнаружено пока соединений с практически ценнными свойствами.Известно, что из группы алкили- рующих противоопухолевых соединенийактивностью обладает сарколизин. Но наряду с противоопухолевой активностью по отношению к некоторым перевиваемым опухолям сарколизин обладает высокой токсичностью.Целью изобретения является расширение ассортимента биологически активных соединений,В "соответствии с изобретением описывается актиноцил-бис-(у-диметилами" нопропил)-амин формулы

: : :: . : . - Т а б .л и ц а 2 Сравнительные данные 6 цитостатической активности . , . . напервичных опухолях человека . . . . . Сравнительные данные о

75,5

АК 755 L 1210 75,5

100,5 125,5

71,В 13,5 ,0

нет нет нет нет V . ; . Т а. б л; и ц а 3 противоопухолевой активности АК 755 0,03.5 Актиномицин D L 12.10 . 0,12.2 La0,12.2

10

677293

Продолжение табл.3 t 1 63,017,0 1,0 - нет : ; (через 9б ч)2бнет (через 96 ч)1 3нет