Способ получения N-(1-цианобензил)-амидофосфита или -фосфонита общей формулы Советский патент 1987 года по МПК C07F9/24 A61K31/664 C07F9/46 C07F9/48 

11 Изобретение относится к химии.фос форорганических соединений, а именно к новому способу получения Н-(1-цианобензил)-амидоЛосфита или -фосфонит общей формулы - -СН-СбН5 СНз С1Я где R R ОС НуИЛи при R - С.,Н R- CN, которые обладают антивирусной активностью и могут найти применение в ме дицине . Известен способ получения амидов кислот трехвалентного фосфора взаимо действием галоидангидридов кислот трехвалентного фосфора с аминами или амидогалоидфосфонитов и амидогалоидфосфитов со спиртами в инертных орга нических растворителях в присутствии третичных органических оснований. Известные способы имеют существен ный недостаток, так как получаемые амиды загрязнены солями аммония, которые существенно влияют на реакцион ную способность амидофосфитов и могут изменить направление процесса. Кроме того, для получения соединений формулы I известными способами необходимы труднодоступные цианоалкиламины. Известен также электрохимический способ получения амидофосфитов. Однако в зтом случае требуется применение специальной аппаратуры: электрохимической ячейки, потенциостата, инертной атмосферы. Кроме того, по этому методу не могут быть получены амиды с цианогруппой в боко вой цепи. Соединения формулы 1 в литературе не описаны и являются новыми. Целью изобретения является разработка простого и доступного способа получения N-(1-цианобензйл)-амидофос фйта или -фосфонита, которые обладают антивирусной активностью. Прставленная цель достигается опи сьшаемым способом получения N-(1-цианобензип)-амидофосфита или -фосфонита общей формулы I, который заключается в том, что цианид трехвалентного фосфора общей формулы ,/P-CN 12 где R R OCjHj или при R- . R - CN, подвергают взаимодействию с метилбензальамином при эквимольном соотношении реагентов при комнатной температуре, причем в случае получения фосфита при R и R - процесс ведут в присутствии катализатора C18Jкраун-6, взятого в количестве 0,00120,002 моля на 1 моль исходного реагента. Уменьшение количества катализатора снижает скорость процесса и выход целевого продукта. Увеличение количества катализатора ведет к осмолению реакционной смеси и уменьшению выхода продукта. Реакция протекает по схеме j P-CN+C6H5CK JCHj- P-N-CHCgHs .R CHj CM Указанная реакция является не очевидной. Так, например, известно, что фосфины, ацилфосфиты и триалкилфосфиты реагируют с азометинами с образованием соединений с Р-С-, а не P-N-фрагментом. В описываемом способе используется не известная ранее реакция цианидов трехвалентного фосфора с азометинами, что обеспечивает образование амидофосфитов с функциональной цианогруппой в амидном радикале и при атоме фосфора. Найдено, что при введении цианогруппы в молекулу амндофосфитов, повьшается их устойчивость к окислению,а также они становятся биологически активными. Строение полученных соединений доказано данными КРС и ЯМР - спектроскопии, состав подвержден данными элементного анализа. Пример 1. К-Метил-Ы-(1-цианобензйл )-амидоэтилцианофосфонит . К 4,4 г (0,04 моль) (СЮ2 прикапывают 4,5 г (0,04 моль) .СН НСНз при комнатной температуре. Разгонкой выделяют 6.,4 г (58%) продукта с т.кип. (0,07 мм); d 4° 1,1164; 1,5500. Найдено, %: С 62,30; Н 6,1; Р 13,44; N 18,20. С,,Н,КЭ.Р. Вычислено, %: С 62,34; Н 6,06; Р 13,42; N 18,18. Спектр КРС (,, см-) 2240, 2170 (); (/, М.Д.): +44,38. П р и м е р 2; К-Метил-Ы-(1-циано бензил)-амидо-0,0-диэтилфосфит. A,К смеси 7,6 г (0,05 моль) (CjH50)7PCN и 6,1 г (0,05 моль) СбН5СН ЫСНз прибавляют 0,04 г (0,00015 моль) С18 -краун-6, Смесь разогревается до 70 - 80°С и постепенно темнеет. Через 3 ч разгонкой смеси выделяют 4,6 г (34%) Ы-метилUJ- (1 -цианобензил) -амидо-0.0-пиэтилфосфита с т.кип. 105°С (0,03 мм); d 1,0440; пЬ 1,5000. Спектр (с/, м.д.) +148; КРС (,}, см-) 2230. Уменьшение количества 18 -краунниже 0,015 г снижает скорость процес са и выход целевого продукта. Б. К смеси 7,6 г (0,05 моль) (CjH50)2PCN и 6,1 г (0,05 моль) С Н5СН М-СНзПрибавляют 0,01 г (0,000037 моль) 183-краун-6 и вьщер живают трое суток при комнатной температуре. Разгонкой вьщеляют 7,8 г (54%) Ы-метил-Ы-(1-цианобензил)-ами.до-0,0-диэтилфесфита с т.кип. 103С (0,03 мм); d ( 1,0647; , 1,5040. Спектр , м.д.) + 148; КРС (J, см- ):2230 (). B.К смеси 7,6 г (0,05 моль) . (C2HjO)2PCN и 6,1 г (0,05 моль) прибавляют 0,015 г (0,00006 моль) 18 -краун-6 и выдерживают сутки при комнатной температу ре. Разгонкой выделяют 10,1 г (75%) продукта с т. кип. 105° С (0-,03 мм); 1,0648; ПЕ 1,5040. Спектр КРС (,), см-0:2230 (CsN), (/, м.д + 148. Г. К смеси 7,6 г (0,05 моль) (C2H50)zPCN, 6,1 г (0,05 моль) (С Н5СН Ы-СКз прибавляют 0,03 г (0,0001 моль) 18 -краун-6 и вьщерж вают сутки при комнатной температур Разгонкой выделяют 10,6 г (80%) про дукта с т.кип. 105°С (0,03 мм); d 1,0647; п 1,5040. Спектр КРС (л), см-):2230 () ((У, м.д + 148. . Описываемый способ получения амид фосфитов по сравнению с известнь ми

