КОНЪЮГАТ ИНГИБИТОРА 3-ГИДРОКСИ-3-МЕТИЛГЛУТАРИЛ-КоА РЕДУКТАЗЫ С ЛИГАНДОМ АСИАЛОГЛИКОПРОТЕИНОВОГО РЕЦЕПТОРА Российский патент 2024 года по МПК C07D207/34 A61K45/06 A61P3/00 A61P9/00 

Область техники

Настоящее изобретение относится к области медицинской химии, а именно к способам повышения селективности действия, биодоступности и эффективности препаратов путем создания систем для их направленного транспорта в целевые клетки. Предложенные пролекарства гиполипидемических препаратов могут быть применены в медицине для таргетного лечения сердечно-сосудистых заболеваний.

Уровень техники

Сердечно-сосудистые заболевания являются одной из основных причин смертности, а также временной и стойкой утраты трудоспособности населения в развитых странах мира. К факторам риска возникновения таких распространенных патологий как ишемическая болезнь сердца и артеросклероз относят гипертонию, сахарный диабет, курение, наследственность, малоподвижный образ жизни, ожирение, и особенно гиперлипидемию. Статины - класс лекарственных средств, который применяется для лечения и профилактики гиперлипидемии и атеросклероза. Терапевтический эффект достигается путем регулирования биосинтеза эндогенного холестерина за счет ингибирования редуктазы 3-гидрокси-3-метилглутарил-кофермента А (ГМГ-КоА-редуктазы). За последние 20 лет было показано достоверное влияние статинов на снижение сердечно-сосудистой и общей смертности независимо от пола, возраста, исходного уровня холестерина [Рациональная фармакотерапия сердечно-сосудистых заболеваний / под общ. ред. Е.И. Чазова, Ю.А. Карпова. - 2-е изд. - М.: Литтерра, 2016. - 784 с]. Невзирая на положительный терапевтический эффект статинов, нельзя не отметить некоторые общие проблемы их использования. Так, получены данные о серьезных побочных эффектах (миалгия, головная боль, боли в животе, бессонница и т.д.) и противопоказаниях (алкоголизм, печеночная недостаточность). Для большинства препаратов данного класса также существуют проблемы низкой водорастворимости и биодоступности, «эффекта первого прохождения», которые влекут за собой увеличение суточной дозы. При этом, при значительном повышении концентрации действующего вещества в плазме крови возрастает риск развития миопатии и рабдомиолиза [B.Tomlinson, et al. Drugs Aging 18 (2001) 665-683]. Таким образом, актуальной задачей является оптимизация фармакокинетических и фармакодинамических свойств существующих гиполипидимических средств.

Скорректировать фармакологический профиль и улучшить биодоступность препаратов можно путем создания системы направленного транспорта статинов в клетки печени [A. Date A.A., Nagarsenker M.S. Journal of Pharmacy and Pharmacology. 2007. V.59. P. 1583-1584]. Данный подход призван обеспечить проникновение активной молекулы в целевой орган в эффективной концентрации, а также ограничить взаимодействие лекарства с нецелевыми клетками. В результате это позволит снизить необходимую дозу введения препарата, а также минимизировать побочные эффекты от его приема.

