Способ получения производных 5,6,7,7 @ -тетрагидро-4 @ -тиено(3,2- @ )пиридинона-2 или их солей Советский патент 1984 года по МПК C07D495/04 A61K31/381 

Изобретение относится к способу получения не г писанных в литературе производных 5,6,7,7о1-тетрагидро- 4Н-тиено(3,2-с)пиридинона-2 общей формулы-в ,j::u -н. где R - фенил, незамещенный или замещенный атомом галогена алкильнымрадикалом с 1-4 атомами углерода, нитро- и цианогруппой; R - водород или алкильный ради кал с 1-4 атомами углерода или их солей, oблaдaющиk фармакологической активностью. Известны реакции окисления борор ганических кислот или их зфиров перекисью водорода С11 и гидролиз полученных при этом соответствующих эфиров водой С21. Однако в литературе отсутствуют сведения о способе получения фармакологически активных производных 5,6,7,7 -тетрагидро-4Н-тиено(3,2-е) пиридинона-2 общей формулы (I) или их солей. Цель изобретения - способ получе ния нрвых фармакологических активны производных 5,6,7, 7а-тетрагидро-4Н-тиено(3,2-с)пиридинона-2 общей формулы (I) или их солей-. Поставленная цель достигается тем, что согласно способу получения производных 5,6,7,7а-тетрагидро-4НтиеноО,2-с)-пиридинона-2 общей формул (I) или их солей борэфирное производное общей формулы RI,(II) (R20)zB § и R - имеют указанные значе Ч - водород или низший алкильны радикал, окисляют перекисью водорода в инерт ном растворителе при 0-30°С и полученное борокисное производное общей формулы (III) имеют указанные зна 1 5 2 подвергают гидролизу водой с последующим вьщелёнием целевого продукта в свободном виде или в виде соли после обработки неорганической или органической фармацевтически пригодной кислотой. Пример 1. 5-о-Хлорбензил-5,6,7,7а-тетрагидро-4Н-тиен(3, ) пиридинон. К охлажденному до -20°С раствору 32,6 г (0,128 моль) 5-о-хлорбензш1-4,5,6,7-тетрагидро-(3,2-е)тиен-пиридина в 320 см тетрагидрофурана (ТГФ) добавляют по каплям 79 см 12%-ного раствора литийбутила в гексане (0,147 моль). По окончании добавления литийорганическое соединение выпадает в осадок, и температуре дают подняться до . Затем добавляют 15 см гексаметилфосфотриамида(ГМФТ), предварительно высушенного на молекулярном сите 4 А. Цвет осадка становится темно-красным. Температуру понижают до и добавляют по каплям в течение 30 мин раствор трибутилбората (39,8 см; 0,147 моль), в 40 см безводного ТГФ. Осадок ис езает, и цвет реакционной среды становится светложелтым. В течение 30 мин поддерживают температуру , затем ее повышают до (2 ч). Добавляют по каплям 33 см (0,291 моль) 30%-ной перекиси водорода, поддерживая температуру реакционной среды ниже . По мере добавления перекиси водорода интенсивно .образуется осадок (перемешивают втечение 1 ч при комнатной температуре). Затем вьшивают реакционную смесь в воду, экстрагируют 3x200 см эфиром, высушивают органические фазы сульфатом натрия и выпаривают в вакууме при температуре ниже . Жидкий остаток хроматографируют на колонке с силикагелем (циклогексан/этилацетат 6/4) для удаления остаточного ШФТ. После выпаривания обрабатывают мольэквивалентом щавелевой кислоты в ацетоне и фильтруют образовавшиеся светло-желтые кристаллы. После перекристаллизации из этанола получают кристаллы оксалата бежевого цвета, выход 52%, т,пл.. т. пл. 73-74, (этаОснование:Нил).

31

Хлоргидрат, полугидрат: т.пл, разлагается около (осаждение из ацетона).

П р и м е р 2. 5-Бензил-5,6,7,7сС -тетрагидро-4Н-тиен-(3, 2- с.)-2-пиридинон.

Его получают по примеру 1 исходя КЗ 5-бензил-4,5,6,7-тетрагидро-тиен-(3,2-с)-пиридина.

Малеат: бежевые кристаллы, т.пл. 132-134 С (изопропанол); вькод 33%.

Пример 3. 5-л-Хлорбензил-5,6,7, 7а тетрагидро-4Н-тиен- (3,2- с)-2-пиридинон.

Его получают по примеру 1 из 5-п-хлорбензил-4,5,6,7-тетрагидро-тиен- (3,2- С.) -пиридина.

Малеат: бежевые кристаллы, т.пл. 158-160°С (этанол); выход 42%.

Пример 4. 5-&-Метилбензил-5,6,7,7а-тетрагидро-4Н-тиен-(3,2-с.)-2-пиридинон.