обладает рядом преимуществ.

Он позволяет получить чистые про;дукты, не загрязненные примесями (соплями аммония).

Способ осуществляется в отсутствии растворителей и соединения получают в мягких условиях, при комнатной температуре, не требуются фильтрования

ЗОЙ вируса при концентрации 15,6; 31,2; и 62,5 мкг/мл. Минимальные концентрации соединений, задерживающих 55 репродукцию вируса в 8 - 16 раз меньше минимальной токсической дозы для ХАО. Как видно из данных таблицы, антивирусная активность полученных соединений находится на уровне издля отделения Осадка и специального охлаждения. Испытание противовирусной активности проводили по отношению вируса А2 штамм Ленинград 32/74. Репродукцию вируса гриппа и испытание противовирусной активности проводили на переживающих кусочках хорионаллантоисной оболочки (ХАО) куриного эмбриона (КЗ). В процессе работы была доказана возможность культивирования фрагментов ХАО и репродукции вируса в растворе Хенкса. Для определения токсичности соединение разводили (с коэффициентом 2) на растворе Хенкса и разливали по 0,5 мл в 6 лунок панели, куда вносили по фрагменту ХАО (1,5 2 мм). Через 48 ч инкубации проверяли состояние оболочек. Минимальной токсической дозой считается та наименьшая концентрация, которая вызывает гибель клеток ХАО. Вирус пассивировали заражением - дневных куриных эмбрионовПо общепринятой методике. Испытание проводили АЛ-лантоисным вирусом, титр которого на куриных эмбрионах был равен 10 и на клетках ХАО не меньше 10-, титр гемагглютинина 2048. Испытания проводили с 1, 10 и 100 дозами вируса и с каждым разведением соединения (с коэффициентом 2), концентрациями меньшими, чем минимальная токсическая доза для клеток ХАО, и с каждой дозой вируса становился опыт на ХАО в 6 лунках панели. Через 48 ч инкубации при наличии жизнеспособных клеток определяли наличие вируса в реакции гемагглютинации с 1% взвесью эритроцитов крови человека I (0) группы. в тех же условиях ставили контрольные опыты о ремантадином (см. таблицу) . Новые соединения задерживают репродукцию при заражении 100 дозами вируса гриппа А2 штамм Ленинград 32/74 при концентрации соединения 125 250 мкг/мл и при заражении одной до.5 11430416

вестных соединений, обладанлцих анти-штамм Ленинград 32/74 в переживающих

вирусной активностью.клетках ХАО.

Таким образом, Н-(1-цианобензил)-Способ их получения является ОДУОамидофосАит и -фосфонит обладают про-стадийным, позволяет получать целевые

тивовирусной активностью, они предот-е продукты из доступных реагентов и с

щращают репродукцию вируса гриппа А2хорошим выходом.

Амтивирусная активность по отношению к вирусу гриппа А2 штамм

Ленинград 32/7А

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ Ы-