Статины оказывают обратимое, конкурентное ингибирование ГМГ-КоА-редуктазы, ключевого фермента биосинтеза холестерина. Хорошей молекулярной мишенью для адресной доставки в клетки печени, где в основном и происходит биосинтез холестерина, признан асиалогликопротеиновый рецептор (ASGPR). Это связано со способностью ASGPR переносить через мембрану высокомолекулярные соединения, быстрым циклом регенерации и минимальным уровнем экспрессии на внепеченочных типах клеток. Известно, что ASGPR может селективно связываться с остатками галактозы и N-ацетилгалактозамина, это позволяет осуществлять направленный транспорт лекарственных молекул с помощью данных векторных фрагментов [D'Souza A.A., Devarajan P.V. Journal of Controlled Release. 2015. V.203. P. 126-139.]. Введение углеводных фрагментов, как правило, приводит к увеличению растворимости соединений в воде. В случае статинов это представляет дополнительные преимущества, так как низкую биодоступность препаратов связывают с высокой липофильностью [Shaker M.A. Journal of Drug Delivery Science and Technology. 2018. V.43. P. 178-184.]. Также известно, что прием более водорастворимых статинов (например, розувастатина) оказывает меньше негативных последствий для организма [Bratton L.D., et al. Bioorg. Med. Chem. 2007. V.15. P. 5576-5589], так как с высокой липофильностью связывают и способность данных препаратов неспецифически проникать и накапливаться в нецелевых типах клеток [Roth B.D., et al. J. Med. Chem. 1991. V.34. P. 463-466]. Таким образом, увеличение гидрофильности статинов можно рассматривать как одну из стратегий снижения вероятности развития у пациентов побочных эффектов.

На сегодняшний день известно ограниченное число примеров использования лигандов ASGPR для создания низкомолекулярных пролекарств статинов.

В работах [Zhang X, et al. Bioconjugate Chemistry. 2017. V.28. P. 2109-2113] и [Zhang Y., et al. Bioorganic & Medicinal Chemistry. 2019. V.27. P. 2187-2191] исследованы соединения на основе N-ацетилгалактозамина и N-ацетилглюкозамина общей формулы (1):

(1)

Авторами показано, что конъюгаты аторвастатина с остатком N-ацетилглюкозамина растворяются в воде лучше, чем исходный аторвастатин. Кроме того, синтезированные соединения проявили ингибирующую активность по отношению к ГМГ-КоА-редуктазе в модельных in vitro экспериментах. В тоже время, исследованные конъюгаты продемонстрировали низкую устойчивость к действию эстеразы свиной печени при pH 7.4 и 4.5, что ставит под сомнение перспективу их использования в качестве лекарств, принимаемых перорально. Соединения формулы (1) были получены по реакции азид-алкинового циклоприсоединения, катализируемого солями меди(I). Несмотря на общемировое признание того, что циклоприсоединение, катализируемое медью – быстрый и эффективный метод конъюгации, данный тип реакций все же нежелателен для синтеза большинства лекарственных препаратов вследствие токсичности меди для живых клеток и отсутствия методов надежного удаления ее следов из конечного продукта [Морозова М.А., Новый метод гидро-дедиазонирования и региоселективный цинк-катализируемый метод 1,3-диполярного циклоприсоединения: дис. на соискание ученой степени канд. хим. наук: 02.00.03. - Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Национальный исследовательский Томский политехнический университет», Томск, 2017 - 120 с.].

Наиболее близким аналогом (прототипом) данного изобретения является конъюгат аторвастатина с производными N-ацетил-D-галактозамина общей формулы (2) [Худяков А.Д., Маклакова С.Ю. «Синтез конъюгатов аторвастатина с производными N-ацетил-D-галактозамина для направленного транспорта в клетки печени». Материалы Международной научной конференции студентов, аспирантов и молодых учёных «Ломоносов-2021», секция «Химия». - М.: Издательство «Перо», 2021. С.756].

(2)

Структура формулы (2) отличается от структуры формулы (1) тем, что действующее вещество в них соединено с углеводным фрагментом посредством амидной связи. Это позволяет предположить, что механизм и скорость их расщепления в биологических средах будут иными чем в случае конъюгатов, описанных в работах [Zhang X, et al. Bioconjugate Chemistry. 2017. V.28. P. 2109-2113; Zhang Y., et al. Bioorganic & Medicinal Chemistry. 2019. V.27. P. 2187-2191]. Хотя в самой публикации данные о синтезе не приведены, резонно предположить, что триазольный фрагмент с комплексными полифункционализированными заместителями в 1 и 4 положениях формируется с помощью медь(I)-катализируемой реакции азид-алкинового циклоприсоединения по аналогии с синтезом соединений формулы (1).