Его получают по примеру 1 из 5-0-метилбензил-4,5,6,7-тетрагидро-тиен-(3,2-с.)-пиридина.

Оксалат: бежевые кристаллы, т.пл. 195-197°С (метанол); выход 33%.

П р .и м е р 5. 5-Г1(2-Xлopa-фeнил) -этил -5,6,7,7й-тетрагидро-4Н-тиен-(3,2-с)-2-пиридинон.

Его получаютпо примеру 1 из 5-t1-(2-хлор-фенил)-этил1-4,5,6,7тетрагидро-тиен-(3,2-с)-пиридина.

Хлоргидрат: желтые кристаллы, т. пл. 140-142 С; выход 24%.

П р и м .е р 6. 5- 1 ( 2-Хлор-фенил)-пропил -5,6,7, 7а-тетрагидро-4Н-тиен-(3,2-d)-2-пиридинон.

Его получают по примеру 1 из 5-С1 - (2-хлор-фенил)-пропил -4,5,6,7-те трагидро-тиен- (3,2- с), -пиридина.

Хлоргидрат: бежевые кристаллы, т. пл. 124-126°С; выход 27%.

Пример 7. 5-Триметилсилил-4,5,6,7-тетрагйдро-тиен-(3,2-с;)-пиридин. .1 . .

К раствору 80 г (0,571 моль) тетрагвдро-4,5,6,7-тиен-(3,2-е)-пиридина и 63, 4 г (0,28 моль) триэтиламина в 1100 см толуола добавляют в атмосфере азота 65 г (0,628 моль) хлортриметилсилана в 50 см толуола Реакционную среду нар-рёванзт при в течение 3 ч. После охлаждения бель1й осадок хлоргидрата триэтаноламина фильтруют и фильтрат выпаривауют в вакууме. Остаток перегоняют при

0385

60-70°С и давлении 0,1 мм рт. ст., получают бесцветную жидкость, выход 55%.

Пример 8. 4,5,6,7-Тетрагид5 ро-тиен- (3,, 2-с)-2-пиридинбороновая кислота.

К охлажденному до раствору 15 г (0,07 моль) 5-триметилсилил-4,5,6,7-тетрагидро-тиено-(3,2-с) -пиридина, полученного в примере 7, в 150 см ТГФ прибавляют по каплям в атмосфере азота 45,4 см 12%-ного раствора бутиллития в гексане (0,084 моль), дают температуре под5 няться до и добавляют 3 . После охлаждения до -50С добавляют по каплям раствор 19,3 г (0,084 моль) трибутилбората в 30 см ТГФ. Перемешивают в течение 2ч, давая смеси

0 нагреться до комнатной температуры, затем добавляют 28 см Зн. соляной кислоты (0,084 моль) и фильтруют образовавшийся осадок. Кристаллы промывают ацетоном и диизопропиловым эфи ром, затем высушивают в вакузп е. Белые кристаллы: т. пл. более выход - количественный.

П р и м е р 9. 5-0-Цианобензйл-4,5,6,7-тетрагидро-тиено-(3,2-с)0 -2-пиридинбороновая кислота.

Нагревают при в течение 3 ч смесь 3,68 г (0,02 моль) 4,5,6,7-тетрагидро-тиено-(3,2-с)-2-пиридинбороновой кислоты(полученной в приме5 ре 8), 9,09 г (0,06 моль)о -цианбензилхлорида и 5,52 г (0,04 моль) карбоната калия в 40 см диметилформамида. После испарения растворителя в реакционную смесь добавляют воду,

0 затем эктсрагируют три раза 100 см метиленхлорида. Органический раствор высушивают сульфатом натрия, затем выпаривают в вакууме. Полученные кристаллы промывают диизопропиловым

5 эфиром.

Белые кристаллы: т. пл. 140-142 0; выход 45%.

Приме р10. 5-о-Цианобензил-5,6,7, 7схг-тетрагидро-4Н-тиен-(3,2-С)-2-пиридинон.