Технической проблемой, на решение которой направлено заявляемое изобретение, является разработка новых конъюгатов статинов с лигандами асиалогликопротеинового рецептора, растворимость которых в воде сравнима или превосходит аналоги, а стабильность в условиях, имитирующих физиологические, исключает возможность высвобождения действующего вещества до попадания в целевые клетки печени, и при этом синтез которых можно осуществлять без использования потенциально токсичных катализаторов на основе переходных металлов.

Раскрытие изобретения

Техническим результатом заявляемого изобретения являются низкомолекулярные конъюгаты статинов общей формулы (I), в которых гиполипидемический препарат соединен с остатком галактозы и N-ацетилгалактозамина с помощью короткого или средней длины линкера (длина углеродной цепи от 2 до 6 метиленовых звеньев, допустимо вхождение в нее гетероатомов) и амидной связи, характеризующиеся повышенной стабильностью в физиологических условиях (конъюгаты не претерпевают значимого гидролиза в водных средах pH 5.0 и 7.4 с или без добавления выбранных гидролаз в течение 24 часов), повышенной растворимостью в воде (концентрация насыщенных водных растворов более чем 3 раза превосходит концентрацию насыщенного раствора соответствующего немодифицированного препарата), а также разработка способа получения конъюгаты статинов без использования токсичных катализаторов на основе переходных металлов. Это позволяет использовать заявляемые конъюгаты в качестве действующего вещества в фармацевтических композициях, применяемых перорально для лечения или профилактики сердечно-сосудистых заболеваний.

Технический результат достигается конъюгатом общей формулы (I):

(I)

и допустимыми для использования в фармацевтике солями, гидратами, энантиомерами и стереоизомерами,

где X представляет собой -OH или -NHAc

Y представляет собой

каждый a, b, c и d независимо представляет собой -H, -D или -CH₃

каждый k, l, m и n независимо 0, 1 или 2

Z представляет собой алкил (С₂-С₆), -O-, -S-, -NH-, -N(CH₃)-, -NH-C(O)-, C(O)-NH-, -CH=CH- или -O-CH₂-CH₂-O-.

Технический результат также достигается способом получения заявляемого конъюгата, заключающегося в проведении реакции ацилирования между подходящим активированным эфиром статина и подходящим гликозидом галактозы или N-ацетилгалактозамина c концевой аминогруппой в органическом растворителе в присутствии основания, взятых из расчёта, что на 1.0 мольный эквивалент активированного эфира берут 1.0-1.5 мольный эквивалент гликозида и 1.5-5.0 мольный эквивалент основания, реакционную смесь перемешивают в течение не менее 8 часов при комнатной температуре для получения промежуточного продукта, который выделяют путем экстракции, дополнительно очищают прямой колоночной хроматографией и переводят в конечный продукт путем удаления защитных групп и выделения обращенно-фазовой хроматографией. Предпочтительно в качестве активированных эфиров статинов использовать пентафторфенил- или NHS-эфиры статинов. В качестве органического растворителя - ДМФА, ТГФ, дихлорметан или аналогичные ему по свойствам галогензамещённые углеводородные растворители (дихлорэтан, хлороформ и т.д.). В качестве основания предпочтительно использовать третичные амины, например, триэтиламин или диизопропилэтиламин. Выделение промежуточного продукта предпочтительно проводить путем экстракции в системе дихлорметан-вода или этилацетат-вода. Далее предпочтительно проведение очистки промежуточного продукта прямой колоночной хроматографией в системе этилацетат-гексан или дихлорметан-метанол. Для удаления защитных групп предпочтительно использовать раствор метилата натрия в метаноле, взятого из расчета, что на 1 эквивалент промежуточного продукта берут не менее 3 эквивалентов метилата натрия. Далее предпочтительно проводить нейтрализацию реакционной смеси до pH 6 с помощью ионно-обменной смолы Dowex 50W-X8 H⁺. Конечный продукт предпочтительно выделять с помощью обращено-фазовой хроматографии в системе вода-ацетонитрил.

Краткое описание чертежей

Изобретение поясняется следующими чертежами.

На фиг. 1 приведены примеры кинетических зависимостей, полученных при измерении концентрации конъюгатов и высвобождаемого ими аторвастатина при выдерживании в модельных растворах (на рисунке данные, полученные для соединения из Примера 2).

Осуществление изобретения

Ниже приведены определения терминов, которые используются в описании настоящего изобретения.

«Асиалогликопротеиновый рецептор (ASGPR)» - трансмембранный белок, преимущественно экспрессируемый гепатоцитами, распознающий производные D-галактозы и N-ацетилгалактозамина и участвующий в их транспорте в клетку.

«Конъюгат» - комплекс, формирующийся при помощи ковалентных связей между лекарственным соединением и лигандом-носителем.

«Лиганд» - химическое соединение, которое образует нековалентный комплекс с той или иной биомолекулой (чаще всего белком, например, клеточным рецептором, но иногда, например, с ДНК) и производит, вследствие такого связывания, те или иные биохимические, физиологические или фармакологические эффекты.

Представленные ниже примеры иллюстрируют, но не ограничивают настоящее изобретение.

Пример 1. Синтез NHS-эфира аторвастатина

Тригидрат кальциевой соли аторвастатина (1.0 г, 0.8 ммоль) перемешивали в течение 15 минут в 40 мл 1М раствора HCl и экстрагировали аторвастатин в виде кислоты дихлорметаном (3 раза по 40 мл). Объединенные органические вытяжки сушили над Na₂SO₄. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в 10 мл ацетона, добавляли к нему 2,2-диметоксипропан (2.5 мл, 20.0 ммоль) и моногидрат пара-толуолсульфокислоты (0.02 г, 0.1 ммоль) и перемешивали 24 часа. После этого в реакционную смесь добавляли триэтиламин (0.075 мл, 0.5 ммоль) и удаляли растворитель при пониженном давлении. К остатку добавляли 5 мл ТГФ и 1 мл 1М раствора NaOH, оставляли перемешиваться на ночь. На следующий день к полученной смеси приливали 1.2 мл 1М раствора HCl и удаляли ТГФ при пониженном давлении. Для выделения продукта в индивидуальном виде проводили экстракцию в системе диэтиловый эфир-вода. Органическую фракцию высушивали над Na₂SO₄, растворитель удаляли при пониженном давлении. Получали 0.9 г (94%) белого кристаллического вещества.

К раствору данного соединения (0.45 г, 0.75 ммоль) в 5 мл CH₂Cl₂ добавляли DIC (131 мкл, 0.82 ммоль), DMAP (0.01 г, 0.075 ммоль) и N-гидроксисукцинимид (0.09 г, 0.75 ммоль). Реакцию перемешивали в течение ночи. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Продукт очищали колоночной хроматографией (EtOAc:Гексан 1:1, по объему). Получали 0.39 г (75%) белого кристаллического вещества.

¹Н ЯМР (DMSO-d_6, δ, м.д., J, Гц): 0.99-1.12 (м, 1Н), 1.19 (с, 3Н), 1.33 (с, 3Н), 1.37 (д, 6H, J=7.0), 1.47 (д, 1Н, J=12.5), 1.53-1.66 (м, 2Н), 2.67 (дд, 1Н, J=15.9, 8.4), 2.80 (с, 4Н), 2.85 (дд, 1Н, J=15.9, 4.3), 3.17-3.27 (м, 1Н), 3.76-3.85 (м, 2Н), 3.90-3.99 (м, 1Н), 4.20-4.26 (м, 1Н), 6.96-7.04 (м, 2Н), 7.05-7.11 (м, 4Н), 7.18-7.28 (м, 6Н), 7.51 (д, 2Н, J=7.8), 9.81 (уш. с, 1Н).

Масс-спектр высокого разрешения: вычислено для C₄₀H₄₃FN₃O₇ [М+Н]⁺ m/z 696.3079, найдено 696.3102.