К охлажденному до 5°С раствору : 1,8 г (0,006 моль) 5-о-цианобензил-4,5,6,7-тетрагидро-тиен-(3,2-С)-2-пиридинбороновой кислоты, полученной в примере 9, в 30 см ТГФ добавляют по каплям 0,23 г (0,006 моль) 30%-ного раствора перекиси водорода. Температуру доводят до температуры окружакщей среды и перемешивают в течение 2ч. К реакционной среде добавляют воду, затем экстрагируют метиленхлоридом. Органический раствор cyiaaT сульфатом натрия и упаривают , в вакууме. Остаток хроматографируют на колонке с силикагелем (циклогексан-этилацетат 1/1). После выпаривания обрабатывают эквивалентом щавеле вой кислоты в ацетоне и фильтруют об разовавшиеся кристаллы. Оксалат: бежевые кристаллы, т.пл. Пб-Пв С (ацетонитрил); выход 28%. Пример 11. 5-о-Нитробензил-5,6,7, 7q -тетрагидро-4Н-тиен-(3,2-с) -2-пиридинон. а)Получение 5-о-нитробензил-4,5, 6,7-тетрагидро-тиен-(3,2-с)-2-пиридинбороновой кислоты. Ее получают по примеру 9 из 4,5,6,7-тетрагидро-тиен-(3,2-е)-2-пиридинбороновой кислоты и о-нитробен3илхлорида. Коричневые кристаллы: т. пл. 132134 0; выход 40%. ЯМР (ДМ50Дб):8,0(т, 4Н); 7,50 (S, 1Н); 4,00(5, 2Н) 3,60(5, 2Н); ,2,70(т, 4Н). б)Целевой продукт получают по примеру 10 из 5-о-нитробензил-4,5, 6,7-тетрагидро-тиен-(3,2- с.)-2-пиридинбороновой кислоты. Оксалат:бежевые кристаллы, т.пл. 186-188 С (изопропанолэтанол); выход 17%. Пример 12. 5-0-Бромбензил- -5,6,7,7а-тетрагйдро-4Н-тйен- ( 3,) -2-пиридином. а)Получение 5-0-бромбензил-4,5, 6,7-тетрагидро-тиен-(3,2-е)-2-пиридинбороновой кислоты. Получают по примеру 9 из 4,5,6,7тетрагидро-тиен-(3,2-с)-2-пиридинбороновой кислоты и о-бромбензилбромида. Желтые кристаллы: т. пл. 129-131 С выход 53%. б)Получение целевого продукта проводят в условиях примера 10 из 5-(о-бромбензил)-4,5,6,7-тетрагидротиено(3,2- с) -пиридинбороновой кислоты. Оксалат: бежевые кристаллы с т. 151-153С (изопропанол); выход Приведенные ниже результаты токсикологических и фармакологических исследований свидетельствуют о свойгствах производных общей формулы. Эти исследования проведены в сравнении с известными по строению 2-хлорбензил-5-тетрагидро-4,5,6,7-тиен-(3,2- с) -пиридином, называемым далее соединением А, и 2-циано-5-бензил-4,5,6,7-тетрагидро-тиен- (3,2- с) -пиридином, называемым далее соединением В. Токсикологи еское исследование. Были изучены острая, хроническая, субхроническая и замедлс чная токсичности. Опыты, проведенные на различных видах животных(мышах, крысах и кроликах), свидетельствуют о слабой токсичности соединений общей формулы (I), а также об их хорошей толерантности. В табл. 1 приведены LD 50/24 ч/кг веса тела при внутривенном введении мьшгам, а также представлены результаты, полученные для производных формулы (I) и для сравнительных соединений А и В. Эти результаты показывают, что токсичность производных общей формулы (I) по меньшей мере вдвое Меньше .токсичности сравнительных соединений А и В. . Таблица 1 Соединения по LD50,Mr примерам Сравнительное соединение 711 Кроме того, опыты показали, что производные общей формулы (I) не вызвали у животных различных видов местных или общих реакций, нарушений биологического контроля или расстройств микро- или макроскопического характера. Исследование потомства не обнаружило тератогенного действия соединений общей формулы (I). Фармакологическое исследование. Была изучена способность подавлять аггрегацию тромбоцитов и противотромбозная активность по сравнению с соединенияни А и В. 1. Подавление аггрегации тромбоцитов . У крыс Wistar, предварительно обработанных исследуемым соединением, берут кровь из яремной вены. Из этой крови, после обработки цитратом и центрифугирования, получают плазму, содержащую 600000+20000 тромбоцитов в 1 мм, которую применяют в дальнейшем для всех определений аггрегации тромбоцитов. Определение аггрегации тромбоцитов при помощи АДФ. Помещают 0,4 мл плазмы в силиконовую трубку, снабженную намагниченным силиконовым прутком. Трубку устанавливают в агрегометр, соединенный с прибором, позволяющим регистрировать изменения оптической плотности. Когда прохождение света достигает постоянкого значения, в трубку вводят 0,5мл

Таблица 2 85 раствора, содержащего 10 мкмоль АДФ (аденозиндифосфата)., Аггрегация тромбоцитов вызьшает повышение пропускаемости.света, которое сопровождается последующим понижением пропускаемости на границе фаз. Максимальное изменение оптической плотности, определенное таким образом по отношению к плазме, не содержащей тромбоцитов, характеризует интенсивность аггрегации. Определения выполняют в течение 2 ч после обработки испытуемым соединением. Определение аггрегации тромбецитов при помощи коллагена. Раствор АДФ заменяют раствором коллагена, взятого из бычьих сухожилий . Были исследованы различные партии по 20 крыс каждая. Каждая партия получила одну дозу испытуемого производного орально, причем тоже производное давали в разных дозах от 5 до 100 мг/кг. Значительная активность производных общей формулы (I) проявляется при дозе 12,5 мг/кг, тогда как для сравнительных .соединений А и В для получения такой же активности требуются дозы 100 мг/кг. Результаты опытов с АДФ и коллагеном сведены соответственно в табл. 2 и 3, где Показано процентное подавление аггрегации тромбоцитов, достигнутое по сравнению с контрольным опытом, через 3 ч после обработки испытуемым соединением.

Способ получения производных 5,6,7,7а-тетрагидро-4Н-тиено-

51,0

83,6

83,7

84,0

84,1

10

1110385

Продолжение табл,2

Исследование кинетики аггрегации тромбоцитов.

Был проведен эксперимент, относящийся к исследованию кинетики соединений общей формулы (I). Производное из примера № 1 и сравнительное соединение А растворяют в пропиленгликоле и дают крысам интраперитонально в дозе 100 мг/кг веса тела, тогда как контрольные мыши получают интраперитонально только 1 мл/кг пропиленгликоля. Кровь отбирают через Из табл. А видно, что по отношени к сравнительному соединению А соединение из примера № 1 значительно сил нее подавляет агрегацию тромбоцитов и это действие наступает гораздо быстрее. 2. Противотромбозная активность. Эта активность изучена по методу экспериментального тромбоза путем экстракорпорального кровообращения. У крысы, анестезированной путем интраперитонального введения пентЬбарбитала, обнажены левая яремная и правая внешняя сонные артерии. Шуят составлен из одного центрального:и двух боковых катетеров; белую нить и натурального шелка вводят в централь ную часть и кровообращение восстанавливают в течение 20 мин.

10 и 60 мин после введения, затем et; центрифугирзпот для получения обогащенной тромбоцитами плазмы.

Аггрегацию тромбоцитов в плазме, вызванную АДФ, определяют при помощи аггрегометра Брайстона по нефеломётрическому методу Борна.

Зависимость процента подавления от времени, полученная в результате зтого зксперимента, представлена в табл. 4.

Таблица 4 После остановки кровообращения путем наложения зажима нить осторожно вытягивают и немедленно взвешивают. Средний вес одной влажной шелковой нити по предлагаемому определению составляет 5,10 мг. с: Обработку проводят За 47, 24 и 2ч до начала кровообращения по шунту. . , , ;.- - Продукты вводят перорально различным партиям, состоящим из 20 животных каждая, в виде суспензии 10 мл/кг 5%-ного гуммиарабика в дозах 12,5; 25; 50; 100 и 200 мг/кг. В табл. 5 сведены результаты опытов с производными Из примеров 1 и 3общей формулы (1) и сравнительным соединением А, представлеиные в виде средних зиачений, вычисленные для каждой партии. - Т а б л и ц а 5

30,09

30,45

30,41

Этот опыт илгаострирует активность соединений общей формулы (1), которые выз1ывают значительное уменьшение среднего веса тромбов, начиная с дозы 25 мг/кг, тогда как сравнительное соединение А совершенно не проявляет противотромбозного действия даже при повьшенньпс дозах.

Кроме того, опыты показывают, что в протйвоположнйсть соединениям А и В производные общей формулы (I) совершенно не обладают противовоспалительными свойствами и не оказывают сосудорасширяющего действия. Следовательно, они проявляю гораздо более избирательные свойства, что придает им большой интерес с точки зрения терапии, когда дополнительная активность, если она не требуется, может повредить больному.

Описанные токсикологические и фармакологические исследования свидетельствуют о слабой токсичности соединений общей формулы (I) и их хорошей толерантности, а также об

23,13

23,04

28,86

их способности подавлять аггрегацию тромбоцитов и противотромбозных свойствах, которые обуславливают целесообразность их применения при лечении человека и животных.

Соединения формулы (I) могут использоваться для орального приема в виде таблеток, драже, капсуя, капель, для парентерального приема в виде растворов для инъекций и для ректального введения - в виде свечей

. Соединения .общей формулы (I) можно применять вмедицине благодаря их способности подавлять аггрегацию

тромбоцитов и их ПрОТИВОТрОМбоЗНОЙ Jj

активности. Вследствие их способности подавлять некоторые функции тромбоцитов путем, воздействия на механизм образования артериальных и венозных тромбозов эти соединения показаны при лечении и предупреждении тромбозных расстройств, вызванных экстракорпоральными токами или являющихся следствием ослолснений атеромы.