Пример 2. Получение 1-((3R,5R)-7-((6-(((3R,4R,5R,6R)-3-ацетамидо-4,5-дигирокси-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)этил)амино)-3,5-дигидокси-7-оксогептил)-5-(4-фторфенил)-2-изопропил-N,4-дифенил-1H-пиррол-3-карбоксамида

К раствору NHS-эфира аторвастатина (75 мг, 0.11 ммоль) в дихлорметане добавляли диизопропилэтиламин (75 мкл, 0.43 ммоль) и 1-O-(2’-аминоэтил)-2-ацетамидо-2-дезокси-3,4,6-три-О-ацетил-β-D-галактопиранозу (41 мг, 0.11 ммоль) [синтез описан в M. Manoharan, K.G. Rajeev, J. Nair, M. Maier. US Patent US 2016/0199513 A1. 2016]. Перемешивали 24 часа. Реакционную смесь выливали в воду, экстрагировали дихлорметаном. Продукт очищали колоночной хроматографией (CH₂Cl₂:MeOH 50:1→20:1, по объему). Получали 62 мг (60%) промежуточного продукта в виде белого кристаллического соединения.

Полученный продукт растворяли в 3 мл метанола и добавляли 1 мл 0.2М раствора метилата натрия в метаноле. Перемешивали 3 часа. После чего добавляли в реакционную смесь ионно-обменную смолу Dowex 50W-X8 H+ до pH 6, которую затем отфильтровывали. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Для очистки продукта использовали обращенно-фазовую хроматографию. Получали 25 мг (48%) в виде белого кристаллического соединения.

¹Н ЯМР (CD₃OD_, δ, м.д., J, Гц): 1.32-1.38 (м, 2Н), 1.46-1.55 (м, 7Н), 1.64-1.68 (м, 2Н, CH₂-2’), 1.98 (c, 3Н), 2.21-2.33 (м, 2Н), 3.33-3.48 (м, 4Н), 3.55 (дд, 1Н, J=10.6, 3.2), 3.61-3.67 (м, 2Н), 3.70-3.91 (м, 6Н), 4.01-4.11 (м, 2Н), 4.33 (д, 1Н, J=8.4), 6.98-7.02 (м, 3Н), 7.06-7.21 (м, 11Н).

Масс-спектр высокого разрешения: вычислено для C₄₃H₅₄FN₄O₁₀ [М+Н]⁺ m/z 805.3819, найдено 805.3815.

Пример 3. Получение 1-((3R,5R)-7-((6-(((3R,4R,5R,6R)-3-ацетамидо-4,5-дигирокси-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)гексил)амино)-3,5-дигидокси-7-оксогептил)-5-(4-фторфенил)-2-изопропил-N,4-дифенил-1H-пиррол-3-карбоксамида

К раствору NHS-эфира аторвастатина (84 мг, 0.12 ммоль) в дихлорметане добавляли диизопропилэтиламин (75 мкл, 0.43 ммоль) и 1-O-(6’-аминогексил)-2-ацетамидо-2-дезокси-3,4,6-три-О-ацетил-β-D-галактопиранозу (53 мг, 0.12 ммоль) [синтез описан в Petrov R. A., et al. Synthesis and biological evaluation of novel mono- and bivalent ASGP-R-targeted drug-conjugates. // Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters. 2018. V.28. P. 382-387.]. Перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь выливали в воду, экстрагировали дихлорметаном. Продукт очищали колоночной хроматографией (Гексан:EtOAc 1:1, по объему). Получали 90 мг (75%) промежуточного продукта в виде белого кристаллического соединения.

Полученный продукт растворяли в 4 мл метанола и добавляли 1.3 мл 0.2М раствора метилата натрия в метаноле. Перемешивали 2 часа. После чего добавляли в реакционную смесь ионно-обменную смолу Dowex 50W-X8 H+ до pH 6, которую затем отфильтровывали. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Для очистки продукта использовали обращенно-фазовую хроматографию. Получали 18 мг (23%) белого кристаллического соединения.

¹Н ЯМР (CD₃OD_, δ, м.д., J, Гц): 1.31-1.42 (м, 6Н), 1.45-1.73 (м, 12Н), 1.97 (c, 3Н), 2.25-2.29 (м, 2Н), 3.12-3.19 (м, 2Н), 3.32-3.39 (м, 1Н), 3.43-3.51 (м, 2Н), 3.57 (дд, 1Н, J=10.7, 3.0), 3.61-3.68 (м, 1Н), 3.71-3.80 (м, 2Н), 3.83 (д, 1Н, J=3.0), 3.84-3.93 (м, 3Н), 3.97-4.13 (м, 2Н), 4.35 (д, 1Н, J=8.4), 7.03-7.13 (м, 8Н), 7.20-7.27 (м, 4Н), 7.30 (д, 2Н, J=8.1).

Масс-спектр высокого разрешения: вычислено для C₄₇H₆₁FN₄O₁₀ [М+Н]⁺ m/z 861.4444, найдено 861.4434.

Пример 4. Измерение растворимости полученных конъюгатов

Измерение растворимости проводили согласно описанной ранее методике [Zhang X. et al. Bioconjugate chemistry. 2017. V.28. P. 2109-2113]. Для исследуемых соединений стоили градуировочные прямые, отражающие зависимость оптической плотности растворов на длине волны 290 нм от их концентрации. Далее по построенным прямым определяли концентрацию веществ в насыщенных растворах. Для приготовления насыщенных растворов исследуемый образец, взятый в заведомом избытке, перемешивали в течение 15 минут в одном миллилитре воды, отделяли не растворившийся остаток центрифугированием.

Было определено, что растворимость кальциевой соли аторвастатина - 0.106 ± 0.009 мМ, а молярные растворимости конъюгатов - 0.33-0.43 мМ (Таблица 1). Данные, полученные экспериментально, находятся в согласии с расчетными значениями показателя ClogP, вычисленными с помощью программы CS ChemDraw Ultra (Cambridge Soft Corporation, Cambridge, MA, США).

Таблица 1. Измерение концентрации насыщенных водных растворов конъюгатов

Соединение Коэффициент пропорциональности линейной функции¹ Среднее значение интенсивности поглощения тест-растворов Концентрация насыщенного раствора, мМ ClogP Аторвастатин
(кальциевая соль) 0.01174 ± 0.00004 0.062 0.106 ± 0.009 4.46 Конъюгат (пример 3) 0.0101 ± 0.0006 0.167 0.331 ± 0.005 4.14 Конъюгат (пример 2) 0.00907 ± 0.00005 0.194 0.43 ± 0.02 3.20

¹ y - интенсивность поглощения при 290 нм, х - концентрация растворов сравнения (мкМ)

Полученные результаты свидетельствуют в пользу того, что использование выбранных N-ацетилгалактозамин-содержащих фрагментов для синтеза конъюгатов благотворно влияет на их растворимость в воде.

Пример 5. Исследование кинетики гидролиза синтезированных конъюгатов аторвастатина

Исследование стабильности полученных соединений проводили согласно методике [Petrov R. A. et al. Molecular Pharmaceutics. 2020. V.18. P.461-468]. Образец конъюгата разбавляли буферным раствором, при необходимости добавляли раствор фермента и выдерживали при 37°C в течение 24 часов, отбирая пробы в определенные временные интервалы. В исследовании использовали ацетатный буферный раствор (рН 5.0 - среда эндосом) [Maxfield F. R., Yamashiro D. J. Immunobiol. Proteins and Peptides IV. 1987. V.225. Р. 189-198], натрий-фосфатный буфер (pH 7.4 - плазмы крови), и также натрий-фосфатный буферный раствор с добавлением эстеразы свиной печени. Фермент был взят по аналогии с публикацией [Zhang Y., et al. Bioorg. Med. Chem. 2019. V.27. P. 2187-2191]. Анализ проб проводили с помощью ВЭЖХ-МС.

Конъюгаты оказались стабильными в условиях экспериментов: значимого изменения их концентрации, как и накопления продуктов гидролиза не наблюдали даже через 24 часа ни в водных средах, ни в буферном растворе с ферментом (фиг. 1).

Настоящее изобретение относится к конъюгату ингибитора 3-гидрокси-3-метилглутарил-КоА редуктазы с лигандом асиалогликопротеинового рецептора для лечения и профилактики сердечно-сосудистых заболеваний общей формулы (I) и его допустимым для использования в фармацевтике солям, где X представляет собой -OH или –NHAc, Y представляет собой

, ,

, или ,

каждый a, b, c и d независимо представляет собой -H, -D или -CH₃, каждый k, l, m и n независимо 0, 1 или 2, Z представляет собой алкил (С₂-С₆), -O-, -S-, -NH-, -N(CH₃)-, -NH-C(O)-, C(O)-NH-, -CH=CH- или -O-CH₂-CH₂-O-. Изобретение также относится к способу получения коньюгата формулы (I), не требующему использования потенциально токсичных катализаторов на основе переходных металлов. Технический результат: получены новые конъюгаты статинов с лигандами асиалогликопротеинового рецептора, которые являются хорошо растворимыми и стабильными и могут найти применение в медицине для лечения гиперлипидемии и атеросклероза. 2 н. и 6 з.п. ф-лы, 1 ил., 1 табл., 5 пр.

(I)

1. Конъюгат ингибитора 3-гидрокси-3-метилглутарил-КоА редуктазы с лигандом асиалогликопротеинового рецептора для лечения и профилактики сердечно-сосудистых заболеваний общей формулы (I):

(I)

и его допустимые для использования в фармацевтике соли,

где X представляет собой -OH или –NHAc,

Y представляет собой

, ,

,

или ,

каждый a, b, c и d независимо представляет собой -H, -D или -CH₃,

каждый k, l, m и n независимо 0, 1 или 2,

Z представляет собой алкил (С₂-С₆), -O-, -S-, -NH-, -N(CH₃)-, -NH-C(O)-, C(O)-NH-, -CH=CH- или -O-CH₂-CH₂-O-.

2. Способ получения конъюгата по п. 1, характеризующийся тем, что проводят реакцию ацилирования между активированным эфиром статина и соответствующим гликозидом галактозы или N-ацетилгалактозамина c концевой аминогруппой в органическом растворителе в присутствии основания, взятых из расчёта, что на 1.0 мольный эквивалент активированного эфира берут 1.0-1.5 мольный эквивалент гликозида и 1.5–5.0 мольный эквивалент основания, реакционную смесь перемешивают в течение не менее 8 ч при комнатной температуре для получения промежуточного продукта, который выделяют путем экстракции, дополнительно очищают прямой колоночной хроматографией и переводят в конечный продукт путем удаления защитных групп и выделения обращенно-фазовой хроматографией.

3. Способ по п. 2, характеризующийся тем, что в качестве активированных эфиров статинов используют пентафторфенил- или NHS-эфиры статинов.

4. Способ по п. 2, характеризующийся тем, что в качестве органического растворителя используют ДМФА, ТГФ, дихлорметан, дихлорэтан, хлороформ.

5. Способ по п. 2, характеризующийся тем, что в качестве основания предпочтительно использовать третичные амины, выбранные из группы, включающей триэтиламин или диизопропилэтиламин.

6. Способ по п. 2, характеризующийся тем, что выделение промежуточного продукта проводят путем экстракции в системе дихлорметан-вода или этилацетат-вода, с последующей очисткой промежуточного продукта прямой колоночной хроматографией в системе этилацетат-гексан или дихлорметан-метанол.

7. Способ по п. 2, характеризующийся тем, что для удаления защитных групп используют раствор метилата натрия в метаноле, взятого из расчета, что на 1 эквивалент промежуточного продукта берут не менее 3 эквивалентов метилата натрия, с последующей нейтрализацией реакционной смеси до pH 6 с помощью ионно-обменной смолы Dowex 50W-X8 H⁺.

8. Способ по п. 2, характеризующийся тем, что конечный продукт выделяют с помощью обращенно-фазовой хроматографии в системе вода-ацетонитрил.